대장균에서 목적 유전자의 표현에 영향을 미치는 요인은 무엇입니까?
추천 답변 (1) 외인성 유전자의 사본 수
(2) 외인성 유전자의 발현 효율
① 프로모터 강도
효과적인 ② 리보솜 결합 부위의 성별
③SD 시퀀스와 시작 코돈 ATG 거리
④ 코돈
⑶ 제품의 안정성을 표현했다.
(4) 세포 대사 부하
⑸ 엔지니어링 박테리아 배양 조건
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목적 유전자가 식물의 뿌리와 뿌리 세포 밖에서 분비를 표현하는 전달체를 세우다. 단계 수: 842 보너스 포인트: 20 | 문제 해결.
시간: 2009 년 2 월-14 09: 13 | 질문자: 370 629 225
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식물 유전자 전환의 궁극적인 목적은 특정 외원 유전자의 식물 표현 전달체를 만들어 수용체 식물로 옮기는 것이 아니다. 이상적인 유전자 변형 식물은 일반적으로 외원 유전자가 특정 장소와 특정 시간에 높은 수준으로 표현되어야 하며, 사람들은 표현형 특성을 기대하고 있다. 하지만 최근 20 년 동안 비효율적이고, 표현 산물이 불안정하며, 심지어 유전자 불활 또는 침묵으로 인해 유전자 변형 식물의 외원 유전자가 수용체 식물에 실용화되지 않는 경우가 많다. 또한 유전자 변형 식물의 안전성은 유전자 변형 식물의 꽃가루 전파와 같은 여러 나라의 관심을 불러일으켰으며, 항생제 선택 표시 유전자는 일부 항생제를 임상적으로 무용지물로 만들 수 있습니다. 이런 하이테크 식물 유전자 공학의 출현은 전례 없는 시기에 이 문제를 괴롭히고 있다. 이러한 문제를 해결하기 위해 최근 몇 년 동안 사람들은 유전자 변형 기술을 재배하고 다양한 식물 표현 수단을 탐구했다. 개선과 최적화는 가장 중요한 내용 중 하나입니다. 이 글의 진전을 총결하였다.
외원 유전자 표현 수준의 1 시동자의 선택과 전환은 종종 유전자 변형 식물이 이상적이지 않은 중요한 원인이다. 프로모터는 유전자 발현에서 중요한 역할을 한다. 따라서 적절한 식물 시동자를 선택하여 활성화를 높이는 것은 외원 유전자 표현을 높이는 데 가장 먼저 고려해야 할 문제이다.
이 식물 표현 전달체에서 널리 사용되는 프로모터는 구성형 프로모터입니다. 예를 들어, 대부분의 쌍자엽 식물에서 사용하는 CaMV35S 프로모터, 단엽식물에서 사용하는 범소 프로모터, 벼에서 사용하는 Actinl 프로모터가 있습니다. 외원 유전자는 프로모터의 통제하에 있으며, 이 요소들에서 표현되며, 유전자 변형 식물의 모든 부분과 모든 발육 단계에서 표현된다. 하지만 수용체 식물에서의 외원 유전자의 표현은 낭비를 초래할 뿐만 아니라 식물의 형태 변화를 일으켜 식물의 성장과 발육에 영향을 미치는 경우가 많다. 식물의 역할을 효과적으로 발휘하면서 식물의 나쁜 영향을 줄이기 위해, 특이하게 시동자를 표현하는 외원 유전자의 연구와 응용이 점점 더 중시되고 있다. 장기 특이성 프로모터를 포함한 이성 프로모터가 이성 프로모터를 유도하는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어 종자 특이성 프로모터, 과일특이성 프로모터, 엽육세포 특이성 프로모터, 뿌리특이성 프로모터 파괴, 화학유도 이성 프로모터의 광유도 이성 프로모터, 열충격 유도 이성 프로모터 등이 있다. 특이한 시동자의 복제는 식물에서의 외원 유전자 표현의 기초를 다졌다. 예를 들어 스위스의 CIBA- 게이키 PR-IA 프로모터는 유전자 변형 담배에서 Bt 독소 유전자의 표현을 통제하고, 살리실산과 그 파생물을 유도해 알코올 살포를 유도하고, 값싸고 오염되지 않고, 저항성 유전자 발현을 유도하는 해충이 이번 시즌에 다시 발생하도록 유도하는 것은 매우 효과적인 방법이다.
식물 유전자 변형 연구에서 만족스러운 결과를 얻지 못하는 경우가 많은데, 특히 천연 시동자를 이용한 특이성 표현과 유도 표현에서는 표현 수준이 대부분 만족스럽지 못하다. 기존 시작을 수정하시겠습니까? 하위 시공 복합 시동은 매우 중요한 방법이 될 것이다. 예를 들어, Ni 의 전사 활성화 영역인 문어알칼리 합성효소 유전자와 단로알칼리 합성효소 유전자의 시동자 등이 있다. GUS 표현의 결과, 손질된 프로모터의 활성성이 35S 프로모터의 활성성보다 현저히 높아진 것으로 나타났다. 오서 등은 유도형 PI-II 유전자 프로모터의 벼 Actinl 인트론 조합을 조작하여 새로 표현한 프로모터의 활성화를 거의 10 배 (특허) 높였다. 식물 유전공학 연구에서 이런 인공합성의 시작은 중요한 역할을 했다.
외원 유전자 번역의 효율을 높이기 위해 벡터를 구축하는 것은 일반적으로 유전자 변형이며, 주로 세 가지 측면을 고려한다.
2. 1 번역 효율성 향상 5'-? 3 '- 비번역 시퀀스
많은 실험에서 진핵 유전자의 5'-3'- 비번역 서열 (UTR) 의 정상적인 표현이 필요하며, 이 지역 mRNA 의 안정성과 번역 수준은 종종 현저히 떨어지는 것으로 나타났다. 예를 들어 담배 꽃잎바이러스 (TMV) 126 kda 단백질 유전자의 번역 시작 지점 상류는 68bp 의 뉴클레오티드 오메가 요소로 이루어져 있으며, 새로운 리보솜 결합점을 제공하여 Gus 유전자의 번역 활성화를 수십 배로 높인다. 외원 유전자의 5'- 끝에는 오메가 번역 강화자 서열이 많이 있다. Ingelbrecht 는 이미 연구한 각종 유전자의 3'- 말단 서열을 설명하고 낙지 알칼리 합성효소 유전자의 3'- 말단 서열이 NPTII 유전자의 순간적인 표현을 20 배 이상 증가시킨 것으로 밝혀졌다. 또한 유전자별 유전자 표현 향상 효율성은 유전자 표현 촉진에 있어 다르다. 예를 들어 RBCs 3'- 말단 서열의 3'- 말단 서열은 3'- 말단 찰론 효소 유전자의 60 배 이상이다.
2.2 시작 코돈 주위의 시퀀스 최적화
시작 코돈은 생물권에서 흔히 볼 수 있지만, 서로 다른 생물원의 유전자는 모두 특수한 외부 시작 코돈 서열을 가지고 있다. 예를 들어, 식물 시작 코돈 주위의 시퀀스의 일반적인 특징은 AACCAUGC 이며, 동물 시작 코돈 주위의 시퀀스 CACCAUG 는 원핵 생물의 시퀀스와 매우 다릅니다. 코삭은 ATG 인접 부위 돌연변이의 역할, 시작 암호의 전사 및 번역에 대해 상세히 연구한 결과, ACCATGG 주변에서 가장 효과적인 서열이 진핵 생물에서의 변환과 번역, 특히 -3 A 의 진입 효율성이 매우 중요하다고 결론 내렸습니다. 구매한 시퀀스를 코삭 시퀀스라고 하며, 캐리어를 표현하는 데 사용됩니다. 예를 들어, 세균 키틴 효소 유전자의 표현 수준과 원래의 시작 코돈 주위의 시퀀스 UUUAUGG 는 담배에 8 배 증가했다. 따라서 비식물원의 유전자 구성체를 사용하는 표현 전달체는 변환 중인 식물의 시작 코돈 주변 시퀀스의 특징을 기반으로 해야 합니다.
2.3 유전자의 코딩 영역은 전환이다.
외원 유전자가 원핵 생물에서 나온 것이라면, 표현 메커니즘의 차이로 인해 식물에서의 표현 수준은 종종 매우 낮다. 예를 들어, 소운금나물 야생형 살충단백질 유전자는 식물에서 매우 낮은 표현을 한다. 원핵 생물과 식물 유전자 mRNA 안정성의 차이를 발견한 것은 감소로 인한 것이다. 맹산도회사 Perlak 의 전제하에 아미노산 서열이 변하지 않는 독단백질, 살충단백질의 유전자 변환, 식물의 코돈 선택, GC 함량, 원서열에서 mRNA 안정성에 영향을 미치는 원소를 제거한 결과, 유전자 변형 식물에서 독단백질의 표현량이 30 ~ 100 배 증가했다.
셋；삼；3
위치 효과를 제거하고 소스 유전자를 제거한 후, 수용체 식물은 일반적으로 유전자 변형 식물에 따라 매우 다른 표현 수준을 가지고 있다. 이것은 외원 유전자가 수용체 식물 게놈에서 주로 다른 삽입 부위를 가지고 있는 결과이다. 이것은 소위 "위치 효과" 입니다. 위치 효과를 없애기 위해 외원 유전자는 식물 게놈이 활성 영역을 전사하는 표현 전달체이다. 현재의 구축 전략은 일반적으로 핵 매트릭스 결합 영역의 통합과 고정 소수점 통합 기술을 고려합니다.
핵 기질 결합 영역 (MAR) 은 진핵 세포 염색질 핵 기질의 특정 부분을 결합한 DNA 서열이다. 일반적으로 MAR 시퀀스는 활성 DNA 를 전사하는 고리 구조에 위치하며, 이는 분할 기능을 만들어 각 전사 단위가 주변 염색질의 영향을 받아 상대적으로 독립적인 경계를 유지하도록 하는 역할을 합니다. 본 연구에 따르면 MAR 양측에 MAR 유전자가 들어 있는 구조유전을 식물 표현 벡터에 필요한 유전자 구성으로 전환함으로써 목적 유전자의 표현 수준을 크게 높이고 유전자 변형 식물 간의 표현 수준 차이를 줄이며 효과의 위치를 낮출 수 있는 것으로 나타났다. 예를 들어 Allen 등은 이원 MAR (효모에서) 과 동원 MAR (담배에서) Gus 유전자의 담배 표현을 연구한 결과 효모 MAR 이 유전자 변형 표현의 평균 수준을 12 배로 높이고 담배 MAR 자체는 유전자 변형 표현의 평균 수준을 60 배로 높일 수 있다는 사실을 발견했다. MAR 의 닭 리소자임 유전자도 같은 역할을 할 수 있습니다.
또 다른 실행 가능한 방법은 사이트 지향 통합 기술을 사용하는 것입니다. 이 기술의 주요 원리는 벡터 숙주 염색체를 개조하여 외원 유전자의 동원을 통해 특정 DNA 조각의 동원영역을 염색체에 통합하는 것이다. 사실, 식물 발현 벡터는 첫 번째 분리 염색체 전사 활성 영역의 DNA 단편일 때 구축된다. 동원재조합 미생물의 표적 통합은 이미 일반적인 유전자 조작이 되었으며, 식물 중외원유전자의 엽록체 표현 전달체도 동물의 체내에서 성공적으로 통합되었지만 핵변환 방법의 표적 외원 통합 성공 사례는 적다.
엽록체 발현 벡터의 제작
외인성 핵 변환은 종종 유전자 발현을 극복하기 위한 것이다. 핵 유전자 꽃가루 전파의 위치 효과와 같은 안전하지 않은 성행위 문제로 최근 몇 년 사이에 등장한 새로운 유전자 변형 기술인 엽록체 전환은 그 장점과 발전 전망으로 점점 더 인정받고 있다. 지금까지 5 종의 엽록체 전환 담배, 벼, 의남, 감자, 유채 (후병카이 등) 가 발표됐다. ), 이로 인해 이 변환 기술은 식물 유전자 공학의 새로운 성장점이 되었다.
다양한 식물 엽록체 게놈 서열의 외원 유전자 포인트가 엽록체 게놈에 통합되어 동원구조 조정 메커니즘을 위한 토대를 마련했으며, 현재 구축되고 있는 엽록체 표현 전달체는 기본적으로 특정 사이트의 통합 전달체에 속한다. 엽록체 표현 전달체의 구축은 기본적으로 인스턴스 전달체이다. 엽록체 표현 벡터를 생성하는 범용 외원 유전자의 표현 상자. 각 연결 시기의 엽록체 DNA 서열의 양면을 동원재조합 조각 또는 위치 조각 (방향 조각) 이라고 합니다. 벡터가 엽록체에 도입될 때, 두 조각은 엽록체 게놈에서 같은 동원재조합 조각을 가지고 있는데, 이는 외원 유전자가 엽록체 게놈에 통합되는 특이한 장소이다. 작물 개량을 목적으로 엽록체 전환은 동원재구성이 필요하며, 외원 유전자를 삽입한 엽록체 게놈의 원래 서열은 손실되지 않으며, 원시 유전자의 삽입 지점도 파괴하지 않는다. (알버트 아인슈타인, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 농작물 개량명언) 이러한 요구 사항을 충족하기 위해 기존 작업은 rbcL 유전자/ACCD 1 6 STRNV/RPSL2PS7 PSBA 유전자/변형1,RPS7 지정된 외원 유전자가 동원재구성된 후 인접한 두 개의 유전자 구간을 삽입하여 유전자의 원래 기능이 영향을 받지 않도록 합니다. 최근 Daniel 등은 담배 엽록체 게놈 tRNA 와 trnI 의 동원재조합 조각을 이용해 * * * 같은 벡터 (universal vector) 를 구축했다. 고등식물에서는 tRNA 와 trnI DNA 서열이 매우 보수적이기 때문에 저자는 이 전달체를 각종 식물의 엽록체 전환에 사용할 것을 제안한다. 만약 이 전달체의 공통성이 증명된다면, 이 작업은 의심할 여지 없이 새롭고 편리하고 실용적인 엽록체 표현 전달체를 구축하는 좋은 생각이다.
엽록체 게놈에 통합된 외원 유전자의 표현은 종종 엽록체 게놈의 높은 사본 수 때문이다. 첫 번째 예에서 McBride 등은 Bt 의 cryIA(c) 독소 유전자를 담배 엽록체 BT 독소 단백질의 잎에 도입한 효율은 3 ~ 5% 에 달하지만, 전형적인 핵변환 기술은 0.00 1% 에서 0.6% 의 총단백질 표현만 실현할 수 있다. 최근 Kota Kinna 에서 Bt Cry2Aa2 유전자가 담배 엽록체에 도입되었다. 담배 잎 중독성 단백질의 표현량은 수용성 단백질의 2 ~ 3% 를 차지하며 핵전환보다 20 ~ 30 배 높은 것으로 나타났다. 유전자 변형 담배는 민감성충에 내성이 있을 뿐만 아니라 고항충도 죽였다. Staub 은 최근 담배 엽록체를 도입한 사람의 성장호르몬 유전자 표현량이 엽단백질의 7% 로 핵전환법의 300 여배에 달한다고 보도했다. 이 실험들은 엽록체 표현 전달체를 충분히 구축하고 변형시켜 외원 유전자의 높은 수준 표현을 실현하는 중요한 방법이다.
5 위치 신호 응용 프로그램
상술한 전달체 최적화 전략의 주요 목적은 외원 유전자의 전사와 번역 효율을 높이는 것이다. 하지만 외원단백질이 식물 세포에서 높은 수준의 표현을 안정시킬 수 있을지는 식물의 유전적 변화의 축적을 고려해야 한다.
최근 연구에 따르면, 어떤 외원 유전자가 연결된 신호 서열에 제대로 배치되면, 그 외원 단백질은 엽록체, 내질망, 액포 등과 같은 세포의 특정 부위로 전달될 수 있는 것으로 나타났다. , 시스템의 안정성과 외원 단백질의 축적을 크게 향상시킬 수 있다. 이것은 특정 지역 때문입니까? 일부 외원단백질의 내질망은 비교적 안정적인 환경을 제공하여 외원단백질의 분해를 효과적으로 막을 수 있다. 예를 들어, Wong 등의 의남 의남 Rubisco 아기의 중계 펩타이드 서열이 특수 살충단백질이 있는 유전자 변형 담배 엽록체에 축적된 살충단백질 유전자와 연결되기 전에, 외원단백질의 총 축적은 대조군보다 10 ~ 20 배 높았다. 최근 양야, 왕송여원의 rbcS 야기 중계 펩타이드 서열은 전 PHB 합성 유전자와 연결되어 유전자 산물을 유전자 변형 유채 종질에 축적해 외원 단백질 함량을 늘리려 했다. , Wandelt 와 Stern 연쇄 내질망은 외원 단백질 유전자의 서열 (4 펩티드 KDEL 의 코딩 서열) 이 유전자 변형 식물의 중외 소스 단백질 함량을 크게 높였다는 것을 발견했다. 위치 신호는 단백질 축적에 긍정적인 역할을 하지만, 동일한 위치 신호가 모든 단백질에 적용되는지 여부는 더 확정해야 한다.
6 인트론 강화 유전자 발현 인트론 강화 유전자 발현. Callis 등은 먼저 유전자 변형 옥수수를 발견했다. 옥수수 에탄올 탈수효소 유전자 (ADHL) 의 첫 번째 인트론 (인트론 1) 은 외원 유전자의 표현을 크게 향상시키고, 인트론 9 와 같은 다른 인트론도 어느 정도 촉진 작용을 한다. 이후 vasil Lev 도 첫 번째 인트론을 발견했고, 옥수수 과당 합성효소 유전자 CAT 의 표현 수준은 10 배 증가했다. 세 번째 인트론, 벼근동단백질 유전자, 2? 보고 유전자의 발현 수준은 6 배 증가했다. 대추 인트론이 유전자 표현을 강화하는 메커니즘은 아직 명확하지 않지만, 인트론의 존재는 가공효율과 mRNA 안정성을 높일 수 있다고 생각하는 경우가 많다. Tanaka 등 유전자 표현에 대한 인트론의 증강작용이 주로 단자엽식물과 쌍자엽식물에서 발생하며 눈에 띄지 않는다는 연구결과가 나왔다.
인트론의 증강으로 인해 mcelroy 는 단자엽식물 표현 전달체, 특히 벼근동단백질 유전자의 첫 번째 인트론을 만들어 프로모터 하류 유전자의 표현을 유지했다. 마찬가지로, Christensen 등이 만든 옥수수 범소 제 1 인트론의 유전자를 프로모터 하류에 배치하여 단자엽 식물에서 외원 유전자의 표현을 높인다. 그러나 시동자 강도, 세포 유형, 목적 유전자 서열 등의 요인이 유전자 표현에 미치는 영향은 특정 인트론의 기능에 달려 있으며, 때로는 인트론이 운반체에서의 위치에 따라 달라지는 경우도 있다는 지적이 나온다. 예를 들어, 옥수수 ADHL 유전자 9 는 Gus 유전자의 5' 끝에 위치하며 GUS 유전자의 CaMV35S 프로모터의 통제하에 향상되지 않습니다. 인트론의 3' 끝에는 인트론 gus 유전자가 삽입되어 같은 시작자의 gus 유전자 표현 수준을 조절하면서 약 3 배 증가했다. 인트론의 유전자 발현 메커니즘은 매우 복잡할 수 있다. 인트론을 만드는 효율적인 식물 표현 전달체가 고정 패턴이 부족하다는 것을 알 수 있어 더 연구할 가치가 있다.
다중 유전자 제어 정책
지금까지 대부분 단일 외원 유전자를 도입해 수용체 식물을 유전자 변형시키는 연구였다. 하지만 충분히 강력한데, 때로는 단일 유전자의 표현이나 단일 메커니즘의 작용으로 인해 아직 얻지 못하는 경우도 있습니까? 이상적인 유전자 변형 식물. 둘 이상의 유전자가 식물에 시너지 효과가 있다면, 동시에 단일 유전자보다 더 좋은 전환 결과를 얻을 수 있다. 이 전략은 내병성, 항충성, 항역성이 있는 유전자 변형 식물을 재배하는 데 적용되었다. 예를 들어, 곤충 스펙트럼과 곤충 저항성 유전자 기능의 다른 메커니즘에 따라, 두 가지 기능을 보완하는 벡터를 구축하고, 어떤 식으로든 두 개의 항충 유전자를 식물에 도입한다. 왕위는 다른 렉틴 유전자와 단백질효소 억제제 유전자와 함께 면화에 이미 2 가 항충 유전자를 함유한 형질 전환 식물로 옮겨졌다. 바톤 Bt 살충단백질 유전자와 전갈독소 유전자를 담배에 도입해 항충성과 해충이 내성을 일으키는 것을 방지하는 능력을 크게 높였다. 강력한 내병성을 이용하여, 우리는 란암 연구실에 베타-1,3- 글루칸효소 쌍가 유전자와 키틴효소 유전자를 함유한 식물 표현 벡터를 만들어 유채와 면화에 도입했다. 결과는 형질 전환 식물이 명백한 저항성을 가지고 있음을 보여줍니다. 요즘 풍도영, 이보건 2? 세 가지 항진균 유전자와 hpt 유전자는 심지어 전달체에서도 항충 유전자와 bar 유전자가 다른 전달체에 연결되어 있어 R 의 후손 70% 가 도입한 외원 유전자 (6) 를 포함하고 있는 것으로 나타났다. 7) 그리고 가져온 외원 유전자의 하나 또는 두 개의 게놈 사이트 통합 추세.
일반적으로 25KB 이상의 외원 DNA 조각을 식물 세포로 가져오는 것은 불가능하다. 식물 병 저항성 유전자의 양적 특성 부위와 같은 기능 관련 유전자는 주로 유전자 클러스터 형태로 존재한다. 천연 식물 염색체 유전자 클러스터 또는 비상 사슬에 있는 일련의 외원 유전자와 같은 100KB 보다 큰 DNA 조각을 식물 게놈의 같은 점으로 가져오면 여러 유전자에 의해 제어되는 현상이 발생할 수 있습니다. 우량성은 광보 항충과 항병을 일으킬 수 있으며, 새로운 대사 경로를 얻어 수용체 세포에 새로운 생물분자를 생산할 수 있다. 또한 유전자 클러스터의 큰 부분이나 유전자 클러스터의 동시 삽입도 유전자 조작으로 인한 위치 효과를 어느 정도 극복하고 유전자 침묵 등 좋지 않은 현상의 발생을 줄일 수 있다. 최근 Hamilton 과 Alfred 는 차세대 벡터 시스템을 개발하여 큰 DNA 조각을 복제하고 농균의 도움으로 식물 BIBAC 와 TAC 를 직접 변환했다. 이 두 산자는 유전자의 지도 복제를 가속화해야 할 뿐만 아니라, 여러 유전자를 통제해야 품종 개량에 잠재적인 응용이 있을 수 있다. 현재 다유전자 변환에서의 응용 연구는 이제 막 시작되었다. BIBAC 및 TAC 캐리어에서
8 사용 및 누락 된 마커 유전자 선택
표기 유전자의 선택 유전자 변환에서 전환될 수 있는 세포 (또는 개인) 가 대량의 변환되지 않은 세포에서 선택한 표기 유전자. 일반적으로 생성된 유전자 변형 세포가 하위 제품 선택에 대한 저항성을 갖게 합니다. 따라서 이런 선택의 정상적인 성장 배양기 중 유전자 변형 세포를 첨가한 것은 성장, 발육, 분화가 아니라 항성이 부족하기 때문에 이런 선택제의 민감성을 보여준다. 벡터에서 마커 유전자의 연결면을 구축하고 선택합니다. 둘 다 자체 유전자 조절 시퀀스 (예: 프로모터, 종료자 등) 를 가지고 있습니다. ). 항생제 내성 유전자와 제초제 저항성 유전자의 두 가지 주요 유형이 있습니다. 전자는 항생제 내성을 낳고, 후자는 내성 제초제를 생산한다. 사용된 항생제 내성 유전자는 NPTII 유전자 (조마이신 내성), 조마이신 인산 전이효소를 생산하는 Gent 유전자 (신마이신 인산 전이효소, 카나마이신 내성), HPT 유전자 (항겐다마이신 ADM 생성) 를 포함한다. EPSP 유전자 (5- 아세톤산 무모초산 -3- 인산합효소 생성, 초간), GOX 유전자 (초단산화효소를 통해 초간 분해), bar 유전자 (PPT 아세틸 전이효소, 항병암모니아산, 초산) 를 포함한 제초제 항성 유전자.
위의 1, 2,3,5,6 은 모두 동그라미가 가능합니다. 특히 PB I 12 1 KLOC-0/을 포외 분비 골격 전달체로 선택할 수 있기 때문에 유전자형을 바꿀 수 있습니다.
복제 단계는 비교적 간단합니다.
1, 필요한 유전자를 얻기 위해 첫 번째 제한 효소 절단 부위, 그리고 변화를 업로드하는 좋은 전달체입니다.
2 플라스미드 형질 전환 대장균 DH5α 증폭
잘 증폭 된 플라스미드를 사용하여 식물 세포를 형질 전환
4. 세포외 배양액을 수집하여 단백질의 표현과 분비를 검출한다. 예 아니오
전환의 전달체에 관해서는 간단히 몇 마디만 하면 된다. 답이 끝났으니, 만약 정말로 운반체를 잘 만들었다면, 자신의 회사를 개설할 수 있을 것이다.