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고성능 액체 크로마토 그래피의 원리와 작동 단계
1. 고성능 액체 크로마토 그래피 원리

고효율 액조색 스펙트럼 원리 고효율 액조색 스펙트럼의 응용 및 원리 분석.

고효율 액상색보법은 화학반응을 통해 유기화합물로 변할 수 있는 무기물을 포함한 유기화합물을 분리, 분석 및 정제하는 효과적인 방법 중 하나이다.

약 80% 의 알려진 유기화합물은 고효율 액조색 스펙트럼을 통해 분리 분석을 할 수 있으며, 이 방법은 조건이 온화하고 샘플에 손상이 없으며, 특히 끓는점이 높고 기화가 어렵고 열 안정성이 떨어지는 유기화합물과 생물물질에 적합하다. HPLC 시스템은 일반적으로 주입 펌프, 샘플러, 스펙트럼 기둥, 탐지기, 데이터 기록 및 처리 장치 등으로 구성됩니다.

주입 펌프, 컬럼 및 검출기는 핵심 구성 요소입니다. 일부 기기에는 그라데이션 용출 장치, 온라인 탈기, 자동 샘플러, 기둥 또는 보호, 기둥 온도 컨트롤러 등이 포함됩니다. 현대 HPLC 기기에는 기기 자동 제어 및 데이터 처리를 위한 마이크로컴퓨터 제어 시스템도 있습니다.

준비형 HPLC 기기에는 자동 증류 수집 장치도 장착되어 있습니다. 현재 해외에서 흔히 볼 수 있는 HPLC 기기 제조업체는 Waters, Agilent (원래 HP 회사), Shimadzu (Shimadzu 회사) 로, 국내에는 상하이 오풍과학기기유한공사, 상하이 하공과학기기유한공사, 대련 익원 Jung Su 회사, 베이징 혁신통항회사, 베이징문지사가 있습니다.

첫째, 주입 펌프 1. 펌프의 구조와 성능 주입 펌프는 HPLC 시스템에서 가장 중요한 구성 요소 중 하나입니다. 펌프의 성능은 전체 품질 및 분석 결과의 신뢰성에 직접적인 영향을 미칩니다.

주입 펌프는 다음과 같은 성능을 가져야 합니다. ① 흐름이 안정적이며 RSD 가 0.5% 미만이어야 합니다. 이는 질적 정량 분석의 정확성과 관련이 있습니다. (2) 유속 범위가 넓으며 분석형은 0. 1~ 10ml/min 범위 내에서 지속적으로 조정되어야 하며 준비형은100ML/MIN 에 도달해야 합니다. ③ 수출 압력이 높으면 일반적으로150 ~ 300KG/CM2 에 도달해야 한다. ④ 유압 실린더 부피가 작다. ⑤ 우수한 밀봉 성능 및 내식성. 펌프의 종류가 매우 많아서 수액의 성질에 따라 정전압 펌프와 정전류 펌프로 나눌 수 있다.

정전류 펌프는 나선형 제트 펌프, 플런저 왕복 펌프 및 왕복 펌프로 나눌 수 있습니다. 정압 펌프는 주음의 영향을 받아 흐름이 불안정합니다. 스크류 펌프 실린더가 너무 커서 이 두 펌프는 이미 도태되었다. 현재 가장 널리 사용되는 것은 플런저 왕복 펌프입니다.

플런저 왕복 펌프의 액통 크기는 0. 1ml 까지 작기 때문에 흐름상 세척과 교체가 용이하며 재순환 및 그라데이션 세탁에 특히 적합합니다. 모터 회전 속도를 변경하면 기둥 압력의 영향을 받지 않고 흐름을 쉽게 조정할 수 있습니다. 펌프 압력은 최대 400kg /CM2 까지 올라갈 수 있습니다. ADW 의 주요 단점은 출력 펄스가 커서 현재 이중 펌프 시스템으로 극복했다는 것이다.

연결 방식에 따라 이중 펌프는 병렬 펌프와 직렬 펌프로 나눌 수 있습니다. 일반적으로 병렬 펌프의 흐름 재현성은 좋지만 (RSD 는 약 0. 1%, 직렬 펌프는 0.2~0.3%) 실패 확률이 높고 (체크 밸브가 많기 때문) 가격도 비싸다. 둘째, 샘플러의 일반 HPLC 분석은 일반적으로 사용되는 6 통 샘플 밸브 (미국 RHEODYNE 의 7725 및 7725I 형 중 가장 일반적인 밸브) 를 분석하는데, 그 핵심 부품은 원형 씰 (회전자) 과 고정 베이스 (고정자) 로 구성되어 있습니다.

내압이 높고 (35~40MPA), 샘플이 정확하고 반복성이 좋아 (0.5%) 조작이 편리하다. 육통 밸브 샘플링 방법에는 부분 채우기 방법과 전체 채우기 방법의 두 가지가 있습니다.

(1) 부분 충전법으로 샘플링할 때 샘플 볼륨은 정량 링 볼륨의 50% (최대 75%) 를 초과하지 않아야 하며, 각 샘플의 볼륨은 정확하고 동일해야 합니다. 이 방법의 정확성과 반복성은 샘플러 샘플의 숙련도에 따라 다르며 샘플로 인한 최대 확장을 쉽게 생성할 수 있습니다.

(2) 완전 충전법으로 주입할 때, 샘플 부피는 정량링 부피의 5~ 10 배 9 배 이상 3 배 이상이어야 하며, 정량링의 내상과 흐름상을 완전히 대체하고, 관벽 효과를 없애고, 샘플의 정확성과 반복성을 보장해야 한다. 3. 주색스펙트럼은 분리 분석의 수단이고 분리는 핵심이기 때문에 분리를 담당하는 기둥은 색보시스템의 심장이다.

색보열에 대한 요구는 기둥 효율이 높고 선택성이 좋고 분석 속도가 빠르다는 것이다. 다공성 실리콘, 실리콘 기반 결합, 알루미나, 유기 중합체 마이크로구 (이온 교환 수지 포함), 다공성 탄소 등. 구매는 HPLC 에 사용되며, 일반적으로 3,5,7,654,38 00 μ m 과 같은 세분성을 가지고 있습니다. , 5 160000/m 의 기둥 효과 이론 값 .....

일반 분석에는 5,000 개의 트레이 기둥 효과 만 필요합니다. 동족체 분석의 경우 500 만 있으면 됩니다. 분리하기 어려운 물질의 경우 최대 20,000 개의 기둥을 사용할 수 있으므로 일반적으로 약 10 ~ 30cm 의 기둥 길이는 복잡한 혼합물 분석의 요구를 충족시킬 수 있습니다. 기둥 효과는 기둥 안팎의 요인에 의해 영향을 받습니다. 탑의 최적 효율을 달성하기 위해서는 탑외 사부피가 작다는 것 외에 합리적인 탑 구조 (충전층 외사부피를 최소화함) 와 충전기술이 없어야 한다.

최고의 충전재 기술을 채택해도 탑의 중심과 관벽을 따라 충전하는 경우도 항상 다르다. 관벽 부분에 접근하면 푸석푸석하고, 도랑이 생기기 쉬우며, 유속이 빠르며, 세척제에 영향을 미치는 매니 폴드가 넓어집니다. 이것이 바로 관벽 효과입니다. 이 파이프 벽 면적은 파이프 벽에서 안쪽으로 재료 지름 두께의 약 30 배입니다.

일반적인 액상색보 시스템에서 기둥 외부 효과가 기둥 효율성에 미치는 영향은 관벽 효과보다 훨씬 큽니다. 넷째, 검출기 HPLC 검출기는 범용 검출기와 전용 검출기의 두 가지 범주로 나뉩니다.

1. 범용 탐지기는 스펙트럼 기둥 유출액의 모든 특징 변화를 지속적으로 측정할 수 있으며 일반적으로 차등 측정 방법을 사용합니다. 이러한 탐지기에는 시차 접기 탐지기, 유전 상수 탐지기, 전도율 탐지기 등이 포함됩니다. 만능 탐지기는 응용범위가 넓지만, 흐름상에 대한 반응이 온도 변화, 흐름상, 구성 변화의 영향을 받기 쉬우므로 소음과 표류가 크고 감도가 낮아 그라데이션으로 씻을 수 없다. 2. 전용 탐지기는 분리된 샘플 그룹의 일부 특성의 변화를 측정하는 데 사용됩니다.

이 탐지기는 샘플에서 팀을 구성하는 물리적 또는 화학적 성질에 민감하며, 이 성질은 유동상에서는 가지고 있지 않거나 적어도 작동 조건에서는 나타나지 않는다. 이 탐지기에는 자외선 탐지기, 형광 탐지기, 방사성 탐지기 등이 포함됩니다.

고성능 액체 크로마토 그래피의 작동 원리는 무엇입니까?

고성능 액체 크로마토 그래피 작동 원리; 고압 펌프는 저장탱크의 유동상을 샘플러를 통해 색상 스펙트럼 기둥으로 보낸 다음 감지기의 출구에서 유출한다. 이 시점에서 전체 시스템은 이동상으로 가득 차 있다. 분리할 샘플이 샘플러에서 들어오면 샘플러를 통과하는 흐름상이 색상 스펙트럼 기둥으로 가져와 분리합니다. 분리 후, 서로 다른 그룹들이 차례로 검출기에 들어가고, 기록기는 검출기에 들어가는 신호를 기록하여 액상색보도를 얻는다.

고효율 액조색보란 고전 색보를 기초로 발전한 기색보 이론을 말한다. 기술적으로, 유동상은 고압 수송으로 바뀌고, 스펙트럼 기둥은 특수한 방식으로 작은 입자 크기의 충전재로 채워져 있어, 기둥 효과가 클래식 액상색 스펙트럼 (미터당 수만 또는 수십만 명에 달함) 보다 훨씬 높으며, 기둥 뒤에는 고감도 탐지기가 연결되어 유출액을 지속적으로 감지할 수 있다.

확장 데이터

고성능 액체 크로마토 그래피에는 고압 이원 펌프 또는 저압 쿼드 펌프가 장착되어 있으며, 펌프의 스트로크 용적과 믹서의 용적은 특히 그라데이션이 벗겨질 때 크로마토 그래피 기준 소음 수준에 영향을 미칩니다. 일반 펌프의 스트로크 부피가 작을수록 믹서의 부피가 커질수록 수액으로 인한 펄스가 작아지고 그라데이션 변화에 대한 반응력이 높을수록 기준선이 부드러워집니다.

이원펌프를 사용할 때, 이원 혼합에서 한 흐름상의 비율이 5% 미만인 경우, 특히 정상세탁을 사용하여 특정 약물 중간체와 최종 제품의 손성 분할을 수행할 때는 단일 펌프 사전 혼합법을 사용하는 것이 가장 좋다는 점에 유의해야 한다. 낮은 비율로 펌프의 펌핑 정확도가 상대적으로 낮기 때문에 색상 스펙트럼 기준선에서 스트로크 관련 피크가 발생하지 않도록 합니다.

참고 자료 써우거우 백과 사전-고성능 액체 크로마토 그래피

고성능 액체 크로마토 그래피의 기본 작동 원리

고성능 액체 크로마토 그래피의 기본 작동 원리

고효율 액조 색상 스펙트럼 시스템은 저장기, 펌프, 샘플러, 스펙트럼 기둥, 탐지기, 레코더 등으로 구성되어 있습니다. 저액기의 유동상은 고압 펌프에 의해 시스템으로 펌핑되고, 샘플 용액은 샘플러를 통해 흐름상으로 들어가고, 흐름상에서 스펙트럼 기둥 (고정상) 으로 로드됩니다. 샘플 용액 중 각 그룹마다 2 상 중 분배 계수가 다르기 때문에 2 상 중 상대적으로 이동할 때 반복적인 흡착-탈착 분배 과정을 거쳐 각 그룹들의 이동 속도가 크게 달라져 단일 그룹으로 분리되어 차례로 기둥에서 빠져나옵니다. 탐지기를 통과할 때 샘플 농도는 전기 신호로 변환되어 전송된다.

고성능 액체 크로마토 그래피의 원리는 무엇입니까?

원리: 저류기의 유동상은 고압 펌프에 의해 시스템으로 들어가고, 샘플 용액은 샘플러를 통해 흐름상으로 들어가고, 흐름상에서 스펙트럼 기둥 (고정상) 으로 로드됩니다. 샘플 용액 중 각 그룹마다 2 상 중 분포 계수가 다르기 때문에 2 상 중 상대적으로 이동할 때 반복적인 흡착-탈착 분배 과정을 거쳐 각 그룹들의 이동 속도가 크게 달라진다.

분리된 그룹들이 기둥에서 차례로 흘러나와 탐지기를 통과하면 샘플 농도가 전기 신호로 변환되어 레코더로 전송되므로 데이터를 지도로 인쇄하여 연구자들이 분석할 수 있습니다. 확장 데이터:

고효율 액조색 스펙트럼 (HPLC) 은 고압 액조색 스펙트럼, 고속 액조색 스펙트럼, 고해상도 액조색 스펙트럼 및 현대주색 스펙트럼이라고도 합니다.

① 고압: 유동상은 액체로 색보열을 통과할 때 큰 저항을 받는다. 스펙트럼 기둥을 빠르게 통과하려면 적재액에 고압을 가해야 한다. ② 빠른 속도: 분석 속도가 빠르고, 적재액 유속이 빠르며, 클래식 액상색보보다 훨씬 빠르다. 일반적으로 샘플을 분석하는 데 15~30 분이 걸리고, 어떤 샘플은 5 분 이내에 완성할 수 있으며, 보통 1 시간도 안 된다.

③ 고효율: 분리 효율. 고정상과 이동상을 선택해 최적의 분리 효과를 얻을 수 있으며, 공업 증류탑과 가스 스펙트럼보다 몇 배나 높다.

④ 고감도: 자외선 검출기는 0.0 1ng 에 도달 할 수 있으며 샘플 부피는 μ l 규모입니다 .. ⑤ 적용 범위가 넓습니다. 고성능 액체 크로마토 그래피는 70% 이상의 유기 화합물, 특히 비등점, 거대 분자, 극성, 열 안정성이 떨어지는 화합물의 분리 분석을 분석 할 수 있습니다.

⑥ 크로마토 그래프 컬럼은 재사용 가능합니다: 하나의 크로마토 그래프 컬럼은 다른 화합물을 분리 할 수 ​​있습니다. ⑥ 샘플은 부피가 작고 재활용하기 쉽다. 견본은 스펙트럼 기둥을 통과한 후 파괴되지 않고 단일 팀을 수집하거나 준비할 수 있다. 또한 고효율 액상색보에는 스펙트럼 기둥을 재사용할 수 있고, 샘플이 손상되지 않고, 쉽게 재활용할 수 있는 등 여러 가지 장점이 있지만 단점도 있다. 기상색보법에 비해 고효율 액조색보법은 각기 장점이 있어 서로 보완한다.

고성능 액체 크로마토 그래피의 단점은 "외부 효과" 입니다. 모든 죽은 공간 (주사기, 기둥 커넥터, 연결관, 테스트 풀 등) 에 있습니다. ) 주입에서 검출기까지 이동상의 흐름형이 변경되면 분리된 물질의 확산과 체류로 인해 스펙트럼 피크가 넓어지고 기둥 효과가 크게 떨어질 수 있습니다. (데이비드 아셀, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 스포츠명언)

HPLC 검출기의 감도는 기색 스펙트럼 검출기보다 못하다. HPLC 에 사용되는 색상 스펙트럼 기둥은 매우 가늘며 (1~6 mm), 사용되는 고정상의 입자 크기도 매우 작기 때문에 (몇 미크론에서 수십 미크론까지), 기둥 안에서 흐르는 흐름의 흐름이 크게 방해를 받는다. 상압에서, 유동상의 유속은 매우 느리고, 기둥 효능은 낮고 시간이 많이 걸린다.

빠르고 효과적인 분리를 위해서는 기둥에서의 흐름을 가속화하기 위해 흐름에 많은 압력을 가해야 합니다. 따라서 고압 주입은 반드시 고압 펌프를 사용해야 한다.

고압 및 고속은 고성능 액체 크로마토 그래피의 특성 중 하나입니다. HPLC 에서 사용하는 고압 펌프는 다음과 같은 조건을 충족해야 합니다. A. 흐름이 일정하고, 맥박이 없고, 조정 범위가 넓습니다 (일반적으로1~10ML/MIN). B. 용제 부식에 저항할 수 있다. C. 높은 주입 압력; 일반 분리, 60 * 10 5pa 의 압력으로 충분하다. 효율적인 분리는 150 ~ 300 * 10 5pa 에 도달해야 한다.

(1) 왕복동 피스톤 펌프 플런저가 실린더 안으로 밀어 넣으면 펌프 헤드 출구 (위쪽) 의 단방향 밸브가 열리고 유동상이 들어가는 단방향 밸브 (아래쪽) 가 닫히므로 소량의 유체가 출력됩니다. 반대로 플런저를 바깥쪽으로 당기면 이동상 입구의 단방향 밸브가 열리고 출구의 단방향 밸브가 닫히고 일정 양의 유동상이 해당 용기에 의해 원통으로 흡입됩니다.

이 펌프는 전체 색상 스펙트럼 시스템의 나머지 부분에 대한 저항의 작은 변화에 영향을 받지 않고 일정한 볼륨의 유동상을 지속적으로 제공하는 것이 특징이다. ⑵ 공압식 증폭 펌프는 압력이 p 1 인 저압 가스가 넓은 영역 (SA) 피스톤 A 를 추진한 다음 작은 영역 (SB) 피스톤 B 출력 압력이 p2 의 액체로 증가하는 방식으로 작동합니다.

압력 증가의 배수는 두 피스톤 a 와 b 의 면적 비율에 따라 달라집니다. a 와 b 의 면적 비율이 50: 1 인 경우 압력이 5 * Pa 인 가스는 압력이 250*Pa 인 출력 액체를 얻을 수 있습니다. 이것은 정압 펌프입니다.

참고 자료:

바이두 백과-고성능 액체 크로마토 그래피.

HPLC 기기의 작동 원리는 무엇입니까?

고효율 액조 스펙트럼은 고전 스펙트럼을 기초로 기색 스펙트럼을 도입하는 이론이다. 기술적으로 유동상이 고압 수송으로 바뀌었다. (최대 수송 압력은 4.9 에 달할 수 있는가? 107pa); 스펙트럼 기둥은 고전적인 액체 크로마토 그래피 (미터 탑당 수만 또는 수십만에 달할 수 있음) 보다 훨씬 높은 기둥 효과를 내기 위해 작은 입자 크기 충전재를 특수한 방식으로 채웁니다. 동시에 기둥 뒤에 고감도의 탐지기를 연결하면 유출액을 지속적으로 감지할 수 있다.

특징 1. 고압: 액체 스펙트럼은 액체를 유동상 (적재액이라고 함) 으로 하고, 액체는 스펙트럼 기둥을 통과하여 저항이 크다. 스펙트럼 기둥을 빠르게 통과하려면 적재액에 고압을 가해야 한다. 보통 150~350* 105Pa 에 도달할 수 있습니다.

2. 고속: 기둥 내 유동상 유속은 클래식 스펙트럼보다 훨씬 빠르며, 보통 1~ 10ml/min 까지 가능합니다. 고성능 액체 크로마토 그래피는 클래식 액체 크로마토 그래피보다 훨씬 적은 분석 시간을 필요로 하며, 일반적으로 1h 보다 작습니다.

3. 효율성: 최근 새로운 고정상이 많이 개발되어 분리 효율성이 크게 향상되었습니다. 4. 고감도: 고감도 검출기는 이미 고효율 액상색보에 광범위하게 적용되어 분석의 감도를 더욱 높였다.

예를 들어 형광 검출기의 감도는 10- 1 1g 에 이를 수 있습니다. 또한, 샘플의 양이 적고, 보통 몇 마이크로리터이다.

5. 적용 범위가 넓다: 기색스펙트럼과 고효율 액조색보비교: 기색스펙트럼은 분리능력이 좋고, 감도가 높고, 분석이 빠르고, 조작이 편리하다는 장점이 있지만, 기술조건 제한으로 인해 끓는점이 너무 높거나 열 안정성이 떨어지는 물질을 기색보로 분석하기가 어렵다. 고효율 액조색 스펙트럼은 견본이 기화 없이 용액을 만들 수 있도록 요구하기 때문에 샘플 휘발성의 제한을 받지 않는다.

원칙적으로 고효율 액조색보법으로 끓는 점이 높고, 열 안정성이 떨어지며, 상대 분자량이 큰 유기물 (400 이상) 을 분리할 수 있다 (이들 물질은 유기물 총량의 거의 75 ~ 80%). 알려진 화합물 중 약 20% 는 기색 스펙트럼으로 분석할 수 있고 70~80% 는 액상색보로 분석할 수 있는 것으로 집계됐다.

고정상의 성질에 따라 고효율 액상색보로는 고효율 젤색 스펙트럼, 소수성 고효율 액조색 스펙트럼, 역상 고효율 액조색 스펙트럼, 고효율 이온 교환 액조색 스펙트럼, 고효율 친화액색보, 고효율 초점액조색 스펙트럼으로 나눌 수 있다. 서로 다른 유형의 고효율 액조색 스펙트럼은 각종 화합물을 분리하거나 분석하는 원리가 해당 일반 액조색 스펙트럼과 거의 비슷하다.

차이점은 HPLC 가 민감하고 빠르며 해상도가 높고 반복성이 뛰어나며 색상 스펙트럼에서 수행되어야 한다는 것입니다. 고효율 액조색 스펙트럼의 주요 유형과 분리 원리는 분리 메커니즘에 따라 고효율 액조색 스펙트럼은 다음과 같은 주요 유형으로 나눌 수 있다: 1. 액체-액체 분배 크로마토 그래피 및 화학 결합 크로마토 그래피. 유동상과 고정상은 모두 액체이다.

유동상과 고정은 서로 용해되지 않고 (극성이 다르기 때문에 고정액의 손실을 방지함) 뚜렷한 인터페이스가 있다. 견본이 색보열에 들어갈 때 용질은 2 상 사이에 분포되어 있다.

균형에 도달하면 다음 공식을 따릅니다. 공식에서 CS 는 고정상에서의 용질 농도입니다. Cm--유동상에서의 용질 농도; Vs- 고정상의 부피; VM- 흐름 단계의 볼륨. LLPC 는 GPC 와 유사합니다. 즉, 분리 급수는 K, K 가 클수록 그룹 예약 값이 커집니다. 그러나 다른 점도 있다. 일반화 예측 제어에서 트래픽은 k 에 거의 영향을 주지 않지만 LLPC 트래픽은 k 에 큰 영향을 줍니다 .....

A. 정상 액체 크로마토 그래피: 이동상의 극성은 고정상보다 작다. B. 역상 액체 크로마토 그래피: 이동상 극성은 고정상 극성보다 큽니다.

C. 액체-액체 분배 크로마토 그래피의 단점: 유동상과 고정상의 극성 요건은 완전히 다르지만 고정상에는 여전히 소량의 용해가 있다. 유동상이 색보기둥을 통과할 때의 기계적 충격은 고정액의 손실을 초래할 수 있다. 1970 년대 말에 개발된 화학결합 고정상 (아래 참조) 은 이러한 단점을 극복할 수 있다.

현재 널리 사용되고 있습니다 (70~80%). 2. 액체고색 스펙트럼의 유동상은 액체이고 고정상은 흡착제 (예: 실리콘, 산화 알루미늄 등) 이다. ).

이 분리는 물질 흡착에 따라 진행된다. 그 메커니즘은 샘플이 크로마토 그래프 컬럼에 들어갈 때 용질 분자 (X) 와 용제 분자 (S) 가 흡착제 표면의 활성 센터 (주입되지 않을 때 흡착제의 모든 활성 센터가 S) 를 흡착하는 것으로, 다음과 같이 나타낼 수 있다. XM+NSA = = = = = XA+NSM: Sa-고정상의 용매 분자; Xa-고정상의 용질 분자; Sm-유동상의 용매 분자.

경쟁 흡착 반응이 평형에 이르면 K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa] 여기서 k 는 흡착 평형 상수입니다. [토론: k 가 클수록 보존 값이 커집니다.

3. 이온 교환 크로마토 그래피) IEC 는 이온 교환제를 고정상으로 사용한다. IEC 는 이온 교환 수지상의 이온화 가능한 이온과 유동상에서 같은 전하를 띤 용질 이온 사이의 역교환을 기반으로 하며, 이들은 교환제와의 친화력에 따라 분리된다.

음이온교환제를 예로 들면, 교환과정은 X- (용제에서)+(수지 -r4n+cl-) = (수지 -R4N+ X-)+Cl- (용제에서) 교환이 균형을 이룰 때 [Cl-] [토론: DX 와 유지값의 관계] 용제에서 이온화할 수 있는 물질은 보통 이온 교환 스펙트럼으로 분리할 수 있다. 4. 이온색보이온색스펙트럼은 유동상이나 고정상에 용질분자전하와 반대되는 이온 (대항이온이나 반이온이라고 함) 을 넣어 용질이온과 결합하여 소수이온화합물을 형성하여 용질이온의 보존 행동을 통제한다.

그 원리는 X+ 수성 +Y- 수성 = = X+Y- 유기상: X+ 수성-유동상에서 분리할 유기이온 (또는 양이온) 으로 표현될 수 있다. Y- 수상상-유동상에서 반대 전하를 띠는 이온 쌍 (예: 테트라 부틸 수산화 암모늄, 세틸 트리메틸 수산화 암모늄 등). ); X+y 타입.

액체 크로마토 그래프의 사용 및 작동 원리

작동 원리: 유동상은 주입 펌프를 통해 주입 밸브를 통과하여 샘플 용액과 혼합되어 색상 스펙트럼 기둥을 거쳐 색상 스펙트럼 기둥에서 흡착되어 분리된다. 마지막으로 각 그룹은 탐지기를 통해 전기 신호로 변환되고 해당 샘플 피크가 색상 스펙트럼 워크스테이션에 나타납니다.

액조 색상 스펙트럼 사용: 먼저 샘플을 사전 처리한 다음 샘플, 샘플, 샘플, 흡입구 청소, 각 분석 후 채널 청소, 마지막으로 기기 닫기. 확장 데이터:

액체 크로마토 그래피에서 사용되는 보존값, 트레이 수, 트레이 높이, 분리도 및 선택성과 같은 기본 개념은 가스 크로마토 그래피에서 사용되는 기본 개념과 일치합니다.

액체 크로마토 그래피에서 사용되는 기본 이론: 트레이 이론과 속도 방정식은 기본적으로 가스 크로마토 그래피와 동일하지만 가스 크로마토 그래피는 액체를 유동상으로 사용하기 때문에 액체와 가스의 성질이 다릅니다. 또한, 액체 크로마토 그래피는 가스 크로마토 그래피와 다른 기기, 장비 및 작동 조건을 사용하므로 액체 크로마토 그래피와 가스 크로마토 그래피는 일정한 차이가 있습니다.

주로 다음과 같은 측면이 있다: ① 다른 운영 조건과 적용 범위. 가스 크로마토 그래피의 경우 가열 작업입니다. 그것은 작동 온도에서 기화될 수 있고 분해되지 않는 물질만 분석할 수 있으며, 고비점 화합물, 비휘발성 물질, 열 불안정 화합물, 이온 화합물, 중합체를 분리하여 분석하는 것은 어느 정도 그것의 응용을 제한한다. 통계에 따르면, 유기물의 약 20% 만이 가스 크로마토 그래피로 분석 될 수 있습니다.

액상색보는 실온에서 작동하며 샘플의 휘발성과 열 안정성에 구애받지 않는다. 상대적으로 분자질량이 큰 물질, 이온화합물, 중합체 등 기화, 휘발, 열에 민감한 물질을 분리 분석하는 데 적합하며 유기물의 약 70 ~ 80% 를 차지한다. (2) 액체 크로마토 그래피는 어려운 분리 작업을 완료 할 수 있습니다. A. 기색 스펙트럼의 유동상재가스는 색보타성으로, 기본적으로 분배 균형 과정에 참여하지 않고, 샘플 분자와 친화력이 없고, 샘플 분자는 주로 고정과 상호 작용한다.

액체 크로마토 그래피에서 유동상 액체도 고정상 경쟁 샘플 분자와 경쟁하여 선택성을 높이는 요인을 증가시켰다. 두 개 이상의 다른 비율의 액체를 흐름상으로 선택하여 분리의 선택성을 높일 수도 있습니다.

B. 액상색보에는 이온교환색보, 저항색보 등 고정상의 종류가 많기 때문에 분석 선택도 많다. 기색 스펙트럼은 불가능하다. C. 액상색보는 보통 실온에서 작동하는데, 온도가 낮으면 일반적으로 색상 스펙트럼 분리 조건 선택에 도움이 된다.

③ 액체의 확산 계수가 기체보다 105 배 작기 때문에 용질이 액상에서 전도율이 느리기 때문에 기둥외 효과가 특히 중요하다. 기색 스펙트럼에서 기둥 외부 면적에 의한 팽창은 무시할 수 있다. ④ 액상색보 중 샘플제비는 간단하고 샘플회수는 비교적 쉽고, 회수량은 양량으로 대량 준비에 적합하다. 그러나 액체 크로마토 그래피에는 여전히 복잡하고 비싼 범용 검출기가 부족합니다.

실제 응용에서 이 두 기술은 서로 보완한다. 요약하면, 액체 크로마토 그래피는 높은 기둥 효율, 높은 선택성, 높은 감도, 빠른 분석 속도, 우수한 반복성, 광범위한 적용 범위의 장점을 가지고 있습니다. 이런 방법은 이미 현대 분석 기술의 주요 수단 중 하나가 되었다.

현재 화학, 화공, 의학, 생화학, 환경 보호, 농업 등 과학 분야에 광범위하게 사용되고 있다. 고효율 액조색 스펙트럼의 응용은 매우 광범위하여 정량 및 정성 분석의 거의 모든 분야를 포괄한다.

(1) HPLC 는 샘플만 용액으로 만들 수 있도록 요구하며 샘플 휘발성의 제한을 받지 않습니다. 유동상은 선택 범위가 넓고 고정상 종류가 다양하여 열 불안정성과 휘발성, 해리와 미분리, 각종 분자량 범위의 물질을 분리할 수 있다. 샘플 사전 처리 기술과 함께 고효율 액조 스펙트럼은 고해상도와 고감도를 얻을 수 있으며, 성질이 매우 유사한 물질을 동시에 분리하고 측정할 수 있어 복잡한 혼합물의 미량 성분을 분리할 수 있다.

고정상이 발전함에 따라 생화학 물질의 분리는 그 활성화를 충분히 유지하는 조건 하에서 완성할 수 있다. (2) 생화학 분석 HPLC 는 고해상도, 고감도, 고속, 스펙트럼 기둥 재사용, 유출액 그룹 수집 등의 장점을 갖추고 있어 생화학, 식품 분석, 의학 연구, 환경 분석, 무기 분석 등 다양한 분야에 광범위하게 적용돼 생화학 분석 문제를 해결할 수 있는 가장 유망한 방법이 됐다.

(3) 기기 조합 고효율 액조색 스펙트럼과 구조기기의 조합은 중요한 발전 방향이다. 고효율 액조색 스펙트럼-스펙트럼 (HPLC-MS) 기술은 카바 메이트 농약과 멀티코어 방향성 분석과 같은 높은 평가를 받았다. HPLC-IR 스펙트럼 기술도 빠르게 발전하고 있다. 예를 들어 환경오염 분석에서 수중 탄화수소를 측정하는 등 환경오염 분석에 대한 새로운 발전 참조가 있다.

바이두 백과-액상색보.

액체 크로마토 그래프의 원리는 무엇입니까? 이것은 무엇을 위한 것입니까?

액상색보계 원리: 저장기의 유동상은 고압 펌프에 의해 시스템으로 들어가고, 샘플 용액은 샘플러를 통해 흐름상으로 들어가고, 흐름상에서 스펙트럼 기둥 (고정상) 으로 로드됩니다. 샘플 용액 중 각 그룹마다 2 상 중 분배 계수가 다르기 때문에 2 상 중 상대적으로 이동할 때 반복적인 흡착-탈착 분배 과정을 거쳐 각 그룹들의 이동 속도가 크게 달라져 단일 그룹으로 분리되어 차례로 기둥에서 빠져나옵니다. 탐지기를 통과할 때,

주로 스펙트럼 기둥을 통해 고비점 난기상 화합물의 혼합물을 분리하는 데 쓰인다. 생화학, 생의학, 환경화학, 석유화학 등에 쓰인다.

확장 데이터 액체 크로마토 그래프는 고정상이 액체인지 고체인지에 따라 액체-액체 크로마토 그래피 (LLC) 와 액체-고체 크로마토 그래피 (LSC) 로 나눌 수 있습니다. 현대 액체 크로마토 그래프는 고압 주입 펌프, 주입 시스템, 온도 제어 시스템, 컬럼, 검출기, 신호 기록 시스템 등으로 구성됩니다.

클래식 액상 기둥 색상 스펙트럼 장치에 비해 효율적이고 빠르며 예민한 특징을 가지고 있습니다. 고성능 액체 크로마토 그래피는 주로 주입 시스템, 주입 시스템, 분리 시스템, 검출 시스템 및 데이터 처리 시스템을 포함합니다.

사출 시스템은 일반적으로 다이어프램 주사기 또는 고압 주사실을 사용하여 사출 작업을 완료하며, 주사량은 일정합니다. 이것은 분석 샘플의 반복성을 높이는 데 도움이 된다.

주입 시스템 이 시스템은 고압 펌프, 유동상 저장 탱크 및 그라데이션 기기의 세 부분으로 구성됩니다. 고압 펌프의 일반적인 압력은 l.47~4.4X 10Pa 이며, 유량 조절이 가능하고 안정적입니다. 고압 유동상이 색보열을 통과할 때, 기둥 안의 샘플 확산 효과를 낮추고, 이동 속도를 높이고, 해상도를 높이고, 샘플을 회수하고, 샘플의 생물학적 활성을 유지하는 데 도움이 된다.

분리 시스템 이 시스템에는 스펙트럼 기둥, 연결관 및 온도 조절기가 포함됩니다. 일반 색상 스펙트럼 기둥 길이는 10~50cm (두 기둥을 함께 사용할 때 두 기둥 사이에 파이프를 연결할 수 있음) 이고, 내경은 2~5mm 이며, 재질은 양질의 스테인리스강, 두꺼운 벽유리관 또는 티타늄 합금으로, 거주지에는 고정상이 장착되어 있으며, 지름이 5 ~/Kloc-0 입니다