응고 기능 패키지에는 PT, TT, APTT, FIB 이상이 포함되어 있습니다. 일부 대형 병원에서는 PT의 표준화를 보장하기 위해 국제 민감도 지수(ISI)도 추가합니다. 측정 방법에는 수동 방법, 반자동, 완전 자동 등이 있습니다. 필요한 방법은 현재 조건과 일치해야 합니다. Yazhong, Jinyu 등 시약 전문 제조업체가 있으며 공식 웹사이트도 많이 있습니다. 및 바이두에서 확인할 수 있는 내용 ~ 다음은 참고용입니다. 프로트롬빈 시간(PT)의 권장 방법
[원리]
조직 트롬보플라스틴(주로 조직 인자와 지질 함유)을 나눕니다. )과 칼슘이온을 구연산항응고혈장에 첨가하여 37℃에서 배양한 후 혈장응고시간인 PT를 측정한다. PT는 주로 요인 VII, II, V, X 및 외인성 응고 시스템의 관련 요인의 억제제를 선별하고 검출하는 데 사용됩니다.
[검체 채취 및 처리]
1. 검체 채취 : 실리콘 또는 플라스틱 주사기를 이용하여 공복 정맥혈을 채취하고, 0.109mol/L를 함유한 유자를 9의 비율로 첨가한다. :1 나트륨산항응고제를 실리콘 또는 플라스틱 시험관에 넣고 가볍게 섞습니다.
2. 검체 처리 : 2000~2500g에서 15분간 원심분리하여 혈소판이 부족한 혈장을 분리하고, 24시간 이내에 검사를 완료합니다.
3. 정상대조혈장 : 18~45세의 정상적이고 건강한 남녀 10명 이상을 선발한다. 단, 임신, 월경 중, 수유 중인 여성, 경구 피임약을 복용 중인 여성은 사용할 수 없습니다. 수집된 혈장은 동결건조하거나 -80°C에서 보관해야 합니다.
[시약]
1. 항응고제: 109mmol/L 구연산나트륨 용액(수정수 2분자를 함유한 32g/L 구연산나트륨에 해당).
2. 트롬보플라스틴 시약: 시중에서 판매되는 제품에는 ISI, 배치 번호 및 유효 기간이 표시되어야 합니다. 동결건조된 제품은 지침에 따라 지정된 완충 희석제로 재구성해야 합니다.
3. 염화칼슘(CaCl2) 용액: 25mmol/L. (현재 일부 시판 시약에는 트롬보플라스틴 용액과 염화칼슘 용액이 혼합되어 있어 추가로 CaCl2 용액을 준비할 필요가 없습니다.)
4. 품질관리 물질 : 정상 및 비정상 대조 혈장
5. 시약 제조에 사용되는 물은 순수 1급 기준에 적합해야 합니다.
[악기]
1. 수동 방법: 스톱워치, 항온 수조 또는 전기 가열 블록을 37℃±1℃로 유지합니다. 수심은 시험관을 3cm 이상 담글 수 있으며, 10×mm 면봉관은 표면에 흠집이 없습니다. 표준 0.1mL 피펫. 수정된 스톱워치.
2. 기기 방법: 지침에 따라 다양한 자동 또는 반자동 응고 측정기를 작동합니다.
[조작 단계]
1. 수동 방법
(1) 측정 온도는 36.5~38.5℃ 입니다. 이 온도까지 예열되지만 트롬보플라스틴 시약의 예열은 30분을 초과해서는 안 되며, 혈장의 예열은 일반적으로 10분을 초과하면 안 됩니다.
(2) 플라즈마와 접촉하는 모든 시험관, 시료 주입기 및 기타 장비는 플라스틱 또는 실리콘 처리된 유리관입니다.
(3) 구연산 항응고제 혈장 0.1mL를 채취하여 작은 시험관에 첨가합니다. 트롬보플라스틴 시약 0.1mL를 첨가하고 잘 섞은 후 37°C 수조에 넣습니다. 그런 다음 25mmol/L CaCl2 용액 0.1mL를 추가합니다(동량의 트롬보플라스틴 시약과 CaCl2 용액을 먼저 혼합하고 0.2mL를 추가할 수도 있음). 즉시 혼합하고 스톱워치를 시작하십시오. 시험관이 여전히 수조에 잠겨 있으면 약 10초 동안 수조에서 꺼내어 시험관 외부의 물방울을 거즈로 계속 기울여 닦아냅니다. 밝은 곳에 튜브를 놓고 흐르는 상태에서 누출이 있는지 관찰하십시오. 피브린이 보이면(액체 흐름이 느려짐) 즉시 시계를 멈추고 시간을 기록하십시오. 매번 두 개의 튜브를 측정하고 평균으로 보고합니다. 이 시험에서 최종 혼합물의 pH는 7.2~7.3이어야 합니다. 대부분의 상업용 트롬보플라스틴 시약은 완충액 함유 용액으로 준비됩니다.
(4) 각 배치별로 정상 및 비정상 관리를 동시에 실시해야 하며 방법은 시험편과 정확히 동일해야 한다.
[보고 방법]
1. PT의 초(S) 단위로 보고(가장 0.5초)
2. 환자 혈장에서 보고 /정상 대조군 PT(S) 비율(PRT)이 보고됩니다.
3. 경구 와파린 항응고제 치료를 모니터링할 때 국제표준화비율(INR)을 보고해야 합니다. 대부분의 자동화 기기는 트롬보플라스틴 시약의 측정된 PTR 및 ISI를 기반으로 INR을 자동으로 계산할 수 있습니다. 수동 방법은 다음 공식에 따라 계산기를 사용하여 직접 계산할 수 있습니다.
Poller는 간단한 노모그램을 설계했습니다. PTR 및 ISI 값을 얻은 후 그래프에서 INR 값을 직접 찾을 수 있습니다. 매우 편리하며 중국에서도 도입되었습니다.
ICSH 규정에서는 더 이상 희석 곡선이나 백분율(활동) 보고를 사용하지 않습니다.
[기준값]
기구/시약의 종류에 따라 결과가 다르기 때문에 기준값을 일률적으로 규정하기는 어렵습니다. 각 실험실은 건강한 사람 그룹을 독립적으로 측정하고 자체 장비, 시약 및 기타 조건을 기반으로 참조 값을 설정해야 합니다. 그 후에는 최소한 1년에 한 번 또는 조건이 변경되면 새로운 조건에 따라 재설정되어야 합니다. 기준값 PT 측정을 위한 모든 조건은 환자의 혈장 PT 측정 조건(채혈, 용기, 항응고제 등 포함)과 동일해야 합니다. 건강한 헌혈자는 18~55세 남성과 임신 또는 월경 중이 아닌 여성 중에서 최소 20명을 선정해야 하며, 개인차를 줄이기 위해 약을 복용하지 않고 차분하고 안정한 상태에서 채혈해야 합니다. 사람과 어린이는 별도로 통계를 테스트할 수 있습니다. 동시에, 채혈과 측정을 며칠씩 분리하여 일상적인 차이를 줄여야 합니다. 측정 결과는 통계적으로 처리되고 표준 편차가 계산됩니다. 2개의 표준 편차(2SD) 또는 95% 신뢰 한계가 참조 범위로 사용됩니다. 세 가지 표준편차가 정상인지 비정상인지는 구체적인 상황에 따라 평가해야 합니다. 통계적으로 볼 때, 이들 중 일부는 정상입니다. 위의 기준을 사용하면 환자(PT 이상)를 놓치는 경우가 거의 없습니다.
3. 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT)의 표준화
(1) 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT)의 표준화
APTT는 검출을 위한 선별 검사입니다. 내인성 응고 시스템의 응고 인자 결함 및 관련 억제제도 현재 응고 인자, 헤파린 항응고 요법 및 루푸스 항응고 물질을 검출하는 주요 수단입니다.
PT 분석과 마찬가지로 다양한 부분 트롬보플라스틴, 다양한 활성화제, 다양한 활성화 시간은 다양한 응고인자 결핍증, 헤파린, 루푸스항응고제에 대한 민감도가 매우 다릅니다. 예를 들어, APTT 검출용 시약에 사용되는 다양한 활성화제(카올린, 규조토, 엘라그산)는 헤파린, 루푸스 항응고 물질, 인자 VIII 및 IX를 검출하는 데 서로 다른 민감도를 갖습니다.
현재까지 ICSH와 ICTH는 APTT 검출 방법이나 시약을 표준화하기 위한 실행 가능한 계획을 아직 마련하지 못했습니다. NCCLS만이 1992년에 H29-T라는 임시 계획을 제안했습니다.
(2) 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT) 권장 방법
[원리]
혈장에 인지질 및 활성화제를 첨가 배양 후 적절한 농도를 첨가 칼슘 이온의. 섬유소 응고가 형성되는 시간(초)이 APTT입니다. 이 방법은 주로 인자 VII, XI, VIII, IX, 칼리크레인(PK), 고분자량 키니노겐(HMWK) 및 피브리노겐과 같은 내인성 경로 응고 인자의 결함을 선별하고 결정하는 데 사용됩니다. 이는 또한 위 인자의 억제제 결정, 헤파린 치료 모니터링 및 루푸스항응고인자 검사에도 사용됩니다.
[기기]
본 실험에 사용된 기기 및 장비(채혈, 혈액 보관 용기, 샘플링 장치 및 검체 처리 등 포함) 및 요구 사항은 완전히 동일합니다. PT로. PT에서 사용되는 자동화 기기도 이 실험에 적합합니다.
[시약]
1. 부분 트롬보플라스틴 시약: 상용 제품으로 공급됩니다. 일반적으로 일반적으로 사용되는 활성화제는 활성화제와 함께 비율에 따라(또는 별도로) 제조됩니다. 일반적으로 사용되는 활성화제는 규조토(상품명: Celite), 백토, 실리카 입자, 탄닌산(엘라그산) 또는 기타 사용 가능한 활성화제입니다. 공장에서 제공하는 에이전트입니다.
APTT 시약/기기 조합은 인자 VIII, IX 또는 XI 활성이 0.3μ/mL(또는 <30%) 미만인 혈장에서 비정상적으로 장기간 결과를 생성할 수 있어야 합니다.
2. 염화칼슘 용액(25mmol/L) 및 기타 시약은 PT에서 사용하는 것과 동일하다.
[작업 단계]
1. 시료의 채취, 보관, 운송은 PT 측정과 동일합니다.
혈액을 수집하고 보관하려면 깨끗한 플라스틱 또는 실리콘 처리된 유리 혈액 수집 장치를 사용해야 합니다.
2. 검체(혈소판 결핍 혈장)의 준비는 PT와 동일합니다. 분석에는 혈소판이 고갈된 혈장을 사용해야 합니다.
3. 수조나 전열판의 온도는 37℃±1℃ 입니다.
4. 접촉 활성화 시간: 인자 XII를 활성화하기 위해 활성화제를 추가하는 시간은 각 기기 및 시약 제조업체의 규정이 다를 수 있으므로 지침을 엄격히 따라야 합니다. 수동으로 작동할 때는 스톱워치나 유사한 시간 측정 장치를 사용하십시오.
5. 작동: 미리 예열된(30분 이내) APTT 시약 한 부분과 미리 예열된(10분 이내) 테스트 혈장 한 부분을 혼합하고, 다음이 될 때까지 즉시 스톱워치를 시작합니다. 지정된 접촉 활성화 시간이 끝나면 미리 37°C로 예열된 CaCl2 용액 일부를 추가하고 잘 섞은 다음 동시에 스톱워치를 시작합니다. 혈장 응고가 발생하면 시계를 멈추고 혈장 응고 시간(초)을 기록하십시오. 수동 측정 중에는 두 개의 튜브를 동시에 측정하고 평균값으로 보고해야 합니다. 정밀도가 크게 향상된 일부 자동 또는 반자동 응고계는 적절한 품질 관리 표준이 있는 경우 한 번만 측정할 수 있습니다. 정상 및 비정상 대조 혈장을 동시에 측정해야 합니다. 죄송해요 TT가 못찾았는데, 권위있는 제조사에 문의해보시면 제가 직접 찾을 필요는 없을 것 같아요~