2. 대부분의 세포주에서 세포는 노화와 진화에 따라 변화하여 표현형과 유전자형의' 배양 표변' 을 일으킨다. 냉동 보관 과정에서 적절한 조작과 적절한 냉동 보관 조건은 세포 특성의 변화나 손실을 줄여 세포 보존의 역할을 한다. 따라서, 정확하고 성공적인 냉동 보존은 세포의 장기 응용에 매우 중요한 역할을 한다.
1. 온도가-70 C 로 낮으면 세포 내 효소 활성과 대사 활동이 모두 중단되어 장기 보존의 목적을 달성한다.
2. 온도가 낮아지면 세포 안팎의 수분이 결정화되어 형성된 얼음 결정은 세포막과 세포기를 파괴하여 세포 사망을 일으킬 수 있다. 특히 0~-20℃ 단계에서는 얼음 결정이 바늘로 되어 세포 손상을 일으킨다. 세포는 보호제 없이 직접 냉동한다. 세포 내 수분과 외부 환경은 얼음 결정을 형성하여 기계적 손상, 전해질 증가, 삼투압 변화, 탈수, pH 값 변화, 단백질 변성 등을 초래하고 세포 사망을 초래할 수 있다.
일반적으로 사용되는 부동액은 글리세롤 또는 디메틸 술폭 시드 (DMSO) 입니다. DMSO 는 신속하게 세포막을 뚫고 세포로 들어가 빙점을 낮추고 동결 과정을 늦추며 세포막의 투과성을 높이고 세포 내 이온 농도를 높이고 세포 내 얼음 결정의 형성을 줄여 세포를 보호하는 목적을 달성할 수 있다.
1.DMSO 는 일반적으로 세포 냉동 보존에서 보호제로 사용됩니다. 세포 냉동 보존에서 DMSO 의 최종 농도는 일반적으로 5- 15% 이며, 특정 세포 냉동 보존액에서 DMSO 의 농도는 ATCC 에서 찾을 수 있다.
2. 특히 민감한 세포의 경우 냉동 보관 과정에서 적용 가능한 냉동 보존액을 테스트해야 한다. 예를 들어, 뉴런이 냉동될 때는 무혈청 냉동 보존액을 선택하여 소생 후 분화를 피해야 한다.
-응? 유한 세포주의 형태 및 대사 활성 유지
-응? 진귀한 세포 보존
-응? 세포주 표준품의 제비.
-응? 제대혈 줄기 세포와 NK 세포의 냉동 보존
1. 냉동 보존에 사용되는 세포는 일반적으로 로그 성장기에 선택하는데, 이때 수렴도는 약 90% 이다. 이때 세포는 잘 자라고, 세포 수가 많으며, 세포를 수확하기 24 시간 전에 배양기를 바꾼다.
2. 배양물에서 미생물 오염물, 특히 지균을 검출하여 세포가 어떠한 오염도 받지 않도록 한다. 세포가 채집하는 과정에서, 실험 조작은 가능한 온화하여 세포 손상을 방지해야 한다.
1. 세포 냉동률의 최적 조절은 세포가 과도한 탈수로 손상되지 않고 탈수할 수 있는 충분한 시간을 갖도록 하는 것이다. 대부분의 세포에는 분당 65438 0 ~ 3 C 씩 떨어지는 것이 적당하다.
2. 그라데이션 냉각 방법: 4℃-30 min, 20℃- 2h, -80℃ 냉장고에서 밤을 보내고, 다음날에는 냉동관을 액체 질소 탱크로 옮겨서 중장기적으로 보존한다.
3. 세포 프로그램 냉각함: 준비한 세포 냉동관을 냉동함에 넣고-80 C 에서 밤을 지낸 후 액체 질소 탱크로 직접 옮긴다.
4.? 스토리지 위치 전송 과정에서 신속하게 완료해야 합니다. 이동 중 온도 변화가 세포 활력에 미치는 영향을 피하기 위해 이동 중 냉동 보관관을 드라이아이스에 넣어 항온에 보관하는 것이 좋습니다.
1. 세포도-80 C 의 냉장고에 몇 달 동안 보관할 수 있다.
세포의 장기 보존 온도는-130 C 이하입니다.
3. 액질소 탱크 내 기체층의 온도는-140 C 에서-180 C 사이이며, 세포는 기체층에 보관하거나 액체 질소에 담그는 것이 좋다. 가능하다면 기체층에 보관하는 것이 좋다. 세포가 제거되는 것을 막을 수 있기 때문이다
하이사이트? 냉동보존액은 즉석형, 무혈청, 프로그램 냉각이 필요 없는' 장기' 세포 냉동보존액이다. 본 제품은 15 년 이상, 원자재 일본 수입, 냉동 보존 품질이 일본 제품과 일치한다.
-응? 안전: 혈청 없음, 외래 동물 성분 없음.
-응? 광범위한 스펙트럼: 다양한 세포 유형에 적합합니다.
-응? 고효율: 회복 후 세포는 높은 활성성을 유지하고 빠르게 증식합니까? 능력은 세포 기능에 영향을 주지 않는다.
-응? 편리함: 즉시 사용할 수 있으며, 추가 준비도 없고, 냉각 상자와 희석도 필요 없습니다.
세포막 보호제는 세포막 밖에서 순식간에 보호막을 형성하여 세포외 빙정으로부터 세포를 보호할 수 있다.
침투 보호제-세포 내부에 빠르게 침투하여 세포 내부에 대량의 얼음 결정이 생기는 것을 방지하고, 동시에 세포기를 보호하고 저온에서 세포기에 대한 손상을 줄일 수 있다.
세포 침강 안정제는 세포의 침강 속도의 균형을 맞춰 냉동 보존 과정에서 세포가 모이는 것을 막는다.