애완동물의 질병 진단과 일상적인 보건 서비스를 포함한 애완동물 의료 서비스는 애완동물 업계에서 애완동물 식품 다음으로 두 번째로 큰 하위 산업이다. 질병의 종류에 따라 애완동물 의료 서비스에는 애완동물 외과 질환 내과병 피부병 전염병 애완동물 면역이 포함된다. 전염병은 세균이나 바이러스와 같은 일부 병원성 미생물에 의해 발생하며, 일부 동물이나 여러 동물 간에 전파될 수 있다. 애완동물을 잘 키우는 관건은 질병의 예방이다. 특히 일부 전염성 질환은 발병이 급하고 전파가 빨라 동물의 건강에 큰 위협이 된다.
사람들의 삶의 질이 점차 향상됨에 따라 개와 고양이는 사람들의 생활에서 점점 더 중요한 역할을 하고 있다. 그리고 주인의 관념과 애완동물 의료의 질이 해마다 높아지면서 동물질환 진단의 정확도도 이전의' 맹인접촉상' 에서 분자 진단 수준으로 점차 옮겨가고 있다.
현재 분자 진단 기술은 세균 감염, 바이러스 감염, 기생충, 곰팡이, 사람, 동물병 등 전염병에 널리 사용되고 있다. ), 종양 등 분야는 감도가 높고, 특이성이 강하며, 간단하고 빠르며, 질적 정량 검사 등의 장점을 가지고 있다. 분자 진단 검사 결과가 임상 의료 결정에 기여한 기여도가 더욱 높아져 검사 결과의 중요성이 전례 없는 수준에 이르렀다.
애완동물 전염병 탐지 기술 방면에서 분자 진단 핵산검사 방법도 높은 감도와 특이성을 가지고 있어 전염병 검사 창기간을 최소화할 수 있다. 이 방법도 인간의 전염병을 임상적으로 진단하는 황금 방법이다.
이 중 PCR 은 가장 일반적으로 사용되는 분자 진단 방법입니다. PCR 기술은 한 쌍의 과뉴클레오티드를 유인물로 사용하여 트랜스젠더-어닐링-확장의 순환을 통해 목적 DNA 를 증폭시켜 고감도와 특이성의 장점을 가지고 있다.
실시간 형광 정량 PCR 은 정성에서 정량 PCR 으로의 질적 도약을 이루었다. 실시간 형광 정량 PCR 기술 (PCR 반응체계에 형광기단을 추가하여 형광신호를 통해 전체 PCR 과정을 실시간으로 모니터링함) 은 기존 PCR 의 장점을 가지고 있을 뿐만 아니라 특이성, 민감도, 반복성, 반응 속도, 정량정확성, 자동화 수준 등의 특징을 갖추고 있어 국제적으로 공인된 핵산 분자 정량의 표준 방법이 되었다.
실시간 형광 정량 PCR 은 애완동물 질병을 조기에 정확하게 진단할 수 있다.
현재 애완동물 임상 업무에서는 특정 병원체 진단을 어렵거나 정확하게 할 수 없다는 문제가 널리 퍼져 있다. (윌리엄 셰익스피어, 애완동물, 애완동물, 애완동물, 애완동물, 애완동물, 애완동물, 애완동물) 구체적으로 다음과 같은 측면에 나타난다.
1, 기존 진단 기술은 감도가 낮습니다.
바이러스 진단에 일반적으로 사용되는 콜로이드 골드 시험지. 콜로이드 골드 시험지는 빠른 진단을 제공할 수 있지만, 이 방법은 단백질 수준에서 병원체, 특정 교차 반응과 동물 자체의 항체 간섭이 있어 임상 응용에서 위양성 및 위음성 결과가 나타나는 것이다. (데이비드 아셀, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 동물명언)
2. 질병의 조기 진단 (예: 잠복기) 과 항원에 대한 요구가 높은 질병.
예를 들어, 기존의 진단 기술 (콜로이드 골드 시험지 및 ELISA 검사 방법) 을 사용하면 정확한 진단 기준을 제공할 수 없습니다. 개 디스템퍼, 파보 바이러스,
3. 임상적으로 많은 병원체 들이 상용화되지 않았고 상용화 생산 시약 도 불편했다.
현재 이 부분 병원체 (예: 고양이 전염성 복막염) 의 진단은 수의사가 임상 근무하는 병원에서 할 수 없다. 혈액 도포와 대변 검사가 필요하다면 주관성이 강해서 진단을 놓치기 쉽다.
4, 질병 예방 및 통제 과정에서.
예를 들어, 백신 접종은 개 고양이 항체 질병을 예방하는 주요 조치이지만 혈청학 검사가 백신 면역이 생성되는지 바이러스 감염이 생성되는지 구별하기 어렵고 PCR 은 병원체 검사를 정확하게 할 수 있다.
미량 병원체 진단이 어려운 사례가 여전히 있습니다.
파바베스충과 같은 질병.
따라서 PCR (특히 실시간 형광 양적 PCR) 은 이러한 질병의 정확한 진단을 가능하게 합니다.
농업부가 발표한 20 13 전국 동물병 감시 및 역학 조사 계획의 요구에 따라 우리나라의 현행 애완동물병 진단 국가 기준과 함께' 개 파보 바이러스 진단 기술' (GB/T27533-201/KLOC-) 을 공포했다.
적절한 PCR 제품을 선택하는 것은 pet 진단에 특히 중요하다.
임상작업에서 수의사가 선택할 수 있는 PCR 은 핵산 추출, 등온 증폭, 액체 시약, 동결 건조 시약, 자동 PCR 등을 포함해 수의사가 선택할 수 없는 경우가 많다. 어떻게 객관적으로 이것들을 보고 과학적 선택을 할 수 있는지, 다음에는 상세히 설명하겠다. (존 F. 케네디, 과학명언)
핵산을 추출하지 않으면 위음성 확률이 높아진다.
핵산 추출은 분자 진단 실험의' 첫 단계' 로 매우 중요한 부분이다. pet 샘플의 핵산을 먼저 추출해야 후속 검사를 할 수 있기 때문에 핵산 추출의 중요성을 알 수 있다. 핵산 추출은 순수화 (샘플의 간섭 물질 제거) 와 농축 (샘플의 핵산 농도 증가) 의 두 가지 주요 목적이 있다. PCR 검사 샘플 (혈청, 전혈, 세포 보존액, 배설물 등) 에는 많은 방해물과 억제물이 들어 있기 때문이다. ), 핵산 함량이 낮아 핵산을 직접 감지하기가 어렵고 감도가 떨어진다. 따라서 검사를 하기 전에 샘플의 핵산을 분해, 정제, 농축, 즉 핵산 추출이 필요하다. 이것은 업계의 주류 관행이다.
예를 들어, 임상적으로 코인두 면봉과 구강 면봉의 세제는 간단합니다. 생리염수+소량의 분비물+대량의 유리바이러스로 핵산 추출 없이 바로 증폭할 수 있습니다. 고양이 포진 바이러스 FHV- 1 은 면봉으로 코와 입에서 샘플링하여 감지할 수 있다. 면봉의 세제가 깨끗하면 순화 단계를 생략할 수 있지만 농축되지 않아 검사의 민감도가 낮아진다.
또한 복잡한 샘플은 핵산 추출을 수행해야합니다. 예를 들어, 고양이 관상 바이러스 (FCoV) 는 대부분 고양이의 복수에서 발견된다. 복수 샘플은 매우 끈적하고 단백질이 많이 함유되어 있어 직접 검사할 수 없다. 이 샘플은 추출을 거치지 않고 직접 확대되는 것이 감도가 떨어지는 문제가 아니라 감지할 수 없는 문제이다.
등온 증폭의 단점은 비용이 많이 들고 많은 제품에 특허 보호가 필요하다는 것이다.
등온 증폭기는 간단하고, 검사 시간이 빠르며, 감지 감도는 PCR 과 비슷하다. 등온 증폭 기술은 대부분 해외 발명품으로, 현재 특허 보호 기간에 있으며, 응용은 보편화되지 않고 비용도 상대적으로 높다.
진공 동결 건조 기술은 많은 장점을 가지고 있으며 PCR 시약 발전 추세입니다.
PCR 의 시약 성분으로는 정화수, 프라이머, 중합 효소, Mg2+, dNTP 및 프로브가 있습니다. 이 성분들이 섞이면 상온에서 점차 분해되어 무효가 된다. 따라서 액체 PCR 시약 (PCR) 는 다른 작은 병에 나누어 보관해야 합니다.-20 C, 사용 시 다시 해동하여 조제해야 합니다. 따라서 시약 보관, 운송, 운영은 모두 번거롭다.
진공 동결 건조 기술은 유효 성분을 손상시키지 않고 시약 속의 수분을 완전히 승화시킬 수 있다. 동결 건조 된 시약 콜드 체인 운송 없이 실온에서 저장할 수 있습니다. 사용시 물을 넣어 녹인 다음 일반 PCR 시약 처럼 사용할 수 있어 PCR 시약 추세입니다.
새로운 핵산 증폭 기술인 쑤저우 선다 유전자 (gendx.cn) 와 완전히 자율적인 지적재산권을 가진 효소 촉매 등온 증폭 기술 (ERA 기술) 을 소개한다. 유전자 공학을 통해 다효소 시스템 (예: 재조합효소, 핵산 외절효소, 중합효소 등). , 개조를 진행하여 전문적인 증강반응 체계를 세웠다. 30 ~ 42 C 의 항온 조건 하에서 미량의 DNA/RNA 의 특정 단편은 20 분 안에 증폭될 수 있다. 이 기술은 PCR 증폭의 특이성과 LAMP 기술의 편리성을 갖추고 있어 정확도가 높다.
그것은 감지 가능성, 민감성, 신속성, 특이성의 장점을 가지고 있다. 반응조는 이미 혼합되어 건조가루로 얼어서 조작이 간단하고 보존하기 쉽다. 그리고 전 과정 자체 생산으로 상대 가격이 더 우세하다. 동시에 형광 항온 증폭기와 함께 핵산의 현장 검사를 실현할 수 있으며, 더 이상 장소, 시간, 인원의 제한을 받지 않는다.
분자 진단은 체외 진단 기술의 제 4 차 혁명으로 분자생물학 방법을 이용하여 환자 (애완동물) 체내의 유전물질 구조나 표현 수준의 변화를 검출하여 질병의 예방, 예측, 진단, 치료 및 예후에 더 정확한 정보를 제공한다. 다른 검출 방법에 비해 비교할 수 없는 우세를 가지고 있다. PCR 은 분자 진단에서 가장 많이 사용되는 검사 방법으로 애완동물의 임상 진단에서 점점 더 중요해질 것이다. 동시에, 우리는 또한 우리가 개척한 유전자 등온 증폭 핵산검사 기술이 그 검출 속도가 빠르고 저렴한 장점으로 적시에 현장 검사 시장에서 두드러지게 나타날 것이라고 믿는다.