답: SMARTTM cDNA 합성기술은 총 RNA 또는 Poly A+ RNA 를 템플릿으로, 손질된 oligo(dT) 과뉴클레오티드를 유인물로, MMLV 역전사효소의 촉매로 첫 번째 체인을 합성한다. 역전사 효소가 mRNA 의 5' 끝에 도달하면 역전사 효소의 말단 전이효소 활성은 1 차 체인 cDNA 의 3' 끝에 3 ~ 5 개의 디옥시구아노신산을 첨가한다. 지능과뉴클레오티드의 3' 끝에는 확장된 새아노신산 잔기가 함유되어 있어, 풍부한 아노신산과 퇴화하여 확장된 템플릿을 형성한다. 그런 다음 역전사 효소를 사용하여 템플릿을 변환하여 스마트 올리고 뉴클레오티드를 템플릿으로 계속 확장합니다. 이런 방식으로 합성된 단일 체인 cDNA 는 3' 끝에는 SMART 과뉴클레오티드와 상호 보완적인 서열을 가지고 있고, 5' 끝에는 oligo(dT) 프라이머와 보완되는 서열을 가지고 있다. 이러한 시퀀스는 다음 단계 거리 PCR 의 프라이머 합성 점으로 사용됩니다. 결과는 전장 서열이 풍부한 이중 가닥 cDNA 를 얻었다.

Q: smart suite 제품군의 제품 차이점은 무엇입니까?

A: 지능형 cdna 라이브러리 구축 테스트 키트 소량의 RNA 샘플에서 고품질의 cDNA 라이브러리를 구축하는 데 사용됩니다. 이 소프트웨어에는 지능형 cDNA 합성 및 라이브러리 구축이 포함됩니다. TriplEx2 또는 생성자 기증자 캐리어 pDNR-LIB. 테스트 키트 은 문고 를 위해 특별히 설계된 것 으로, Clontech 와 비슷하기 때문 인가? PCR- 선택? CDNA subtractive 하이브리드 화 테스트 키트 함께 사용할 수 없습니다.

스마트 PCR cDNA 합성 테스트 키트 Clontech 와 함께 사용할 수 있나요? PCR- 선택? CDNA 감소 기술을 함께 사용합니다. 총 RNA 는 빼기 실험에 직접 사용할 수는 없지만 SMART PCR cDNA 합성 테스트 키트 (Smart PCR cDNA 합성) 을 사용하여 고품질의 CDNA 를 증폭시켜 하이브리드 실험에 사용할 수 있습니다. 마찬가지로 소량의 폴리 A+RNA 도 스마트 PCR CDNA 합성 테스트 키트 (SMART PCR cDNA 합성) 를 통해 증폭할 수 있다. 제한된 RNA 샘플만 가지고 있을 때, 지능형 cDNA 는 가상 Northern 교배 대신 표준 Northern 교배를 대체하는 데도 사용될 수 있다. (윌리엄 셰익스피어, Northern, Northern, Northern, Northern) SMART PCR cDNA 합성 테스트 키트 포함 SMART II 올리고 뉴클레오티드 및 cDNA 합성 프라이머, 두 서열 모두 Clontech? PCR-Select 에서 원하는 Rsaⅰⅰ 비트를 뺍니다. 이 테스트 키트 또한 다른 선택 캐리어에 SMART cDNA 라이브러리를 구축하는 데 사용할 수 있습니다.

SMART RACE cDNA 증폭 테스트 키트 SMART cDNA 합성 기술과 RACE 방법을 결합합니다. 이 테스트 키트 장점은 전체 길이의 cDNA 를 만들 수 있고, 커넥터 연결이 필요 없고, 민감성이 강하며, 방법이 간단하다는 것이다.

Q: 지능형 기술을 cDNA 끝의 빠른 증폭 (RACE) 에 사용할 수 있습니까?

답: 네. 새로운 SMART RACE cDNA 증폭 테스트 키트 개선으로 SMART 기술의 모든 장점을 RACE 시나리오에 사용할 수 있게 되었습니다.

Q: 지능형 cDNA 합성 중 PCR 주기 수에 제한이 있는 이유는 무엇입니까?

A: 지능형 cDNA 기술의 독특한 점은 장거리 PCR 증폭 단계입니다. 스마트 CDNA 의 유전자 표현을 유지하기 위해서는 가능한 적은 순환이 필요하다. 순환수가 너무 높고 증폭이 지수 성장 단계를 초과하면 ssDNA 축적이 발생하여 복제 또는 감축과 같은 cDNA 사후 작업에 적합하지 않습니다. 또한 주기 수가 높을수록 내열 중합 효소의 오류 확률이 높을수록 PCR 의 충실도가 낮아집니다. 따라서 고품질의 cDNA 를 얻기 위해서는 주기 수를 승인된 매개변수 내에 유지하는 것이 중요합니다.

Q: SMARTTM 라이브러리의 특징은 무엇입니까?

답: 스마트 cDNA 문고에는 풍부한 전장 cDNA 가 포함되어 있습니다. 삽입된 조각의 평균 크기는 1.5-2 Kb 입니다. SMART 라이브러리에서 복제한 가장 큰 삽입 조각은 6kb 보다 큰 β-미오신 cDNA 입니다. 초기 재료가 총 RNA 인 경우에도 리보솜 RNA 는 거의 선별되지 않습니다. 실험 결과 SMART cDNA 문고에서 온 50 개의 클론이 리보솜 RNA 복제를 표시하지 않은 것으로 나타났다. 50 ng 총 RNA 또는 25 ng poly A+ RNA 로 구성된 스마트 CDNA 라이브러리의 유전적 충실도는 표준 Gubler 및 Hoffman 방법을 통해 5 ug poly A+ RNA 로 구성된 라이브러리와 유사합니다.

Q: SMARTTM PCR 이 증폭한 cDNA 에 rRNA 서열이 없는 이유는 무엇입니까?

A: SMART 의 첫 번째 체인 cDNA 를 합성하는 동안 rRNA 를 역전시킬 수 있지만 후속 PCR 중에는 이러한 시퀀스가 확대되지 않습니다. 대부분의 경우 rRNA 서열은 자기지도를 통해 역전되기 때문에 최종 cDNA 단편에는 5' 와 3'SMART 특이성 서열이 없어 지수 PCR 을 통해 증폭할 수 없기 때문이다.

Q: SMART PCR cDNA 증폭 템플릿으로 사용할 수 있는 최소 RNA 양은 얼마입니까?

A: SMART 기술을 사용하여 10ng 총 RNA 에서 라이브러리를 만들 수 있지만, 원본 자료는 최소 50ng 총 RNA 또는 25 ng Polya+RNA 여야 합니다. 스마트 CDNA 그룹의 질이 더 높고 유전자 대표성이 더 강하다는 것을 보증한다.

Q: SMARTTM 올리고 뉴클레오티드의 순서를 바꿀 수 있습니까?

답: 과뉴클레오티드 서열의 모든 변화는 cDNA 합성과 증폭의 효율성에 영향을 줄 수 있다. 스마트 ⅱ 및 스마트 ⅳ 거의 없습니다.

글리코 시드 산의 서열 및 설계는 특허로 보호됩니다.

기기, 시약 및 소모품 구입-쉬운 생물에서!