I. 임상 표본 수집 및 보존
혈청 (혈장) 은 ELISA 측정에 가장 많이 사용되는 임상 표본으로 타액, 뇌척수액, 소변, 배설물 등의 표본도 특정 검사 목적으로 사용된다. 현재 임상적으로 혈청 샘플에 의해 결정된 표지물에는 일반적으로 감염성 병원체 항원과 항체, 종양 표지자, 호르몬, 특수단백질, 세포인자, 치료약 등이 포함된다. 호르몬과 치료제 측정을 위한 혈청 샘플 수집의 경우 채집 시간과 체위가 측정 결과에 영향을 미칠 수 있다는 점에 유의해야 한다. 예를 들어 코티손은 새벽 4 시에서 6 시 사이에 성장호르몬, 황체생성소 (LH), 모낭호르몬 (FSH) 이 모두 진발성 패턴으로 방출된다. 따라서 밀접하게 연결된 시간 간격 내에 혈액 샘플 몇 부를 채취해 그 중 값을 측정치로 해야 한다. 다시 한 번, 침상에서 서 있는 자리로 바꾸면 혈청 속 레닌의 활성화가 눈에 띄게 높아진다. 예를 들어, 치료제 검사에서는 약대역학에 따라 최적의 혈액검사 시간을 선택해야 한다. 전염성 병원체 검사에 사용되는 항원과 항체, 종양 표지자, 특수 단백질의 혈청 샘플 수집은 시간과 자세에 영향을 주지 않지만, 처리 및 보존시 다음 측면을 고려해야 한다.
(1) 심한 용혈을 피하십시오. 헤모글로빈에는 헤모글로빈 기단이 함유되어 있어 과산화물과 비슷한 활성성을 가지고 있다. 따라서 HRP 를 표지효소로 하는 ELISA 측정에서 혈청 샘플 중 헤모글로빈의 농도가 높으면 부화 과정에서 고체상에 쉽게 흡착되어 뒤에 첨가된 HRP 기질에 반응하여 발색된다.
(2) 샘플 채취와 혈청 분리 과정에서 세균 오염을 최대한 피해야 한다. 세균의 성장으로 인해 분비되는 일부 효소가 항원, 항체 등 단백질을 분해할 수 있기 때문이다. 둘째, 대장균의 베타-반유당효소와 같은 일부 세균의 내원성 효소는 해당 효소 표기 측정 방법에 비특이적 간섭을 일으킬 수 있다.
(3) 혈청 표본은 무균 조작을 통해 분리되면 2 ~ 8 C 에서 일주일 동안 보관할 수 있으며, 세균 조작을 거치면 냉동보존을 추천한다. 샘플의 장기 보존은 -70℃ 이하여야 한다.
(4) 냉동 혈청 샘플이 정전으로 인해 반복적으로 얼지 않도록 주의해라. 표본이 반복적으로 얼어서 생기는 기계적 전단력은 표본의 단백질 등 분자를 파괴해 위음성 결과를 초래한다. 또한, 동결 융해 표본의 혼합에주의를 기울여야하며, 격렬하게 진동하지 말고 반복적으로 혼합해야합니다.
(5) 보존 과정에서 세균 오염으로 혼탁하거나 솜이 발생하는 경우 원심침착한 후 청액 검사를 받아야 한다.
둘째, 시약 준비
임상 실험실에서 시약 준비는 일반적으로 중시되지 않는다. 일반적인 방법은 냉장고에서 시약, 실험 과정에서 즉시 사용 하는 것입니다, 이러한 관행은 미래의 부화 시간 부족에 영향을 미칠 수 있는 문제를 무시 하 고, 직접적인 결과는 일부 약한 양성 샘플이 거짓 음성이 될 수 있다는 것입니다. 따라서 ELISA 의 시약 준비에서 가장 중요한 것은 실험이 시작되기 전에 냉장고에서 테스트 키트 꺼내어 실온에서 20 분 이상 방치한 다음 측정해 테스트 키트 사용 전에 실온과 균형을 이룰 수 있도록 하는 것이다. 이렇게 하는 목적은 주로 반응 미공의 온도가 후속 부화반응 단계에서 필요한 높이에 빠르게 도달하여 측정 요구 사항을 충족시킬 수 있도록 하는 것이다. 둘째, 현재 시판되고 있는 효소 연쇄 면역 테스트 키트 속 세탁액은 실험실에서 사용할 때 제공된 농축액으로 희석해야 하기 때문에 희석용 증류수나 이온수의 품질이 보장되어야 한다. 또한 OPD 가 테스트 키트 속 기질로 사용될 경우, 발색에 반응하기 전에 기질 용액을 임시로 준비해야 한다.
셋째, 혈청 샘플과 반응 시약 추가
현재 상용 ELISA 테스트 키트 중 혈청 샘플 추가는 미량 샘플러를 사용하여 샘플을 추가하는 유일한 단계입니다. 미량샘플러를 사용할 때 주의해야 할 점은 견본을 너무 빨리 추가하지 말고, 구멍 벽 위에 추가하지 말고, 튀거나 거품이 생기지 않도록 해야 한다는 것이다. 너무 빨라서 미량의 첨가의 정확성과 균일성을 보장할 수 없다. 구멍 벽의 윗부분에 코팅되지 않은 영역을 추가하면 비특이적 흡착이 발생하기 쉽다. 스플래시는 인접한 구멍을 오염시킬 수 있습니다. 거품이 나타나면 반응액 인터페이스가 다릅니다. 국산 테스트 키트 중, 시약 들은 기본적으로 방울병에서 떨어진다. 떨어지는 각도 외에 떨어지는 속도도 중요하다. 방울을 너무 빨리 넣으면 두 구멍 사이에 물방울을 반복하거나 첨가하기 쉬우므로 구멍의 코팅되지 않은 영역에 비특이적 흡착이 발생하여 비특이적 발색을 일으킬 수 있습니다. (윌리엄 셰익스피어, 비특이적, 비특이적, 비특이적, 비특이적, 비특이적, 비특이적) 그래서 때로는 같은 테스트 키트 샘플, 이번에는 양성이고, 다음에는 음성이며, 종종 위에 언급한 샘플과 시약 추가 오류로 인해 발생한다.
넷째, 따뜻한 교육
부화는 ELISA 의 성패에 영향을 미치는 가장 중요한 요인이다. ELISA 는 고체상 면역 분석 방법으로 항원과 항체 결합 반응이 고체상에서 진행된다. 액상의 항원이나 항체 및 고체상의 특이항체 또는 항원을 완전히 결합하려면 일정한 온도에서 일정한 시간을 반응해야 한다. 부화에 필요한 시간은 온도에 반비례한다. 즉 온도가 높을수록 필요한 시간이 짧아진다. 가장 일반적으로 사용되는 부화 온도는 37 C 와 실온, 그 다음은 43 C 와 2 ~ 8 C 입니다.
부화는 임상 ELISA 중 가장 문제가 발생하기 쉽다. 일반적으로 국산 상용 ELISA 테스트 키트 반응 부화 시간은 37 C 30 분 ~ 1 시간이고, 수입 ELISA 테스트 키트 반응 부화 시간은 보통 37 C1~ 2 시간이며 측정 하한선에 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 부화와 관련하여 실제 측정 작업에서 다음 사항에 주의해야 합니다.
(1) 설정된 온도에서 충분한 반응 시간이 있는지 확인합니다. 일반적으로 샘플 및/또는 시약 추가 후 마이크로플레이트를 실온에서 수욕상자나 배양함에 넣을 때, 구멍 안의 온도가 실온에서 37 C 로 상승하는 데는 시간이 걸립니다. 특히 실온이 낮고 수욕 상태가 아닌 경우에는 더욱 그렇습니다. 그러나, 임상 실험실에서, 이 문제에 관심을 갖는 사람은 거의 없다. 보통 마이크로플레이트는 배양함에 넣자마자 시간을 잰다. 이렇게 하면 실제 측정된 부화 시간으로 이어지기 쉽다. 남방의 모 혈액은행 동료들이 한 가지 질문을 한 적이 있는데, 바로 매년 겨울마다 항상 한 달이 넘는다는 것이다. HBsAg 측정의 실내 품질 관리에서 보건부 임상검사센터에서 제공하는 1 ng/ml 약양성 샘플을 측정할 때 항상 감지되지 않는다. 왜 그런지 모르겠어요. 이것은 우리나라 남방의 겨울 실내 온도가 낮은 것과 관련이 있을 수 있다. 이때 마이크로플레이트가 배양상자로 옮겨진 후 37 C 부화 시간이 부족해 약한 양성 샘플을 음성으로 만들었다. 따라서 37 C 에서 충분한 부화 시간을 확보하기 위해 검사과는 본 실험실의 다른 계절 (실온에 따라) 에서 실온에서 배양함을 받은 후 구멍 내 온도가 37 C 에 도달하는 데 얼마나 걸리는지 스스로 결정할 수 있어 배양함에 판자를 넣는 데 걸리는 시간을 적절히 연장할 수 있다. 특히 판공반응액에 작은 온도계를 넣어 측정하고 관찰하는 것이다.
(2) 배양 온도의 선택. 일부 ELISA 테스트 키트 설명서에 따르면 두 개의 부화온도가 있는데, 예를 들면 하나는 37 C1시간, 하나는 43 C 45 분입니다. 면역 분석에서 항원 항체 반응의 성질로 볼 때 낮은 온도에서 장시간 반응이 가장 완벽하다. 예를 들어 2 ~ 8 C 에서 24 시간 정도 걸립니다. 높은 반응온도에서는 분자운동의 아쉬움으로 반응시간이 짧아지고 분자함량이 많은 강양성 샘플 측정에는 문제가 없지만 분자함량이 적은 약양성 샘플에 대해서는 검사가 누락될 수 있다. 따라서 임상 ELISA 측정에서 가능한 낮은 부화온도와 긴 반응시간의 조건을 사용하는 것이 좋습니다.
(3) "가장자리 효과" 를 제거하십시오. 과거에는 96 오리피스 플레이트를 사용한 ELISA 측정에서' 가장자리 효과' 를 자주 발견했습니다. 즉, 주변 구멍의 색상이 중심 구멍의 색상보다 어둡습니다. 이러한 "가장자리 효과" 의 원인은 96 오리피스 판의 주변 구멍과 중심 구멍 사이의 표면 또는 열역학 특성의 차이일 수 있습니다. 그러나 부화 중인 열역학 그라데이션이 근본 원인일 수 있다는 연구결과도 있다. 폴리스티렌 자체는 불량 열 도체이다. 실험실의 일반적인 ELISA 측정에서 플레이트가 실온 (보통 25 C 안팎) 에서 37 C 의 배양함에 넣고 플레이트도 가열되면 주변 구멍과 중심 구멍 사이에 열역학 그라데이션이 있을 수 있습니다. 따라서 수욕을 사용하거나 판구멍에 반응액을 추가할 때 판과 용액을 부화온도 (예: 37 C) 로 가열하면' 가장자리 효과' 를 쉽게 제거하고 측정의 반복성을 높일 수 있다.
요약하자면, 임상 ELISA 측정에서 좋은 측정 효과를 보장하기 위해 다음과 같은 간단한 방법으로 부화조건을 보장할 수 있습니다. 즉, 물욕을 최대한 사용하고 부화할 때 마이크로플레이트를 수면에 띄우거나, 물에 담근 사포를 큰 도시락의 젖은 상자에 넣고 따뜻한 상자에 넣을 수 있습니다. 판자 구멍 밑부분이 물이나 젖은 천과 직접 닿기 때문입니다.
다섯째, 널빤지
고체상 면역 분석은 이질적 면역 분석 기술로, 세척 작업을 통해 특이성을 고체상 항원이나 항체 및 반응 부화 과정에서 흡착된 비특이적 성분을 분리해 ELISA 의 특이성을 보장해야 한다. 따라서 세탁판도 ELISA 측정에서 매우 중요한 단계입니다. HRP 를 표기효소로 하는 ELISA 테스트 키트 중 사용되는 세정액은 일반적으로 0.05%Tween20 을 함유한 중성 PBS 로, Tween20 은 친수기단과 소수기단을 모두 함유한 비이온세제다. 세탁에서의 작용 메커니즘은 소수성 상호 작용과 폴리스티렌 고체상에 수동적으로 흡착 된 단백질의 소수성 기단이 소수성 결합을 형성하여 단백질과 고체상의 흡착을 약화시키는 것이다. 한편, 액상에서 친수기단과 물 분자의 공동 작용으로 단백질은 고체상에서 분리되어 액상으로 들어가 특이성 흡착제를 제외한 목적을 달성할 수 있다. 하지만 항체 또는 항원의 가방은 보통 알칼리성 조건 하에서 고상과의 소수상호 작용을 통해 고상에 수동적으로 흡착되기 때문에 비이온 세제의 농도에 주의해야 한다. 세판액 중 Tween20 농도가 0.2% 를 넘으면 고상에 싸여 있는 항원이나 항체 등을 탈부착해 검사 하한선에 영향을 미친다.
임상 실험실에서, ELISA 세척판은 일반적으로 두 가지 방법, 즉 수동과 세척기이다. 수동 세척판은 반응이 부화할 때마다 반응액을 빨아들이거나 말리고, 판구멍을 세척액으로 가득 채우고, 2 ~ 3 분 정도 방치한 후 세척액을 빨아들이거나 말리고 흡수지에서 말리는 것을 말한다. 위의 세탁 단계를 3 ~ 4 회 반복하고 마지막으로 흡수지를 두드려 말리면 다음 측정 작업을 진행할 수 있다. 세탁기로 보드를 씻는 것은 위의 인공조작을 세탁기로 바꾸는 것이다. 세탁기로 설거지를 하는 특징 중 하나는 매번 세탁을 마칠 때마다 찍지 않기 때문에 액체가 많이 남아 있다는 것이다. 액체가 적은 세탁기는 남아 있는 세탁기보다 적은 횟수로 판재를 철저히 청소해야 한다. 구체적인 검사과에서 세탁기를 몇 번이나 써야 요구 사항을 충족시킬 수 있습니까? 다음과 같은 간단한 실험을 할 수 있습니다: 4×8 HBsAgELISA 패키지 판자를 선택하고, 2×8 구멍마다 같은 약한 양성 및 음성 샘플을 넣고, 테스트 키트 지침에 따라 효소 결합물을 넣어 부화를 완료합니다. 판구멍을 씻을 때 첫 번째 행 세척 1 회, 두 번째 배치 두 번, 세 번째 행 세 번-여덟 번째 행 여덟 번, 밑물 색감 측정. 세 번 세탁하면 발색은 변하지 않습니다. 즉, 세 번 세탁한 판공의 비색측정은 네 번, 다섯 번 세탁한 판공의 흡광도와 동일하며, 양수/음수 값은 최대값을 유지합니다.
여섯째, 색상 개발
현재 시중에서 판매되고 있는 HRP 를 표지효소로 하는 ELISA 테스트 키트 중 TMB 를 밑물로 하면 제공되는 밑물은 응용액 A 와 B 두 병이다. OPD 를 기질로 사용하는 경우 사용 전에 준비한 OPD 정제 또는 분말을 테스트 키트 제공합니다. 일반 시중 테스트 키트 발색 반응 조건은 37 C 또는 실온 15 ~ 30 분입니다. 이론적으로 HRP 의 기질 촉매 반응은 37 C 에서 30 분 이내에 완성될 수 있지만, 대부분의 촉매 반응은 초기 10 분 이내에 완성될 수 있다. 따라서 약한 양성 샘플의 구멍을 충분히 색칠하기 위해 37 C 에서 25 ~ 30 분 후에 반응 비색 측정을 종료하는 것이 좋습니다.
또한 밑물을 넣고 발색반응을 시작하기 전에 밑물 용액의 유효성을 검사하는 것이 좋다. 즉 깨끗한 빈 판구멍이나 eppendorf 튜브에 용액 A 와 용액 B 한 방울을 넣어 발색이 있는지, 있는 경우 밑물이 변질된 것을 관찰하는 것이 좋다. (데이비드 아셀, Northern Exposure (미국 TV 드라마), Northern Exposure (미국 TV 드라마) OPD 를 밑물로 한 후 무색이어야 합니다. 그렇지 않으면 사용할 수 없습니다. TMB 를 베이스로 하면 전체 색상 반응 과정은 빛을 피할 필요가 없고 OPD 를 베이스로 하면 빛을 피해야 한다. TMB 및 OPD 의 색상 반응 특성 및 고려 사항은 이전 섹션을 참조하십시오. 발색 반응이 완료되면 가산을 넣어 반응을 중단하고 고르게 섞은 후 다음과 같은 비색 측정이나 시각적 판단을 할 수 있다.
일곱, 비색
ELISA 의 비색계 측정은 효소 표지기로 진행됐다. 어떤 동료들은 효소 표지기로 한 이상 이때 무엇이든 할 수 있다고 생각할지도 모릅니다. 사실 아닙니다. 좀 더 선진적인 효소 표지기에는 많은 기능이 있기 때문에 잘못 사용하면 이해할 수 없는 결과를 얻을 수 있습니다. 예를 들어, 효소 표지로 색을 측정한 후, 많은 음성 측정공의 흡광도 값이 음성이거나 측정된 가짜 양성률이 크게 증가하였다. 이것은 주로 효소표계를 제대로 이해하고 사용하지 않았기 때문이다. 효소 표기기를 올바르게 이해하고 사용하는 방법에 대해서는 다음 관련 장을 참조하십시오. 여기서는 다음 두 가지 점만 강조합니다.
비색법 (1) 을 측정할 때는 효소 표지기의 파장이 잘 조절되었는지, 사용된 필터가 정확한지 주의해야 한다. 일부 임상 실험실에서는 효소 결합 면역 측정법이 TMB 테스트 키트 및 OPD 테스트 키트 (비색파장은 450nm, 후자는 492nm) 를 모두 사용하므로 필요에 따라 언제든지 필터를 교체해야 합니다. 따라서 광학 필터의 오용 문제가 발생하기 쉽다.
(2) 단일 파장 또는 이중 파장 비색 선택 문제. 중급 이상 효소 표지기는 기본적으로 단파장과 쌍파장 비색 기능을 모두 갖추고 있다. 단파장 비색 측정이란 일반적으로 색상 흡수가 가장 큰 파장 (예: 450nm 또는 492nm) 에서 이루어지며, 이중 파장 이색효소 측정기는 민감한 파장 (예: 450nm) 과 민감하지 않은 파장 (예: 630nm) 에서 한 번 측정됩니다 민감하지 않은 파장에서 측정하는 것은 파장을 특정 값으로 변경하여 샘플의 효소가 반응하는 특정 색상의 흡광도 값이 0 인 경우 측정된 흡광도는 더러움의 흡광도 값입니다. 마지막으로 효소 표지기는 민감한 파장의 흡광도 값과 민감하지 않은 파장의 흡광도 값의 차이를 제공합니다. 따라서 쌍파장 비색 측정은 비특이적 흡수, 지문, 스크래치, 먼지 등의 영향을 없애는 장점이 있다. 판자 자체와 견본이 판자 구멍에 있는 특정 색상의 흡광도를 측정하는데, 일반적으로 빈 구멍을 설정할 필요가 없다. 이중 파장 비색법을 사용할 때 빈 구멍을 설정하면 위에서 측정한 구멍의 흡광도가 음수인 현상이 발생할 수 있습니다. ELISA 의 단일 빈 구멍의 비특이적 흡수는 어느 정도 불확실성이 있기 때문에, 즉 매번 또는 동시에 다른 흡광도 값을 얻을 수 있기 때문에 ELISA 비색 측정은 이중 파장 비색법을 사용하는 것이 좋습니다.
여덟. 결과의 판단
측정 결과를 표현하는 방식에 따라 임상 ELISA 측정은 정성 측정과 정량 측정으로 나눌 수 있다. 정성은 표본에 검사할 항원이나 항체 포함 여부에 대한' 예' 또는' 아니오' 의 결론일 뿐 각각' 양성' 과' 음성' 으로 표시된다. 가시적 정성 측정은 일반적으로 특정 병원체 감염의 존재를 판단하기 위해 전염성 병원체 항원 또는 항체 결정에 사용됩니다. 정량 측정은 표본에서 검사할 항원 수에 대한 정량 측정으로, 특정 값으로 표현된다. 정량 측정은 기본적으로 호르몬, 세포인자, 종양 표지물, 소분자 약물 등과 같은 비 병원체 항원 물질의 측정에 사용된다. 현재 국내 임상에서 사용되는 ELISA 테스트 키트 대부분은 감염성 병원체 항원 또는 항체 정성 측정에 사용되고 있으며, 소수의 FP, hCG, 세포인자 정량 측정에 쓰인다. ELISA 정성 측정에서' 양성' 과' 양성' 의 결정은 테스트 키트 확정의 양성 측정치 (임계값) 를 기준으로 한다. 정량 측정의 "값" 은 테스트 키트 중 표준 물질을 동시에 측정하여 얻은 복용량-반응 곡선 (표준 곡선이라고도 함) 을 기준으로 합니다. ELISA 정성 및 정량 결과의 데이터 처리는 다음 전문 장에서 설명합니다. 여기서 강조하고 싶은 것은 ELISA 정성 측정의' 음성' 과' 양성' 결과는 테스트 키트 자체에서 측정한 임계치에 의해서만 판단될 수 있으며 보건부 임상검사센터에서 제공하는 약양성 가치 조절혈청을 사용할 수 없다는 점이다. 왜 이 점을 강조해야 합니까? 이는 주로 많은 기층 실험실이 부처센터에서 공급하는 약한 양성값 조절혈청 (과거' 임계치 혈청' 이라고도 함) 의 흡광도로 결과를 판단하고, 그 이상이면 양성으로 판정하고, 그렇지 않으면 음성으로 판단하고, 테스트 키트 임계치를 고려하지 않기 때문이다. 지금까지도 이런 잘못된 관행을 고수하는 실험실이 있다. 테스트 키트 임계치 수립은 일련의 과학실험과 통계학 연구 (참조) 를 바탕으로 한 것으로, 부서 센터에서 제공하는 약양성 가치 조절 혈청은 주로 임상 실험실의 실내 품질 관리에 사용된다.
다음으로, ELISA 질적 결과 결정에 일반적으로 사용되는 몇 가지 약어를 설명하겠습니다.
(1)S/CO: 여기서 s 는 샘플이나 표본의 약어로, 표본에 의해 결정된 흡광도 값을 나타내고 CO 는 마감 값의 약어입니다. 경쟁 억제법 외에 다른 ELISA 정성 측정 모드에서는 S/CO 값이 1 보다 크거나 같을 때 샘플이 양성이고 1 보다 작을 경우 음성입니다.
(2)S/N 또는 P/N: 여기서 S 는 동일 (1), N 은 음성대조의 줄임말, P 는 환자의 줄임말이다. 초기의 많은 테스트 키트 들은 S/N 또는 P/N≥2. 1 을 양성 기준으로 사용했으며, 일부 테스트 키트 들은 아직도 이 방법을 사용하고 있다. 이 방법은 S/CO 법과 본질적으로 다르지 않지만 전자는 음성 대비 (N) 의 2. 1 배를 임계값으로 사용합니다.
아홉. 결과 보고 및 해석
임상 ELISA 결과에 대한 보고서는 비교적 간단하다. 정성 측정은 음성 또는 양성일 수 있습니다. 정량 측정은 구체적인 수치를 보고한다. 결과의 해석은 훨씬 복잡하기 때문에 실험실 기술자가 테스트한 프로젝트에 대한 종합적인 지식 기반을 갖추어야 한다. 예를 들어 B 형 간' 2 반' 결과에 대한 해석은 검사자가 다른 결과 패턴의 임상적 의미를 알아야 할 뿐만 아니라 B 형 간 바이러스의 분자생물학, 분자 변이 및 표현형에 미치는 영향에 대해서도 더 깊이 이해해야 한다. 현재, 검사는 더 이상 단순한 실험실 측정이 아니라 임상 의학 분야, 즉 검사 의학이 되었으며, 이를 위해서는 의학 검사에 종사하는 검사 의사가 자신이 무엇을 하고 있는지 알아야 할 뿐만 아니라, 자신이 왜 해야 하는지 알아야 한다. 그렇지 않으면 반드시 시대에 탈락할 것이다.
요약하자면, ELISA 측정의 조작 단계는 간단하지만 측정 결과에 영향을 줄 수 있는 요인이 많은데, 특히 추가, 부화, 세탁판 등 측정 작업의 각 단계에 분포한다. 다음 표는 측정에서 발생할 수 있는 문제의 가능한 원인을 분석하고 찾는 데 도움이 되도록 일반적인 문제와 그 원인을 요약한 것입니다.
임상 ELISA 측정에서 발생할 수있는 문제와 원인
질문하다
가능한 원인 (키트 자체의 원인이 아님)
1. 약한 양성 품질 관리 샘플을 감지할 수 없습니다.
부화 시간 또는 온도가 충분하지 않습니다. 발색 반응 시간이 너무 짧습니다. 완충액을 만드는 데 사용되는 증류수에 문제가 있다.
2. 측정된 반복성 차이.
(같은 샘플의 두 가지 측정 결과가 일치하지 않음)
이것은 다음과 같은 측정 작업으로 인한 일반적인 문제입니다.
(1) 샘플 추가 및 테스트 복용량이 잘못되었습니다. 구멍과 구멍 간에 불일치가 있습니다.
(2) 추가 샘플이 너무 빨라서 구멍 사이에 오염이 발생합니다.
(3) 잘못된 샘플을 추가하십시오.
(4) 샘플과 시약 추가 시 구멍 벽 위에 추가되는 코팅되지 않은 영역
(5) 다른 로트 번호의 테스트 키트 구성 요소를 혼합한다.
(6) 부화 시간, 세탁판 및 발색 시간이 일치하지 않습니다.
(7) 구멍에서 오염 된 파편;
(8) 효소 표지자의 필터가 정확하지 않다.
(9) 혈청 샘플은 완전히 굳기 전에 첨가되며, 반응공 안에 섬유소 응고나 잔여 혈구가 나타나 위양성 반응이 생기기 쉽다.
3. 흰색 필기판
(양성 대조 비색)
(1) 누락 된 효소 복합체;
(2) 세척액의 배합에 문제가 있다. 예를 들면 양통이 깨끗하지 않고 효소 억제제 (예: 아질화물 나트륨) 가 함유되어 있다.
(3) 발색제 a 또는 b 를 생략한다.
(4) 종료제는 발색제로 쓰인다.
4. 모든 판구멍은 채색되어 있습니다.
(1) 세탁판이 깨끗하지 않습니다.
(2) 발색 용액 변성;
(3) 기질을 첨가하는 흡수는 효소에 의해 오염된다.
(4) 세정액이 효소로 오염되었다.