2 주석 Taq DNA 중합 효소는 열진균 yT 1 에서 분리되었다. YT 는 70 ~ 75 C 에서 성장할 수 있는 열진균이다. 그것은 1969 년 미국 옐로스톤 국립공원의 화산온천에서 분리되었다. 이 효소 유전자의 전체 길이는 2496 개의 염기로 832 개의 아미노산을 코드화하고 효소 단백질 분자는 94KDa 이다. 그 비율은 20 만 단위/밀리그램이다. 75 ~ 80 C 에서는 각 효소 분자가 초당 약 150 개의 뉴클레오티드를 확장할 수 있고, 70 C 에서는 초당 60 개 이상의 뉴클레오티드를 확장할 수 있다. 55 C 에서는 24 개의 뉴클레오티드/초입니다. 온도가 너무 높거나 (90 C 이상) 너무 낮으면 (22 C) Taq DNA 중합 효소의 활성화에 영향을 줄 수 있다. 90 C 이상 DNA 합성은 거의 없지만, 이 효소는 확실히 열 안정성이 뛰어나 PCR 주기의 고온에서도 높은 활성성을 유지할 수 있다. 92.5 C, 95 C 및 97.5 C 에서 PCR 혼합물의 Taq DNA 중합 효소는 각각 65438±0.30min, 40min 및 5 ~ 6 min 후에도 50% 의 활성을 유지합니다. 실험에 따르면 PCR 반응의 변성 온도는 95 C ~ 20 초, 50 회 순환한 후에도 Taq DNA 중합 효소는 여전히 65% 의 활성성을 가지고 있는 것으로 나타났다. Taq DNA 중합 효소의 열 안정성은 PCR 반응에 적용하기 위한 전제 조건이다. PCR 의 급속한 발전과 널리 사용되는 이유이기도 합니다. Taq DNA 중합 효소도 역전사 활성을 가지고 있는데, 이는 역전사 효소와 비슷하다. 이 활성의 온도는 일반적으로 65 ~ 68 C 이며, Mn2 가 존재하면 역전 활성이 높다.
TaqDNA 중합 효소는 Mg2 에 의존하는 효소로, 그 촉매 활성은 Mg2 의 농도에 매우 민감하다. DNTP 의 농도가 0.7 ~ 0.8 mmol/L 일 때 다른 농도의 Mg2 로 PCR 반응 10min 을 진행한 결과, Mgcl2 의 농도가 2.0 mmol/L 일 때 효소의 촉매 활성이 가장 높고 이 농도가 가장 높은 것으로 나타났다. Mgcl2 의 농도가 10mmol/L 인 경우 Mg2 는 dNTP 와 결합할 수 있으며 PCR 반응액에서 유리 Mg2 의 농도에 영향을 주므로 다른 반응체계에서는 Mgcl2 의 농도를 적절히 조정해야 합니다. 농도를 최적화하다. 일반적으로 Mg2 의 농도는 dNTP 의 총 농도보다 0.5 ~ 1.0 mmol/L 이상 높아야 합니다. 적절한 농도의 KCL 은 Taq DNA 중합 효소의 촉매 활성을 50 ~ 60%, 최적 농도는 50MMMOL/L 이며, KCL 농도가 75mmol/L 보다 높을 경우 Taq DNA 중합 효소의 활성이 현저히 억제된다.