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피타 아제 코딩 유전자의 클로닝
현재 Trichoderma phytase 유전자에 대한 연구는 거의 없다. 지금까지 GenBank 에는 AJ543399(2003) 와 특허 US 75 1083 1 (2009) 만 발표되었습니다. 나등 (20 1 1) 은 GenBank 가 발표한 피타 아제 A 인코딩 서열을 이용하여 설계한 유인물로 PCR 을 통해 T2 Pleurotus-1 의 게놈 DNA 를 증폭시켜 약/길이를 얻었다. 시퀀싱 결과에 따르면 DNA 단편에는 피타 아제 코딩 유전자의 전체 서열과 3 개의 인트론 서열이 포함되어 있으며, 그 중 피타 아제 유전자는 1443 BP 이고, 480 개의 아미노산을 코딩하고, 5' 끝에는 23 개의 아미노산을 코딩하는 신호 펩타이드 서열이 있으며, 나머지 457 개의 아미노산 잔기는 성숙한 피타 아제의 아미노산 서열이다. 이 유전자가 코딩한 아미노산 서열의 3 급 구조를 예측해 인산단에스테라아제라는 것을 발견했다.

Juck Zhang 등 (20 12) 은 피틴산 칼슘을 함유한 진지 배양기에서 148 곰팡이주가 피틴산 효소를 생산할 수 있는 능력을 검증했고, 모든 피틴균 그루는 피틴산 효소 활성을 가지고 있으며, 피틴산 효소 코딩 유전자가 곰팡이 집단에서 광범위하게 존재한다는 것을 증명했다. 2 14 종의 곰팡이에서 2 1 그루를 선별하여 피타 아제 보존 서열에 따라 간략화 및 프라이머 P8205 를 설계했다. P500-2 를 사용하여 17 균주의 곰팡이 1 1 균주의 피타 아제 유전자 조각을 증폭시키고 서열을 측정 하였다. 시퀀싱 결과는 크기가 약 1 100 BP 인 것으로 나타났으며,

Trichoderma phytase 유전자는 다양성의 특성을 보여줍니다. Trichoderma 종간 phytase 유전자 유사성은 높지만 Trichoderma 종간 차이는 뚜렷하며 시스템 발달 관계는 기본적으로 유전자 서열 상태와 일치합니다. 얻어진 피타 아제 유전자 서열 및 Trichoderma phytase 유전자의 특허 서열 (특허 US 75 1083 1) 을 비교 한 결과, 두 가지 상 동성이 매우 낮고 히스티닌 피타 아제 활성 부위가 발견되지 않았다. 따라서, 다른 종류의 리씨 곰팡이가 생산하는 피타 아제가 모두 같은 피타 아제에 속하지 않을 수 있으며, 이 실험은 14 개의 곰팡이만 얻을 수 있을 것으로 추정된다. 한편, 곰팡이 피타 아제 유전자 다양성 분석이 시스템 발육 표시로서의 잠재력 (Juck Zhang 등, 20 12) (그림 10. 13) 을 감안할 때.

표 10. 13 곰팡이 균주 피타 아제 유전자 증폭