인산화 단백질의 감정 방법은 직접 검사와 간접 검사의 두 가지로 나눌 수 있다. 다음은 몇 가지 일반적인 방법입니다: < P > 면역 각인 (WB): 표적 단백질의 인산화 상태를 감지하기 위해 특이항체 사용. 전기 영동에서 단백질을 분리한 후 항인산화 특이항체 () 를 사용하여 인산화 부위를 식별하고 신호의 강도를 통해 인산화 수준을 정량화할 수 있다. < P > 질량 분석 (MS): 질량 분석은 인산화 단백질과 인산화 부위를 직접 확인하는 효율적인 방법입니다. 그것은 전체 인산화 단백질의 구성을 감정하는 데 사용될 수도 있고, 특정 인산화 부위를 감정하는 데도 사용될 수 있다.
a, 인산화는 소화를 유발한다. 질량 스펙트럼 전에 단백질 분해 효소 소화를 하고, 질량 분석기를 이용하여 단백질 효소 분해물의 인산화 부위를 확인한다.
b, 직접 중성자 전송 스펙트럼 (DTMS): 질량 분석기를 사용하여 인산화 단백질의 중성자 질량을 직접 검출하여 인산화 부위를 확인한다. < P > 인산화 특이항체 배열: 이 방법은 여러 특이성의 인산화 항체 를 사용하여 칩에 고정한다. 샘플을 칩에 반응한 후 신호 강도를 감지하여 여러 인산화 부위를 식별하고 정량할 수 있다. < P > 친화층분석법: 친화물질이 함유된 기둥을 이용하여 인산화 단백질을 혼합물에서 순수화한다. 그런 다음 Western blotting 이나 스펙트럼 분석 등을 통해 인산화 상태를 결정합니다. < P > 이 방법들은 각각 장단점이 있습니다. 적절한 방법을 선택하시면 샘플 특성, 실험 목적, 장비 가용성 등을 고려해야 합니다. 일반적으로 여러 가지 방법을 결합하여 보다 포괄적이고 정확한 인산화 단백질의 감정 및 정량 정보를 얻을 수 있습니다.