재조합 벡터를 배아줄기세포와 녹아웃 마우스에 전기전달하는 것은 현대 생명과학의 기초연구와 신약개발 분야에서 없어서는 안 될 실험동물 모델이 됐다. 녹아웃 마우스를 준비하기 위한 배아줄기세포 기반의 유전자 타겟팅 기술은 현재까지 거의 모든 게놈 변형 요구 사항을 충족할 수 있는 유일한 타겟팅 기술입니다.
프로젝트 설계
F1 세대 마우스 마우스 확보 .
sgRNA/cas9의 활성을 검출하기 위해 Biocytogen이 독자적으로 개발한 UCA 키트를 사용합니다.
7. EGE 기술(CRISPR
Cas9 기술 기반)
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mrna
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2; f1 세대 마우스의 유전자형을 확인하기 위한 서던 블롯 하이브리드화 기술(유전자 녹아웃 마우스 검출의 최적 표준)을 사용했습니다.
키메라 마우스를 얻었습니다.
마우스 수정란의 전핵에 sgRNA/를 주입했습니다.
프로젝트 설계에 따라 타겟팅 벡터의 설계 및 구축이 완료되었습니다.
2. transfection은 g418 배아 줄기 세포로 스크리닝되었습니다.
sgRNA/의 시험관 내 전사. 양성 클론을 얻기 위해 이 두 가지 기술을 사용하여 유전자 녹아웃 마우스를 준비하는 과정은 무엇입니까? 녹인 효율은 높고 빠르며, f0 세대 양성 마우스는 2개월 만에 얻을 수 있습니다.
이전 단계에서 얻은 양성 클론은 PCR 및 Southern
혼성화 기술(유전자 녹아웃 마우스 검출의 최적 표준)을 통해 추가로 스크리닝되지만 현재는 생명과학 분야에서 유전자 녹아웃의 측면에서
6.
타겟팅 벡터 설계 및 구성
3.
fo Generation Mice를 확보하고, PCR을 이용하여 fo Generation Mice의 유전자형을 동정
3.
타겟 서열을 인식하는 sgRNA를 설계 및 제작하지만 그렇지 않음
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EGE 기술을 이용한 유전자 녹아웃 마우스 제조 과정(CRISPR
Cas9 기술 기반)
1. 이형접합성 마우스를 5개월 만에 얻었으며, 마우스 및 인체 의학, 건강연구 분야에서 중요한 역할을 하고 있다.
배아줄기세포의 유전자 표적화 기술을 기반으로 유전자 녹아웃 마우스를 제조하는 과정.
마우스 배반포에 주입된 클론 양성 배아줄기세포. 배아줄기세포 기반 유전자 표적화 기술? 1. f1 양성 이형접합성 마우스를 확보하고 외래 유전자를 안정적으로 통합하는 배아줄기세포 양성 클론을 얻습니다. EGE 기술(CRISPR
Cas9 기술 기반) 시스템 구성은 간단합니다.
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5. EGE 기술(CRISPR
Cas9 기술 기반)을 이용한 유전자 녹아웃 마우스 제작은 배아줄기세포 기반 유전자 표적화 기술을 기반으로 한 유전자 녹아웃 마우스 제작보다 더 번거로워 보이지만, 그 주기와 작업량이 길고 대상 세균을 주문합니다.
타겟 유전자 절단을 유발하는 ege 시스템 벡터 플라스미드를 설계하고 구성합니다.
88; p>mRNA와 표적 벡터를 임신한 쥐의 자궁에 이식합니다.
6. 2. 다종 유전자 녹아웃/