핵산 정제는 어떤 요구를 만족시켜야 합니까?
DNA 정제는 복제와 PCR 에서 게놈 시퀀싱 및 칩 분석에 이르기까지 많은 분자 생물학 및 유전체학 응용 분야에서 유일한 방법입니다. 그러나 최고의 정화 키트를 선택하는 것은 쉽지 않습니다. 예를 들어, 게놈 DNA 를 정제할 때 플라스미드 DNA 를 분리하지 않고 핵산을 부드럽게 처리할 수 있는 테스트 키트 하나가 필요합니다. 그리고 차세대 시퀀싱 기술은 샘플에 대한 요구가 높으며 DNA 를 정제하기 위해 특별한 제품이 필요합니다. 여기서는 몇 가지 새로운 옵션을 소개합니다. 소금 침전 진중 마스터 푸어 (Illumina 자회사 Illumina)? CompleteDNAPurificationKit 은 특허 소금 침전 법을 사용합니다. 이 테스트 키트 시리즈는 혈액, 고정조직, 식물, 효모, 곤충 등 다양한 샘플 유형을 포괄한다. 단 30 분 만에 핵산의 높은 생산량을 가져올 수 있어 손실이 적다. Epicentre 의 선임 제품 관리자인 CristineKinross 에 따르면, 이러한 테스트 키트 덕분에 사용자는 시퀀싱 또는 기타 분자 생물학 응용 프로그램을 위해 샘플을 준비하기 전에 추가 순화가 필요하지 않습니다. 그것들은 단백질과 기타 세포 파편을 제거할 수 있으며, 반드시 제거해야 하는 유독화합물을 도입하지 않고 중복 세탁을 피하고 핵산 생산량을 증가시킬 수 있다. 김로스는 "마스터퍼에서 회수한 핵산의 순도가 매우 뛰어나 샘플을 시퀀싱 문고에 직접 들어갈 수 있다" 고 말했다. 물론 칩, qPCR, 클론 등 다른 애플리케이션에도 적용됩니다. 또한, 이 테스트 키트 또한 RNA 정제에 사용될 수 있습니다. 총 핵산을 얻은 후 DNA 효소 처리를 통해 총 RNA 를 얻을 수 있다. 다양한 테스트 키트 Promega 는 여러 가지 다른 전략을 사용하여 다양한 핵산 정제 테스트 키트 를 제공합니다. 마법사처럼요? GenomicDNAPurificationKit 은 고전 침전 법에 근거하여 전혈, 조직 배양 세포, 동식물 조직, 효모, 세균에서 게놈 DNA 를 유연하고 효율적으로 추출할 수 있다. ReliaPrep 은? 이 테스트 키트 시리즈는 기둥 추출 방법을 사용하여 간단하고 빠릅니다. 또한 Promega 는 자기 구슬 순화에 기반한 테스트 키트 기능도 제공합니다. Promega 유전체학 글로벌 제품 관리자인 EricVincent 는 "용액의 정확한 구성은 다를 수 있지만 분해, 결합, 세척 및 세탁의 기본 과정은 실리콘 또는 섬유소와 같은 다양한 결합 방법, 다른 순화 형태 (순화 기둥 또는 자석), 수동 및 자동 순화 작업에 적용된다" 고 말했다. 일부 매우 중요한 샘플 유형 (예: FFPE 샘플) 의 경우 특별한 작업이나 처리가 필요합니다. 빈센트는 "하류 반응을 억제하는 물질을 효과적으로 제거할 수 있는 독특한 결합/세척 완충액을 개발했으며, 최적화된 시스템을 통해 연구원들은 소량의 핵산을 캡처하여 작은 크기 (30μl 미만) 로 씻을 수 있게 되었습니다. 또한 다양한 시약 및 플럭스에 적합한 자동화 솔루션을 개발했습니다." 라고 빈센트는 말합니다. 이 테스트 키트 들은 억제제가 세제액에 남아 있는 것을 피하면서 아주 작은 부피로 핵산을 씻을 수 있는 완벽한 해결책을 제공한다. 이러한 테스트 키트 정화를 통해 핵산은 PCR, Sanger 시퀀싱, 차세대 시퀀싱 및 칩과 같은 다운스트림 분석에 사용될 수 있습니다. QIAGEN 클래식 실리콘막 핵산 순화 테스트 키트 는 DNA 와 실리콘막의 순화 기둥에 의존하는 결합이다. 억제제를 제거하면 완전한 DNA 가 기둥에서 씻겨 나와 생산량이 높고 순도가 높아 품질이 더 높은 차세대 염기서열 문고를 가져왔다. QIAGEN 샘플 준비 글로벌 제품 관리자인 Marco Lidori 는 매우 작은 샘플이나 FFPE 와 같은 어려운 샘플을 처리할 때 생산량이 특히 중요하다고 생각합니다. FFPE 샘플에서 생성되는 DNA 에는 무작위 시토신 탈암모니아 작용이 발생할 수 있으며, 이로 인해 인공 단일 뉴클레오티드 다형성 (SNP) 이 발생할 수 있습니다. 그러나, QIAGEN 의 GeneReadDNAFFPEKit 은 NGS 실험에서 잘못된 결과를 피하기 위해 탈 아미노 시토신을 제거할 수 있다. 이 제품은 아직 ga 되지 않았습니다. 시험에 관심이 있으시다면 정보를 기입해 주십시오. Polidori 는 "우리의 테스트 키트 대부분이 순환종양 DNA 의 전체 게놈 시퀀싱에서 미생물 그룹에 이르기까지 NGS 응용에서 검증되었다" 고 말했다. 이러한 테스트 키트 덕분에 사용자는 다양한 샘플에서 고품질의 DNA 를 얻을 수 있고, FFPE 샘플의 C-T 착각을 피하고, 단시간에 고분량의 DNA 를 얻을 수 있다. MagAttractHMWDNAkit 은 간단한 구슬 조작으로 100-200kbDNA 를 정제할 수 있다. 전체 순화 과정은 오염물과 억제제를 부드럽게 제거하며 수율과 순도가 매우 높다. 리액염회사 마알드리치가 제공하는 게네루? Mammaliangenomicpurification kit 은 이액염 시약 기반 제품입니다. 이액염을 함유한 용액에서 샘플은 분해되어 대분자의 완전한 변성을 확보한다. 에탄올을 첨가하여 DNA 와 실리콘 필름을 결합하다. 오염물을 씻어내고 트리스 완충액에서 DNA 를 씻는다. 게놈 DNA 분리를 위한 실리콘막을 전문적으로 선택함으로써 다양한 샘플에서 배양된 세포, 조직 (쥐 꼬리 포함), 신선한 전혈이나 백혈구를 포함한 고품질 DNA 를 정제할 수 있게 해 주는 테스트 키트. 이 테스트 키트 은 실리콘막 결합 과 미량 원심력 의 장점 을 결합하여 비싼 수지, 에탄올 침전 과 페놀, 염소 모조 등 유해 유기물 을 피한 것으로 알려졌다. 더 중요한 것은 순화된 DNA 가 제한 효소 절단, PCR, Southernblot, 시퀀싱 등에 사용될 수 있다는 점이다. (저자: JamesNetterwald/ 생물학 컴파일)