응축 (생물 물리학 방법)
응혈법은 생물물리법이라고도 할 수 있는데, 일련의 물리량 (빛, 전기, 기계 운동 등) 의 변화를 감지함으로써. ) 응고 활성화제의 작용으로 혈장을 처리한 다음 컴퓨터를 통해 얻은 데이터를 분석하여 최종 결과로 변환한다.
A. 현재 방법
현재 방법은 섬유단백원이 전도되지 않고 섬유단백질이 전도하는 특성을 이용해 테스트할 샘플을 회로의 일부로 응고 과정에서 회로 전류의 변화에 따라 섬유단백질의 형성을 판단하는 것이다. 그러나 현재 방법의 불안정성과 단일성으로 인해 더 민감하고 확장 가능한 광학 방법에 의해 곧 제거됩니다.
B. 광학 방법 (탁도법)
광학 응고기는 응고 과정에서 탁도의 변화에 따라 응고 기능을 측정한다.
테스트할 샘플이 응고 과정에서 빛의 변화에 따라 샘플의 응고 상태를 판단한다. 응결제가 샘플에 추가될 때 샘플의 광강도는 샘플에서 섬유소 덩어리가 형성됨에 따라 점차 증가한다. 기기는 이런 광학 변화를 응고 곡선으로 묘사하는데, 견본이 완전히 응고된 후 광도는 변하지 않는다. 일반적으로 응고 시작점은 0%, 응고 끝점은 100%, 50% 는 응고 시간입니다. 광 검출기는 이 빛의 변화를 받아 전기 신호로 변환한 후 확대한 후 모니터로 전송하여 처리하여 응고 곡선을 그립니다.
광학 응고 실험의 장점은 감도가 높고 기기 구조가 간단하고 자동화하기 쉽다는 것이다. 단점은 샘플의 광학 이상, 테스트 컵의 매끄러움, 샘플의 거품이 모두 측정의 간섭 요인이 된다는 것이다.
C. 자기 비드 방법
초기의 자주법은 테스트 컵에 자주를 넣고 컵 밖의 강자성 금속봉으로 직선에 붙이는 것이었다. 표본이 굳은 후, 섬유단백질의 형성으로 인해 자주가 금속봉에서 자리를 옮긴 후, 기기는 이에 따라 응고 종점을 탐지한다. 이런 기구는 평면 자주법이라고도 할 수 있다. 초기 평면 자기주법은 광학법에서 샘플 배경 간섭 문제를 효과적으로 극복할 수 있지만 감도가 낮은 단점이 있다.
현대 자주법은 80 년대 말, 90 년대 초 상업화에 진입했고, 현대 자주법은 쌍자주법이라고 불린다. 이중 자기 자기 비드 방법의 테스트 원리는 테스트 컵의 양쪽에 드라이브 코일 세트가 있어 일정한 교류 전자기장을 만들어 테스트 컵에서 특별히 제작된 소자 강철 공을 같은 진동으로 유지하는 것이다. (데이비드 아셀, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 자기명언) 응고 활성화제를 첨가한 후 섬유소 생성량이 증가함에 따라 혈장 점도가 증가하면서 작은 강철 공의 운동 폭이 점차 약해졌다. 기기는 또 다른 측정 코일이 감지하는 작은 강철 공 운동의 변화에 따라 동작 폭이 50% 로 감소할 때의 응고 끝점을 결정합니다.
기질 발색법 (생화학 방법)
기질 발색법은 발색 기질의 흡광도 변화를 측정하여 측정된 물질의 함량과 활성성을 추정하는 것으로 생화법이라고도 한다. 감지 채널은 할로겐 램프를 검출 광원으로 사용하며 파장은 일반적으로 405nm 입니다. 탐지기와 광원은 색도계와 비슷한 직선에 있다.
혈구 응고기는 발색기질을 이용하여 혈전과 지혈지수를 검출하는 원리는 천연응혈인자 아미노산 서열과 비슷하고 특정 작용 부위를 가진 작은 펩타이드를 합성하여 수해할 수 있는 발색화학 유전자를 작용 부위의 아미노산과 연결하는 것이다. (존 F. 케네디, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 건강명언) 응고 인자는 단백질 가수 분해 활성을 가지고 있기 때문에 천연 단백질 펩타이드 사슬뿐만 아니라 합성 펩타이드 사슬 기질에도 작용하여 착색 된 유전자를 방출하고 용액을 착색 할 수 있습니다. 색깔을 생성하는 음영은 응고 인자의 활성에 비례하므로 정확하게 정량화할 수 있다. 현재 합성된 폴리펩티드 기질은 수십 가지가 있는데, 가장 많이 사용되는 것은 p-니트로 아닐린 (PNA) 으로 노란색이며 파장 405mm 로 측정할 수 있다.
면역학 방법
면역학 방법에서는 순화한 물질을 항원으로 해당 항체 () 를 준비한 다음 항원 항체 반응을 통해 이 물질을 정성과 정량적으로 측정한다. 일반적으로 사용되는 방법은 다음과 같습니다.
A. 면역 확산법. 측정 된 물질과 해당 항체, 특정 매체에서 결합, 침전 링의 크기를 측정, 표준과 비교, 측정 된 물질의 농도를 계산 합니다. 이 방법은 조작이 간단하고 특수 장비는 필요하지 않지만 시간이 너무 오래 걸리고 감도가 낮으며 함량이 높은 응고 인자 검사에만 적용됩니다.
B. 화살표 전기 영동. 특정 전기장 하에서 겔 지지물의 측정 된 물질은 해당 항체 (rocket peak) 와 결합하여 "로켓 피크 (rocket peak)" 를 형성하며, 로켓 피크의 높이는 그 함량에 비례합니다. 피크를 측정하고 정량 측정 기준과 비교하다. 이 방법은 조작이 복잡하고 임상 응용이 적다.
C. 2 차원 면역 전기 영동. 일부 분자 구조가 비정상적인 응고 인자는 수평과 수직 방향의 전기 영동에 의해 분리될 수 있다.
D. 효소 연쇄 면역 흡착 분석 (ELISA). 효소표 항원이나 항체 및 검사물과의 항원 결합 반응, 샘플에서 결합되지 않은 항원이나 항체 및 간섭 물질을 세탁하여 관벽에 고정되어 있는 항원 항체 복합물을 남겨 두고 효소의 기질과 발색 물질 반응을 넣어 유색 물질을 만들어 효소 표지계로 측정하는데, 색 농도는 검사물의 농도에 비례한다. 이 방법은 고감도와 특이성을 가지고 있으며 많은 지혈과 혈전 형성 성분을 감지하는 데 사용되었습니다.
E. 면역 탁도법. 테스트 오브젝트를 해당 항체 믹스와 혼합하여 복합물을 형성하여 투과탁도나 산란탁도를 통해 결정되는 충분한 침전 입자를 생성합니다. 이 방법은 간단하고 정확하며 자동화하기 쉽습니다.