세포외낭 (EV) 은 세포가 방출하는 다양한 막구조의 소포 구조이며, 이 거품의 지름은 30 ~ 40nm 에서 8, 9um 까지 다양할 수 있다. 세포 외낭포는 서로 다른 아군을 가지고 있는데, 외래체는 현재 가장 핫한 아군이다.
하지만 지금은 매우 순수한 외래체의 하위 집합을 순수화하기가 어렵기 때문에 직경이 200nm 미만인 낭포를 순수화하기 때문에 점점 더 많은 사람들이 sEV (소세포 외낭) 라고 부르기 시작했다. 엄밀함을 위해서, 오늘도 우리는 이 막포를 세포외 거품이라고 부른다. 이 글에서 달리 명시하지 않는 한, 포외 소포는 주로 외분비체와 미낭을 가리킨다.
오늘 주요 내용은 포외 소포의 연구의 의미, 포외 소포의 분류, 포외 소포의 성분, 세포 배양 상청액의 제비, 포외 소포의 보존, 포외 소포의 검증을 위한 실험 요구 사항을 포함한다. 모든 내용은 현재 발표된 평론을 참고하여 장발명이 아니다. 그러니 새 친구에게 안심하고 공부하라고 하세요.
세포 외 소포의 연구 의의
현재 세포 외 소포의 기능은 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 보도에 따르면 이들은 숙주-병원체 상호 작용을 조절하고 감염성과 염성 질환, 신경계 질환, 암의 병리 과정에 참여할 수 있으며 정상적인 생리과정에서 세포 간 통신을 중개하는 데 중요한 역할을 한다고 한다. 보도에 따르면 세포외 소포는 발육에도 중요한 역할을 한다. 세포외 소포는 임상의학에서도 밝은 응용 전망을 가지고 있는데, 주로 풍부한 바이오마커를 함유하고 있어 임상 상태, 치료 반응, 질병 진전 등을 모니터링하는 데 사용할 수 있기 때문이다. 동시에, 그것들은 생체 분자를 전달하는 기능을 가지고 있기 때문에, 여전히 임상 약물 전달 전달체로 발전할 가능성이 있다.
세포 외 소포의 분류
세포 외 거품-국제 세포 외 거품 학회 (ISEV) 가 만든 용어. 소포는 생합성이나 방출 경로에 따라 분류할 수 있다. 외분비체 직경은 30- 150nm 으로, 포삼작용에서 유래한 것으로 밀도가 약1.1/Kloc-0-0 이다 미세먼지/버블은 질량막에서 직접 방출되며 지름은 약100-1000nm 입니다. 시들어 떨어지는 소체/여과포의 지름은 약 50nm-2μm 로 시들어 죽는다. 종양 소포 지름은 약 1- 10μm 으로 종양 세포 방출로 인해 발생합니다. 그리고 다양한 다른 EV 하위 그룹. EV 하위 그룹의 크기와 포함된 생체 분자의 차이로 인해 여러 그룹이 EV 하위 그룹의 구성을 특성화하기 시작했습니다. 최근 논문에 따르면, 일반적인 표면단백체학 분석이나 개인 EV 집단의 전사스펙트럼에 근거하여 세포외낭포가 성공적으로 하위 그룹으로 분류되었다고 한다. 현재, 서로 다른 세포 외 낭포 서브 세트는 차동 원심 분리, 여과, 면역 친화력, 크로마토 그래피, 유동 세포 분리, 밀도 구배 원심 분리 등 다양한 수단을 통해 대략적으로 분리 될 수 있습니다. 그러나 이러한 방법은 특정 하위 집합을 완전히 정제할 수 없으며, 분리된 하위 집합은 일반적으로 다른 세포 외낭 하위 집합이 풍부합니다.
세포 외 소포에 포함된 성분.
세포 외낭 거품의 성분은 무작위가 아니며, 각 세포 외낭 거품은 특정 분자 정보를 가지고 있다. 사실, 이 나노 크기의 세포 외낭포는 단백질, 지질, 핵산, 설탕과 같은 생체 활성 분자를 가지고 세포 간에 신호를 전달할 수 있으며, 그 포장의 독특한 분자 구성은 수용체 세포로 전달될 세포 외 신호의 유형을 결정합니다. 세포 밖의 작은 거품에 들어갈 수 있는 분자를 결정하는 복잡한 분류 시스템이 있다.
세포 배양 상등액의 제조
현재 세포 배양 상청액을 준비하는 두 가지 전략이 있어 포외 소포를 추출하는 데 쓰인다. 세포는 세포 외낭포를 제거하는 태우혈청 (FBS) 배양기에서 배양되고, 세포 (혈청 기아세포) 는 FBS 를 함유하지 않는 배양기에서 배양된다. 그러나 현재 일부 높은 수준의 문장 들은 보통 이전 방법을 채택한다. 또 세포 외낭포를 제거한 태우혈청에서 RNA 가 실험 결과에 미치는 영향에 대해 문장 주목하기 시작했지만 아직 이해가 되지 않았다. 먼저 배양상청액을 보존한 다음 세포 외낭 분리에 사용해야 한다면, 시스템에서 죽은 세포와 세포 조각을 미리 제거해야 한다.
세포 외 소포의 보존
L? Rincz 등은 호중구의 세포 외낭포를 다양한 조건에서 저장해 두었다가 이들 소포의 특성을 분석했다. 그들은 세포 외낭 샘플의 소포 수와 모양이 크게 변하지 않았지만 -20 도 또는 -80 도에 저장된 세포 외낭 거품도 포스파티딜세린의 외반을 크게 증가시킨다는 것을 발견했다. 그러나 그들은 또한 소변에서 유래 된 세포 외 거품에 이러한 변화가 없다는 것을 발견했습니다. 칼라 등은 대장암 세포에서 포외 소포를 분리해 다양한 조건에서 일정 시간을 유지한 뒤 PKH67 염색으로 포외 소포의 섭취를 추적한다. 이 소포들은 여전히 세포에 흡수될 수 있다는 것을 발견했다. 현재 상황으로 볼 때 학자들은 저장 조건이 포외 소포에 영향을 미치는지 여부에 대해 아직 합의를 보지 못했다. 따라서 가능한 한 빨리 세포 외낭포를 분리하여 실험에 사용하여 저장 과정을 최소화하는 것이 좋습니다.
세포 외 소포의 동정 및 실험 요구 사항
국제세포외낭포협회 20 14 가 출간한 안내 책자 (MISEV) 에 따르면 WB 를 통해 샘플에 세포외낭포의 표지단백질이 있는지 확인하고, 전경을 통해 샘플 중 세포외낭포의 형태 특징을 관찰하고, 집단 특징 (입자 농도, 지름 분포 등) 을 분석해야 한다. ) 세포 외 소포의 방법.
오늘은 여기까지입니다. 생물학 연구의 새로운 분야로서 세포 외낭 거품 분야는 학자와 생물회사의 관심을 받아 점점 더 많은 연구 보고서를 내놓고 있다. 하지만 우리는 이 방면의 연구 기술이 아직 완벽하지 않고, 포외 소포에 대한 인식이 아직 부족하고, 포외 소포에 대한 연구가 아직 초기 단계에 있으며, 아직 갈 길이 멀다는 것을 깨달아야 한다.