1 프로 안토시 아니 딘 추출 방법
식물 원료에서 프로 안토시 아니 딘의 추출 속도는 원료 상태 및 추출 조건과 밀접한 관련이 있습니다. 식물 원료의 저장, 건조, 분쇄 정도, 용제 추출 및 온도는 모두 프로 안토시 아니 딘의 화학 구조 및 추출률을 변화시켜 프로 안토시 아니 딘의 물리 화학적 성질 및 생물학적 활성을 변화시킬 수 있습니다.
원료에서 프로 안토시 아니 딘 함량을 측정 할 때 보관 시간이 길수록 측정 결과가 낮을 수 있습니다. 동시에 샘플의 수분도 측정 결과를 감소시킬 수 있다. 또한 건조 조건이 다르면 추출율의 변화도 초래할 수 있으므로 냉동건조를 채택하여 고온을 피하는 것이 좋다.
샘플은 보통 추출하기 전에 으스러진다. 일반적으로 가는 가루는 추출에 유리하지만, 너무 가늘면 추출률이 떨어진다.
추출제의 선택도 추출율에 영향을 미치는 중요한 요인이다. 프로 안토시 아니 딘은 일반적으로 수소 결합과 소수성 결합의 형태로 식물의 단백질, 다당류 등과 함께 안정한 분자 복합체를 형성하기 때문에 프로 안토시 아니 딘 분자도 마찬가지입니다. 따라서 프로 안토시 아니 딘의 추출제는 용해성이 좋아야 할뿐만 아니라 수소 결합 파열도 있어야합니다. 따라서 유기용제와 물의 복합체계 (유기용제가 전체 부피의 50 ~ 70%) 가 추출에 가장 적합하다. 유기 용매의 추출 능력 순서는 프로판올이다
식물 샘플에서 철 등 금속 이온 함량이 높을 때, 프로 안토시 아니 딘은 중성 조건 하에서 금속 이온과 화합하여 침전되어 추출에 불리하다. 이때 산화용제를 사용해야 하며, 원안토시아닌과 단백질, 다당, 그 자체의 이온 사이의 수소 결합과 소수성 결합을 깨고, 원안화-금속이온의 착화 결합을 깨고 추출률을 높여야 한다.
1..1전통적인 유기 용매 추출
199 1 에서 Ayroles 등은 케톤 화합물 수용액을 추출제로 은행잎에서 안토시아닌을 추출하는 방법을 개발했다. 케톤류의 수용액은 추출제로 쓰인다. 추출액을 걸러낸 후 알칼리로 필터액의 pH 값을 약 9 로 조절하여 안토시아닌을 침전시킨 다음 산으로 필터액의 pH 값을 약 2 로 조절한다. (NH4) SO 가 존재하면 C ~ C 케톤으로 필터액 중 프로 안토시 아니 딘을 추출하여 케톤 화합물을 제거하고 건조시킵니다.
Romanczyk 등은 코코아에서 원안토시아닌을 추출할 때 탈지코코아는 질량점수가 70% 인 MeOH/ 탈 이온수로 추출한 다음, 질량점수가 70% 인 아세톤/탈 이온수로 추출, 진공 농축, 유기용제를 제거한 후 물에 녹여 CHC/KLOC-0 을 사용한다
1.2 녹색 용매-물 추출 기술
아세톤 등 유기용제는 환경오염과 제품 중 유독성 유기잔류를 가져올 수 있기 때문에 환경 친화적인 친환경 추출 기술을 대대적으로 발전시키고 있다. 1998 Duncan 과 Gilmour 는 식물재료 (나무껍질, 나뭇잎, 포도씨, 피부, 콩, 녹차) 에서 안토시아닌을 추출하는 방법을 발명했다. 원료 (≤ 15 mm) 를 분쇄하고 대기압, 60℃ ~ 100℃ 또는 고압 하에서 디옥시 온수 (1min ~ 20 이 방법은 주로 분자량 5000d 의 수용성 프로 안토시 아니 딘을 추출하는 것으로, 수율은 0.5%- 10.0% 사이, 보통 6.5%-9.6% (샘플링 위치에 따라 다름), 프로 안토시 아니 딘 b, b, b 결과 제품은 AAPH 에 의해 유도된 리놀레산 산화에 뚜렷한 억제 작용을 하고 있으며, 1 anal g/ml 의 억제율은 70 ~ 79% 에 달할 수 있다. 독물학 실험에 따르면 인체 체중 투여량 그룹과 100 배 인체 체중 투여량 그룹은 24 시간 내에 독성 부작용이 없고 만성 독물학 실험 (5 개월) 에는 뚜렷한 독성 부작용이 없는 것으로 나타났다.
1999 Karim 등은 이온수 가압 탈산으로 식물 원료에서 안토시아닌을 추출하는 것을 발명했다. 추출물을 한외 여과한 후 소수성 마이크로공 중합체 수지를 충전재의 기둥 스펙트럼으로 사용하여 극성 세제제 (에탄올+물) 를 선택해 씻는다. 역삼 투에 의해 용리액에서 에탄올을 제거하고 건조를 통해 프로 안토시 아니 딘을 얻습니다.
1.3 초 임계 유체 추출 기술
손전경 등은 초임계 이산화탄소, 아세톤, 물로 구성된 극성 개질제를 이용해 은행잎에서 원안토시아닌을 추출하는 방법을 발명했다. 추출 온도가 60 C ~ 90 C 이고 추출 압력이 20 MPa ~ 35 MPa 인 상태에서 아세톤과 물의 부피비 (50% ~ 80%): (50% ~ 20%) 의 극성 개질제를 넣어 2H ~; 본 제품에는 은행 플라보노이드 글리코 시드 > 35g/ 100g, 테르펜 락톤 >: 8 g/ 100 g, 프로 안토시 아니 딘 < 7 g/ 100 g, 이 방법의 장점은 과정이 짧아서 가장 강한 천연 항산화제 안토시아닌을 추출할 수 있다는 것이다. 2000 년 손전경 등은 초임계 CO 가 흑갤런씨유와 안토시아닌 저중합체를 추출하는 방법을 개발했다. 이 방법은 두 단계로 나뉜다. 첫 번째 단계는 초임계 CO 가 흑갤런씨유를 추출하고 추출 압력을 25 MPa-29 MPa 로 조절하며 온도는 60 C 이다. 2 단계, 초임계 CO2 에 개질제를 넣는다. 아세톤과 물의 부피비는 70: 30, CO 와 개질제의 유량 부피비는 4: 1, 압력은 22 MPa ~ 25 MPa, 온도는 60 C 로 올리고폴리 안토시아닌을 추출한다. 흑갤런씨유 수율은 65438 06%, 안토시아닌 올리고머 수율은 4% 였다. 이 방법의 장점은 두 가지 제품을 동시에 얻을 수 있다는 점이다. 공예는 간단하고 믿을 만하며, CO 와 개질제는 재활용되고, 제품에는 용제 잔류물이 없고, 환경에 오염이 없다.
1.4 마이크로파 추출 기술
유정타오 등은 포도씨에서 원안토시아닌을 추출하는 새로운 방법을 개발했다. 즉 물, 탄소사슬 길이가 C ~ C 인 알코올, 에테르, 아세톤, 아세톤, 에틸에스테르, 톨루엔 또는 이들의 혼합물에서 선택한 용제에서 주파수가 2450 MHz 또는 9 15 MHz, 전력이 50 이다. 이 방법은 기존의 화학 방법에 비해 간단하고 효율적이며 빠르고 비용이 저렴하며 폐액 배출이 적다.
1.5 수성 2 상 추출 방법
1956 스웨덴 룬드 대학교 알베르트스슨에서 쌍수상 체계부터 1979 독일 GBF 까지 쿠라 등이 쌍수상 추출 분리 기술을 생물제품 분리에 적용한다는 사실을 발견했습니다. 20 여 년의 역사에도 불구하고, 그 조건은 온화하고 확대하기 쉬워 단백질에 성공적으로 적용되었습니다. 최근 몇 년 동안 쌍수성 추출 기술을 이용하여 한약에서 유효 성분을 추출한 문헌이 보도되었다. 수량이 많지는 않지만, 이미 있는 예는 그것이 좋은 응용 전망을 가지고 있다는 것을 충분히 보여준다. 쌍수상 추출 시스템이 은행잎 추출물의 부집합 분리 연구에 대해 좋은 분배 계수와 분리 효과를 보이고 있다. 쌍수상체계는 상분리가 빠르고, 사용온도가 낮고, 대기점이 쉽다는 장점이 있으며, 사용하는 PEG 와 소금은 인체와 환경에 무해하며 추출률이 높아 은행플라보노이드를 풍부하게 분리하는 효과적인 방법이라고 생각한다. 쌍수상 추출 기술이 한약 추출 연구에서 아직 초기 단계에 있지만, 이 기술의 응용은 천연물에서 유효 성분을 추출하는 새로운 아이디어를 제공할 것으로 예상된다.
2 프로 안토시 아니 딘의 정제 및 분리
2. 1 액상추출법
프로 안토시 아니 딘의 정제는 주로 에틸 아세테이트, 톨루엔, 디클로로 메탄 및 에테르와 같은 다단 유기 용매를 사용하여 액상 추출을 수행합니다. 이 방법은 대량의 유기용제를 사용했기 때문에 환경에 오염을 일으킬 수 있으며, 또한 제품에 유독성 유기잔류를 일으킬 수 있다.
2-2 열 크로마토 그래피
현재 일반적으로 사용되는 정제 방법은 대부분 기둥층 분석이다. 왕건청 등은 PVPP 수지를 기둥층 충전재로, 아세토 니트릴을 이동상으로 보리에서 안토시아닌의 아세톤 추출물을 순수화했다.
리카르도 다 실바 등은 메탄올로 포도를 추출한다. 추출물에서 메탄올을 회수한 후 폴리아미드 기둥으로 초보적으로 분리한다. 먼저 중성수로 페놀산을 씻은 다음 부피비가 30: 70 인 아세토 니트릴/물로 카테킨을 씻고 부피비가 75: 25 인 아세톤수로 안토시아닌을 씻어 순화한다.
유예 등은 대공수지를 이용해 에탄올 수용액으로 수수의 안토시아닌을 정제해 제품 순도가 95 g/ 100 g 보다 큰 올리고머 프로 안토시 아니 딘을 얻었다.
2.3 고체상 추출 방법
고체상 추출은 복잡한 체계에서 필요한 팀을 선별적으로 추출하는 가장 효과적인 방법 중 하나이다. 1999 Lazarus 등은 SPE 방법으로 아몬드 껍질, 포도즙, 와인에서 안토시아닌을 정제한다. 조건은 supelcosil Envi- 18 20mL 고체상 추출 기둥, 유동상: 아세톤: 물: 아세트산 = 70: 29.5: 0.5 (부피비) 입니다. Kennedy 와 Waterhouse 는 적포도주의 안토시아닌에 C- 18 기둥을 사용하며, 유동상은 물과 메탄올이다. 유기산, 설탕 및 기타 유기상에 용해되지 않는 화합물을 제거하여 추출한 원안색소를 순수화하다.
2,4 겔 크로마토 그래피
겔 크로마토 그래피는 또한 프로 안토시 아니 딘을 정제하는 데 자주 사용됩니다. SephadexLH-20 은 플라보노이드에 대해 높은 친화력을 가진 히드 록시 프로필 글루칸 젤입니다. 현재 프로 안토시 아니 딘의 정제 및 분리는 주로 Sephadex LH-20 겔 크로마토 그래피를 사용합니다. 그러나, Sephadex LH-20 젤의 물리적 특성은 프로 안토시 아니 딘을 효과적으로 분리 할 수 없다는 것을 결정합니다. 따라서 추가 순화와 분리는 젤 필터 스펙트럼이나 고효율 액조 스펙트럼을 통해 진행해야 한다.
또한 평균 입자 크기가 1.3m 인 글루칸 중합체인 Sepherdex 75HR 은 1.8 MPa 를 초과하는 배압을 견딜 수 있는 프로 안토시 아니 딘의 순화 분리에도 사용됩니다. 이 소재의 상업 기둥은 일반적으로 단백질을 분리하는 데 사용되지만, 원안토시아닌을 분리하는 능력이 Sephadex LH-20 보다 낫다는 것을 발견했다. McMurrough 와 Madigan 은 보리 추출물을 농축해 고효율 젤 필터 크로마토 그래피 (Sepherdex 75HR) 로 메탄올로 직접 씻는다. 자외선 검사에 따라 세제액을 수집하고 DMACA 를 통해 각 팀을 감정한다. Escribano-bail6n 등은 Sephadex LH-20 과 반제비 RP-HPLC 를 사용하여 포도씨에서 원안토시아닌을 순수화했다.
Rigaud 등은 GPC (겔 침투 크로마토 그래피) TSKG2500HXL 및 TSK G3000 Hxl 을 사용하고 테트라 히드로 푸란 (유량 1 ml/min) 을 사용하여 코코아와 포도씨 추출물을 정제합니다.
2.5 미생물 발효법
Ariga 등은 활성 효모를 발명하여 물과 유기용제로 추출한 추출액 중 전분을 발효시켜 순화 안토시아닌의 목적을 달성한다. 순화 후 프로 안토시 아니 딘의 금속 이온도 잘 제거 될 수 있음을 발견했습니다. 추출제가 물과 물/에탄올이면 발효를 직접 농축할 수 있다. 추출제가 아세톤이라면 발효 전에 제거해야 한다. 흔히 쓰이는 효모는 와인 효모, 효모, 접목효모주이다.
2.6 고속 역류 크로마토 그래피
고속 역류 스펙트럼은 미국 국립의과대학의 이토 의칠로 박사가 1960 년대에 제기한 것이다. 그것은 원래 일종의 준비 색상 스펙트럼 기술로, 고체 전달체나 지지물이 없는 액체-액체 분배 색상 스펙트럼이다. 분리는 주로 화합물이 서로 용해되지 않는 양상에서의 분배 능력에 기반을 두고 있으며, 분리효율이 높고, 제품 순도가 높으며, 운반체 흡착과 샘플에 대한 오염이 없고, 제비량이 많고, 용제 소비가 낮고, 조작조건이 간단하다 (실온, 폴리에틸렌 불활성 기둥 재료). 현재 천연의약품의 제비 및 분석에 광범위하게 사용되고 있다.
현재 고속 역류 색보계는 분석형과 제비형 2 대 시리즈를 성공적으로 개발했다. 즉, 고속 역류 스펙트럼은 천연 의약품 성분의 제비 및 분리뿐만 아니라 정량에도 사용할 수 있습니다. 샘플 부피는 몇 밀리그램에서 몇 그램까지, 샘플 부피는 몇 밀리리터에서 수십 밀리리터까지입니다. 비극성 화합물의 분리뿐만 아니라 극성 화합물의 분리에도 적용되며 천연물 기능성 성분의 거친 분리와 추가 정제에도 적용됩니다.
2-7 분자 필기 기술
분자 각인 기술은 20 세기 말에 나타난 고선택성 분리 기술이다. MIT 는 생물학의 핵심 작용 원리를 모방해 준비한 재료는 선택성이 높기 때문에 손성 분리와 기질 선택적 분리, 고체상 추출, 화학 또는 바이오센서, 비대칭 촉매 및 효소 시뮬레이션 등 많은 관련 분야에 응용되었다. MIT 방법은 기존 방법에 비해 효율적이고 빠르며 특이하다는 장점이 있습니다. MIT 는 손성 분리에서 비길 데 없는 역할을 하고 있다. 통계에 따르면 기존 약물의 60% 는 하나 이상의 키랄 센터를 가지고 있으며, 거울상 이성질체 간의 효능과 인체에 미치는 영향은 크게 다릅니다. 따라서 1992 에서 미국 식품의약청은 앞으로 광학 이성질체가 비대칭 센터를 가진 약과 분리되어야 한다고 규정하고 있다. MIT 방법은 기존 방법에 비해 매우 소중하다. P>
2002 년, 저우리 등은 케르세틴을 주형으로 한 분자로 각인된 중합체를 준비하고, 산자나무 굵은 추출물에서 케르세틴과 이쥐 이소소를 분리해 좋은 분리 효과를 얻었다. 사건춘 등은 극성용제에서 아크릴 아미드를 기능성 단량체로, 케르세틴을 템플릿으로, 비가격법으로 분자각인 중합체를 준비했다. 액조색 스펙트럼 실험에 따르면 분자로 각인된 중합체는 케르세틴에 대해 특이성 친화력을 가지고 있다. 이 분자로 각인된 중합체에서 은행잎 추출물의 수분산물을 직접 분리해 주로 케르세틴을 템플릿과 카나페놀 (케르세틴 구조와 비슷한 화합물) 으로 함유하고 있는 성분을 얻는다. 이 연구는 분자각인 기술이 한약에서 직접 분리되어 특정 효능이 있는 화합물을 추출할 수 있는 가능성을 입증했다.