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중국 사람

식물 병 저항성 유전자 공학이 발달하면서 점점 더 많은 항병 유전자가 발견되었다. 2004 년, Taler 등은 인도 야생 멜론 품종에서 세린 아세트알데히드산 트립타제 (SGT) 활성을 지닌 멜론 서리 곰팡이 저항성 유전자 At 1 At2 두 개를 복제했다. Taler 등은 At 1 At2 가 식물 광호흡 경로와 관련된 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 활성을 가지고 있으며, 알려진 R 유전자에 속하지 않으며, 병원균에 대한 저항은 종 특이성이 없고, 내병성은 H_2O_2 와 관련이 있다. 이 현상을 바탕으로 그들은 새로운 항병 메커니즘인' 효소 항병' 을 제시했는데, 이는 효소의 표현을 바꿔 식물에 항병성을 부여했다는 첫 번째 보도다. At 1 At2 는 흰가루병 이외의 다양한 식물 잎병에 내성이 있을 것으로 추정되며 연구가치가 높은 항병 유전자다. 그리고' 효소 항병' 의 이치는 더 많은 유전학적 증거와 실험 지원이 필요하다. 이에 따라 광호흡이 매우 강한 콩에서 At 1 및 At2 의 동원유전자 GmSGT 를 복제하고 서열 분석, 효소 활성센터 예측 및 원핵 표현 분석을 실시하여 수용체 식물로 이송해 내병성 검증을 진행했다. 이 글의 주요 연구 성과와 혁신은 다음과 같이 요약된다: 1. 대두 EST 서열과 5'-Race 기술을 이용하여 처음으로 대두 항상곰팡이 품종에서 세린 아세트알데히드산 암모니아효소를 코딩하는 GMGT 1 유전자 서열 (1국가발명 특허, 특허 번호: ZL2005/ 한편 SA 에서 유도한 감병종 흑농 10 에서 GmSGT 1 의 두 가지 동원유전자 GMS GT 2 와 GMS GT 3 을 복제했다. 서열 분석에 따르면 GmSGT 1 Taler 등이 보도한 멜론 곰팡이 저항성 유전자 At 1 At2 의 아미노산 서열은 각각 88.03%, 87.78% 의 동원성이 있으며, 동시에 의남, 벼, 모모, 다엽부랑과 함께 나타났다. GmSGT 1 에서 파생된 단백질의 서열 분석에 따르면, 그것은 피리도알데히드 -5- 인산 결합점 GSQKAL 과 강력한 과산화물 효소 위치 신호 SRI 를 가지고 있어 이 유전자가 광호흡을 통해 식물 과산화물 효소체에서 작용할 수 있다는 것을 보여준다. GmSGT2 와 GmSGT3 은 GmSGT 1 의 뉴클레오티드 서열과 96.38%, 99. 17%, 유도된 아미노산 서열 동원성은 97.03%, 99.25% 였다. GMS GT 1, GMS GT 2 및 GMS GT 3 의 효소 활성 센터를 바이오정보학 방법으로 분석했습니다. 그 결과, 세 가지 단백질 서열은 모두 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 활성을 가지고 있는 것으로 나타났다. 2. 대장균에서 식물 광호흡 경로를 시뮬레이션하여 GmSGT 1 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 활성을 처음으로 발견했다. 광호흡 경로의 반응: 글리콜 산 (? H2O 2+ 글리 옥실 산; 글리 옥실 산 (? ) 글리 옥실 산. 대장균에는 에탄올산 산화효소 (GOX) 가 함유되어 있기 때문에 원핵 표현균에 에탄올산을 넣어 이 같은 반응을 완성할 수 있다. H2O 2 함량의 변화를 감지하여 GmSGT 1 유전자의 세린 아세탈산 트립토판 기능을 확인할 수 있다. GmSGT 1 단백질을 표현하는 그룹만이 대량의 H2O 2 생성을 유도할 수 있는 반면 대조군은 그렇지 않다는 연구결과가 나왔다. 따라서 GmSGT 1 은 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 활성을 증명할 수 있다. 3. GmSGT 단백질과 다른 콩 품종 저항성의 상관관계를 분석했다. Western 잡교 결과, 항상곰팡이 품종 조풍 5 호와 구농 9 호에서는 목적단백질의 표현이 검출되고, 감병 품종 흑농 10 에서는 목적단백질의 표현이 검출되지 않은 것으로 나타났다. SA 유도 전후의 반정량 RT-PCR 결과, 감병품종 흑농 10 은 SA 유도 전에 표현이 감지되지 않았지만 SA 유도 후 약간 발현돼 콩의 동해에 대한 저항이 크게 높아진 것으로 나타났다. 따라서 GmSGH 의 표현은 확실히 SA 유도 경로와 관련이 있으며, GmSGT 1 표현량이 증가함에 따라 흰가루병에 대한 콩의 저항도 눈에 띄게 높아졌다고 추정하고 있습니다. 4. 식물 표현 전달체 GmSGT 1 을 구축하고 담배 전환을 통해 유전자 변형 식물을 얻어 갈색 반점, 흑정병, 청마병에 대한 저항성을 검증했다. 그 결과 유전자 변형 담배가 갈색 반점, 흑경병, 청마병에 대한 담배 저항성을 크게 높인 것으로 나타났다. 이 연구는 Taler 등이 제기한 식물' 효소 항성 유전자' 에 대한 새로운 실험 증거 5 를 제공한다. 항병 품종 조풍 5 호를 재료로 유전자 변형 대두 GmSGT 1 유전자가 콩에서 시공간적으로 표현되는 특징을 연구했다. 이 유전자는 콩 잎에 표현되며 뿌리와 줄기에는 표현되지 않으며, 표현량은 성장기의 증가에 따라 증가하고 생식성장기에 가장 강한 표현을 한 뒤 세포가 노화되면서 사라질 때까지 약해진다. 이는 GmSGT 1 의 변화 추세가 식물 광호흡의 변화 추세와 일치한다는 것을 보여준다. 광호흡 경로에서 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 상류에 작용하는 에탄올산화효소 (GOX) 의 표현 특성도 검출됐다. 그 결과, GOX 의 표현 수준은 GmSGT 1 과 일치하여 GmSGT 1 의 업스트림 반응과 H2O 2 표현이 동시에 향상되었음을 알 수 있습니다. 이것은 GmSGT 단백질이 식물 광호흡 경로에서 작용한다는 우리의 결론과 일치한다. 콩의 유전자 변형 시스템이 확인되었습니다. 콩조풍 5 호와 흑농 10 의 조직배양체계를 확립해 농균 매개법을 통해 건설된 식물 표현 전달체 PIM1.1-GMS GT-PLUS 를 조풍 5 호와 RNAi 식물 표현 전달체로 전환했다. 동시에 재생 빈도, 재생 시간, K 선별 농도, 농균에 따른 감염 시간이 재생아 재생 빈도에 미치는 영향을 연구하여 조풍 5 호의 조직 배양과 변환 체계를 더욱 최적화하기 위한 실험적 근거를 제공했다.

영어

식물 항병 유전자가 발달하면서 점점 더 많은 항병 유전자가 인체에서 발견되었다. 2004 년 Taler 와 인도에서 온 다른 야생 멜론 항상곰팡이 품종은 이미 두 개의 세린 아세트알데히드산 트립토판 효소 (SGT) 활성 멜론 항상곰팡이 유전자 At 1 및 At2 를 복제했다. Taler At 1 및 At2 는 세린 아세트알데히드산 아미노 전이 효소 활성과 식물 광호흡 경로가 있는 유전자로, 어떤 종류의 알려진 R 유전자에도 속하지 않으며, 병원균에 대한 특별한 항성이 없는 종으로 항병 작용은 H2O 2 와 관련이 있다. 이 현상을 바탕으로 그들은 새로운 항병 메커니즘인' 효소 저항' 을 제시했는데, 이는 효소의 표현을 바꿔 식물에 항병성을 부여했다는 첫 번째 보도다. At 1 At2 는 als o 서리 곰팡이에 다른 많은 식물 잎병보다 더 강한 항성작용을 할 것으로 추정되는데, 이는 이 항성 유전자가 큰 연구가치를 가지고 있고,' 항성효소' 메커니즘의 제기는 지지와 검사를 위해 더 많은 유전자가 필요하다는 것을 보여준다. 이에 따라 이 글은 콩광호흡복제 At 1 At2 에서 동원유전자 GmSGT 를 복제해 서열 분석, 효소 활성점 예측, 원핵 표현 분석, 수용체 식물로 전입해 내병성 검진을 실시했다. 지금 논문의 주요 발견과 혁신점은 다음과 같이 요약됩니다: 1 대두 EST 서열을 이용하여 5'-Race 기술을 이용하여 처음으로 항상곰팡이 콩 품종에서 코드화된 세린 아세트알데히드산 트립토판 유전자 sequence gmg gt 1 (이미 국가 발명 특허, 특허 번호: ZL20051; 서열 분석에 따르면 GmSGT 1 다른 멜론 서리 곰팡이 저항성 유전자와 보도된 At 1, At2 아미노산 서열 동원성은 88.03% 와 87.78% 에 달했다. 동시에, GmSGT 1 과 의남 (Arabidopsis Thaliana L.), 벼 (Oryzae Sativa L.), Fritillaria (Fritillaria), 부평초 (Spire) GMS gt 1 파생 단백질 서열 분석 결과, 5- 인산도알데히드 결합점 GSQKAL 과 강력한 과산화물 효소 표적 신호 SRI 를 통해 이 유전자가 식물 과산화물 효소 광합성에서 GmSGT2 와 GmSGT3 과 GmSGT 1 을 사용할 수 있음을 알 수 있다. 바이오정보학 방법을 통해 GmSGT 1, GmSGT2, GmSGT3 단백질의 효소 활성점을 분석한 결과, 이 세 가지 단백질 서열은 모두 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 활성을 가지고 있는 것으로 나타났다. 광호흡 경로 반응 발생: 글리콜 산 (? ) H2O 2+ 글리 옥실 산; 글리 옥실 산 (? 간 헬륨산. 대장균에는 에탄올산 산화효소 (GOX) 가 함유되어 있기 때문에 원시균은 산을 첨가하여 표현되며, 위에서 언급한 반응을 통해 이루어지며, H2O 2 량의 변화를 감지하여 GmSGT 1 세린 아세트알데히드산 암모니아효소 유전자의 기능을 확인할 수 있다. 그 결과, GmSGT 1 단백질 성분의 표현만이 H_2O_2 의 대량 생산을 유도할 수 있고 대조군은 나눌 수 없으므로, 세린산으로 GmSGT 1 아세트알데히드산 암모니아효소의 활성을 측정할 수 있는 것으로 나타났다. Western blotting 결과, 흰가루병 저항성 품종은 5 일과 9 일 농업 9 일에 의도적인 표현을 감지할 수 있고 흑농 10 호에는 무감각한 것으로 나타났다. SA 유도 전후의 반정량 RT-PCR 결과, 감병 흑농 10 호는 SA 유도 전에 표현이 감지되지 않았고, SA 유도 표현의 미량콩은 크림효소에 대한 저항성이 크게 높아졌다고 밝혔다. 따라서 GmSGT 1 의 유도 표현 방식은 진실하고 관련이 있으며, GmSGT 1 표현량이 증가함에 따라 흰가루병에 대한 콩의 저항도 눈에 띄게 높아졌다고 추정하고 있습니다. 4. GMS gt 1 식물 표현 전달체를 구축하여 담배 전환을 위해 유전자 변형 식물을 얻었으며 갈색 반점, 흑정병, 청마병에 대한 담배의 항성 평가를 받은 결과 유전자 변형 담배가 갈색 반점, 흑정병, 청마병에 대한 저항성을 크게 높였다는 것을 알 수 있다. 탈러 등. 이 연구는 식물' 효소 항성 유전자' 를 제시하여 새로운 실험 증거를 제공했다. 5. 최초의 5 개 항병품종을 이용해 콩에서 표현된 시공간적 특징을 탐구했다. 이 유전자는 콩잎에 표현되지만 뿌리와 줄기에서는 표현되지 않고 출산기간이 진행됨에 따라 표현량이 늘어나면서 대부분 생식단계에서 표현된 다음 세포가 노화됨에 따라 감소할 때까지 감소한다 이것은 식물 GmSGT 1 광호흡의 추세선을 보여준다. 광호흡경로 중 상류 세린 아세트알데히드산 암모니아효소의 작용으로 에탄올산산화효소 (GOX) 의 표현 특징을 동시에 검출한 결과, GOX GmSGT 1 의 표현 수준 변화가 일치한다는 것을 알 수 있어 GmSGT 1 표현이 높아지면서 업스트림 반응도 향상되었다는 것을 알 수 있다. 우리는 GmSGT 라는 식물 광호흡 경로 단백질이 결론에서 작용한다고 추측한다. 유전자 변형 시스템을 연구하고 확인했습니다. 환풍은행은 일찍이 5, 콩, 흑농 10th 에 배아끝 조직 배양체계를 건립해 뿌리암 농균 LBA4404 매개 식물 표현 전달체를 이용하여 우량 멤버 PIM1.1-GMSGT 를 만들었다. 이와 함께 환풍 5 호의 배아끝, 자엽절, 하배축 3 개 외식체의 재생 빈도, 재생 시간, K 선별 농도, 농균 감염 시간에 대해 서로 다른 재생 빈도의 새싹 재생을 연구하여 5 번 조직 배양, 변환 체계의 추가 최적화를 위한 실험 근거를 제공했다.