본 연구에서는 직교 실험을 통해 이소플라본 정제의 처방을 선별하고, 고효율 액조색 스펙트럼을 이용하여 주요 활성 성분인 콩이노신과 염료 목소의 함량을 측정했다.
1 기기 및 재료
1. 1 기기 Dionex 고성능 액체 시스템, Chlomelon 크로마토 그래피 데이터 워크스테이션; 남통화우제약기계유한공사에서 생산한 YP- 1.5 데스크탑 전기 연속 단일 펀치 기계 천진 tiantianfa 기술 유한 회사에서 생산 된 ZRS-8G 지능형 용해 장치 .....
1.2 소재인 콩아노신과 염료 목소 대조품은 시그마에서 구입하여 99% 이상의 함량을 가지고 있습니다. 대두 이소 플라본 추출물, 이소 플라본 순도 >; 90%, 베이징 Huaqing meiheng company 에서 구입; 도데 실 황산나트륨 (국약 화학 시약 유한 회사 생산); 유당 (Huzhou 식품 화학 회사 생산); 스테아린산 마그네슘 (상해 의약품 보조제 공장 생산).
2 방법 및 결과
2. 1 대두 이소 플라본 정제 처방 스크리닝
2. 1. 1 직교 실험 심사 배합표는 사전 실험을 기초로 유당을 충전제로, 10% 전분풀을 접착제로, 경지산 마그네슘을 윤활제로, 12 탄기 황산나트륨을 붕괴제로 한다. 선택 1000 조각, 유당 사용량, 10% 전분장 사용량, 경지산 마그네슘 사용량, 도데실 황산나트륨 사용량, 각 요인당 3 수준, 직교 표 L9(34) 로 실험해 처방을 최적화한다. 표 1 계수 등급 표
2. 1.2 제조 공정: 원료는 각각 100 으로 체질하여 준비한다. 규정된 양의 이소플라본, 유당, 12 탄기황산나트륨을 골고루 섞는다. 연재는 적당량의 접착제로 만들어졌으며 16 목 나일론 체, 젖은 알갱이 60 C 건조 60 분, 건조 알갱이 14 목 나일론 체, 알갱이를 골고루 섞은 후 경지산 마그네슘을 넣는다. 압축 직경 8 mm, 시트 무게 500 mg 정제, 경도 조절 (3.5 0.5) KG/MM2.
2. 1.3 실험 결과와 분석 실험 결과는 표 2 에 나와 있습니다. 표 2 직교 시험 및 처방 스크리닝 결과
최적의 레시피는 A3B3C2D3, 즉 킬로그램당 이소플라본 조각, 유당 사용량은 200 g, 10% 전분풀 사용량은 20 ml, 12 탄기황산나트륨 사용량은 12 g, 경지산 마그네슘 사용량은/KLOC-입니다. C>D> B.
2.2 함량 측정
2.2. 1 색상 스펙트럼 기둥: Diamonsil TM C 18 기둥 (4.6 mm×200 mm, 5 미크론); 이동상: 메탄올과 0. 1% 인산의 비율은 42: 58 입니다. 기둥 온도: 30℃; 유속: 1.0 밀리리터/분; 검출 파장: 254 나노 미터.
2.2.2 대조품 용액의 제비는 각각 65438±05mg 콩, 20 mg 염료 목소를 정확히 따서 같은 용량의 병에 넣고 무수에탄올로 50 ml 까지 정하면 대조품 용액을 얻을 수 있다.
2.2.3 시험품 용액 준비로 콩 이소플라본 3 조각을 채취해 분쇄한 후 정확히 약 0.6 g 를 100 ml 의 양병에 넣고 80 ml 메탄올 초음파를 넣어 30 min 을 처리한 후, 식힌 후 메탄올을 눈금으로 정용해 고르게 흔들어 0.45 미크론 마이크로공막으로 여과한다.
2.2.4 선형 관계 조사: 2,4,6,8, 10, 12, 14,/kloc 동시 회귀 방정식 Y=55.378X- 10.789, r=0.9996. 그 결과, 염료 목소 농도가 8.0 ~ 64.0 μ G/ML 범위 내에서 최고봉 면적과 농도가 양호한 선형 관계를 보인 것으로 나타났다.
그림 1 콩 이소플라본 조각의 HPLC 그림
(a) 대조품의 크로마토 그래피 및 (b) 대두 이소 플라본 정제의 크로마토 그래피; 1 은 콩, 2 는 염료나무 플라보노이드)
2.2.5 정밀도 실험은 30.0 μg/ml 콩이노신 제어 용액과 40.0 μg/ml 염료 목소 제어 용액 10 μl 을 채취해 6 회 연속 주입했다. 대두원과 염료 목소 피크 면적의 상대 표준 편차는 각각 0.86% 와 0.78% 였다.
2.2.6 안정성 실험에서 각각 0, 2, 4, 8, 12, 24 h 에 같은 농도의 공급품 용액 10 μl 을 주입하고, 콩아노신과 염료 목소 피크 면적의 RSD 는 각각/KK 입니다
2.2.7 반복적인 실험은 같은 샘플을 취하고, 2.2.3 방법에 따라 6 개의 시험용 용액을 준비하고, 10 μl 을 정확하게 측정하고, 각각 샘플을 주입하고, 콩아노신과 염료목소의 RSD 는 각각1이다.
2.2.8 회수율 시험: 알려진 6 개의 샘플을 채취하여 각각 1.0 1 mg/ml 콩아노신 대비 용액 1 ml 을 넣고 알려진 6 개의 샘플을 채취한다. 순차적으로 10 μl 을 주입하여 콩아노신과 염료 목소의 회수율을 각각 98.3%, 97. 1%, RSD 는 각각 1.45%,/KLLL 로 계산했다.
2.2.9 완제품 함량 측정: 서로 다른 배치의 이소플라본 조각 약 0. 1 g 를 정확하게 따고 2.3.3 방법에 따라 시험품 용액을 준비하여 상기 색상 스펙트럼 조건에 따라 측정한다. 결과는 표 3 에 나와 있다. 표 3 완제품 함량 측정 결과
3 토론
대두 이소 플라본 정제의 최적 제형은 킬로그램 당 대두 이소 플라본 정제, 유당 200 g, 10% 전분 페이스트 20 ml, 라 우릴 황산나트륨 12 g, 마그네슘 스테아 레이트1입니다
본 논문에서 확립 된 HPLC 방법은 배합표 과립에서 콩 글리코겐과 염료 리그닌의 함량을 측정하여 조작이 간단하고 재현성이 뛰어나 대두 이소 플라본 정제의 품질을 효과적으로 제어 할 수있다.
콩원과 염료 목소는 콩 이소플라본 정제의 주요 활성 성분으로 골다공증에 뚜렷한 예방 작용을 한다. 따라서 대두 이소 플라본 정제의 품질 관리 지표로서 대두 아노신과 염료 리그닌의 함량을 사용하는 것이 합리적이고 실현 가능합니다.