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HIV 핵산 검사를 위한 검출 기술

핵산 추출에는 마그네틱 비드(Magnetic Bead) 방식을 사용합니다.

1) 마그네틱 비드 추출 원리:

자성 비드에 핵산을 특이적으로 흡착하는 물질을 라벨링하여 핵산을 특이적으로 흡착하고, 용해물에서 바이러스 핵산을 추출합니다. 자기분리 기술을 통해 추출합니다.

2) 단계:

분해 - 흡착 - 세척 - 세척 - 세척 - 용출

3) 장점:

a. 비드 추출은 특이도가 높고, 검체 요인의 영향을 덜 받으며, 감도가 높습니다.

b. 자동화가 용이합니다.

4) 단점:

높습니다. 비용이 들고 특정 도구(반자동, 완전 자동)가 필요합니다.

b. 완전히 수동 작업이므로 작업량이 너무 많습니다. 중첩된 중합효소 연쇄 반응(nPCR) 프라이머는 HIV-1 gag.pol 및 env 유전자 서열을 기반으로 설계되었습니다. 말초혈액 단핵세포 용해물을 먼저 외부 프라이머로 증폭하고, 산물을 내부 프라이머로 증폭한 후 결과를 겔 전기영동으로 직접 결정합니다. nPCR의 민감도. 기존 PCR보다 100~1000배 높은 수준으로 HIV-1 감염자의 0.5fg 플라스미드 DNA와 50μ1 말초혈액 샘플에서 HIV 유전자를 검출할 수 있다.

전문 문헌에 따르면 이 방법으로 검사한 HIV-1 감염자 63명은 모두 양성 반응을 보였고, 건강한 사람과 의심자는 모두 음성 판정을 받아 추적 조사를 통해 HIV-1 감염에서 제외됐다. 항체 테스트.

nPCR은 매우 높은 민감도와 강한 특이도, 간편하고 쉬운 조작성을 갖춘 HIV-1 유전자 검출 기술임을 알 수 있다. 이는 이미 조기 진단 및 말초혈액 바이러스 함량 검출에 중요한 역할을 했으며 적용 가능성이 더 넓습니다.

검사의 장점

인간이 HIV에 감염된 후, 일반적으로 2~12주가 소요되며, HIV 항체가 검사실에서 검출될 때까지 평균 약 42일이 소요됩니다. 피. 이 기간 동안에는 기존의 검사 기술로는 HIV 바이러스를 전혀 검출할 수 없습니다. 이를 흔히 "HIV 창 기간"이라고 합니다. '창문기간'의 존재는 일부 환자가 일반 병원에서 수혈을 받은 후 에이즈에 감염되는 이유도 설명한다.

감염 과정에서 가장 먼저 나타나는 것은 PCR로 검출할 수 있는 바이러스 RNA이며, 그 다음에는 이중항원 샌드위치법으로 검출할 수 있는 IgM 항체가 나타난다. IgG 항체는 간접적인 방법을 사용하여 검출할 수 있습니다.

현재 시·도 질병관리본부와 테스트 스트립에서 사용하는 검출 방법은 모두 항체 항원을 검출하기 때문에 'HIV 창 기간' 인자의 간섭을 피할 수 없다. 따라서 기존의 테스트 기술은 HIV 창 기간 동안 큰 결함이 있습니다.