항원 검사란 무엇입니까? 다른 테스트 방법과 어떻게 다릅니까? 이 문서에서는 신종 코로나 바이러스 예를 들어 일반적인 빠른 검진 방법, 관련 원칙 및 적용 범위에 대해 살펴보겠습니다.
우리가 검진을 할 때, 우리는 우리가 체질하고 싶은 질병이나 물질을 찾을 수 있다. 우리가 먼저 알아야 할 것은' 어디서부터 시작' 문제이고, 그 다음은' 어떻게 감지' 하는 것이다. 이렇게 미시세계의 변화가 우리의 눈에 반영되어 판단을 내리는 데 도움이 될 수 있다.
어디서부터 시작할까요? 우리는 바이러스를 다루고 있습니다. 중학교 생물학 수업에 익숙한 지식에 따르면 바이러스는 유전물질과 단백질 껍데기로 구성된 일종의 생명체이다. 바이러스의 감염 상태를 감지하려면 그 성분부터 시작해야 한다. 다음 내용은 여러분이 자신의 중학교 때의 생물 지식으로 읽으시길 바랍니다.
현재 우리를 괴롭히고 있는 신종 코로나 바이러스 사례 연구. 그것은 관상바이러스과 관상바이러스 B 에 속하며, 인간을 감염시킬 수 있는 것으로 알려진 일곱 번째 관상바이러스이다. 모든 코로나 바이러스는 포막이 있는 단일 체인 RNA 바이러스입니다. 즉, 그들의 유전 물질은 단백질 합성을 안내하기 위해 mRNA (메신저 RNA) 로 번역에 직접 참여할 수 있는 단일 RNA 체인입니다.
NPRC 2020.00002 의 바이러스종은 국가병원미생물자원 (중국 질병예방통제센터 바이러스성 질병예방통제소) 이 제공한다.
우리의 현재 목적은 표본에 이 바이러스가 있는지 여부를 검사하는 것이다. 바이러스 자체나 바이러스가 가져온 산물을 검출하든, 단백질 껍데기 (포막) 와 유전 물질이라는 두 가지 방향으로 시작할 수 있다.
이 논리를 감지하는 가장 분명한 방법은 볼 수 있는지 확인하는 것이지만 바이러스 자체는 작고 신종 코로나 바이러스 지름은 80- 120 nm 입니다. 전자현미경으로 모든 표본을 스캔하는 것은 비현실적이며, 인력과 물적 재력도 지탱할 수 없다. 그렇다면 비교적 경제적이고 실용적인 방법은 바이러스의 성분이나 바이러스로 인해 발생하는 일부 특수물질이 일정한 양급으로 축적된 후 빛을 발하고 변색하며 거시적인 표현을 하게 하는 조치를 취하는 것이다. (윌리엄 셰익스피어, 윈스턴, 경제명언) (윌리엄 셰익스피어, 윈스턴, 경제명언)
그렇다면 우리의 문제는 바이러스의 구성과 바이러스가 일으키는 어떤 물질과 관련된 거시적 규모의 변화를 관찰할 수 있는 방법을 선택하는 것이다. 우리가 선택할 수 있는 재료도 책상 위에 있습니다: 바이러스의 유전 물질, 여기 RNA； 가 있습니다. 바이러스 코팅, 즉 단백질 껍질; 또한, 몇 가지 기본적인 생물학적 지식을 기억한다면, 인체 면역체계가 바이러스에 감염된 후 항체 침입에 저항하는 것도 좋은 선택이다.
현재 우리가 사용하고 있는 몇 가지 검사 방법은 모두 이러한 물질 (및 관련 물질) 즉 유전물질에 대한 핵산검사, 포막에 대한 항원 검사, 항체 혈청 항체 검사에서 태어난다.
바이러스의 유전 물질인 핵산검사 (WHO) 는 바이러스를 특정 종으로 식별할 수 있는 유전적 특징을 포함하고 있기 때문에 핵산은 양성으로 바이러스가 체내에 이미 존재한다는 것을 설명한다.
우리의 현재' 핵산검사' 는 사실 두 부분으로 나뉜다. 첫 번째 부분은' 코를 찌르다' 와' 목을 찌르다' 의 샘플링과 이어지는 정성 분석이다. 샘플을 받은 후 바이러스의 양이 너무 적기 때문에 실험실에서 샘플을 일정한 배수씩 증폭시켜 형광반응 결과에 따라 양성 또는 음성으로 판단한다.
두 번째 부분은 유전자 시퀀싱을 통해 샘플의 바이러스 유형을 결정하여 추적 가능해야 한다. 이 단계는 더 이상 일상적인 검진의 범주에 속하지 않지만, 역학 조사 중에는 큰 의미가 있다. 흥미가 있으면 위키피디아를 참고하여 간단히 알아보세요.
우리는 보통 핵산검사 선별 도구로 참여하는데, 이는 정성 채집의 첫 부분을 가리킨다.
신종 코로나 바이러스 감염 후 삼키기, 가래액, 하호흡기 분비물, 혈액 등의 샘플에서 바이러스 핵산을 발견할 수 있다. 표본의 각 부위의 핵산검사 양성률이 다르기 때문에 각 부위의 검출률은 병세의 진전에 따라 달라질 수 있다.
우리가 흔히' 코 닦기' 와' 삼키기' 라고 부르는 것은 사실 삼키는 뒷벽의 분비물과 조직을 채집하고 있는 것이다. 전자는 코인두를 채집하고, 후자는 입인두를 채집한다. 침과 같은 다른 기준도 검사 표본으로 사용할 수 있으며 지역마다 본질적인 차이가 있다.
코 (삼키기) 와 입 (삼키기) 은 모두 양성률과 편리성을 고려한다. 사실, 배설물과 소변도 표본으로 채집할 수 있다. 또 3 1 환자의 연구에 따르면 항문면봉의 정확도는 코인두와 입인두샘플링보다 높았다. 특히 질병 후기에는 항문면봉 확진환자 중 코면봉 양성률이 30% 미만이었다. 그러나 분명히 조작의 제한으로 인해 조기 검진을 선호할 수 없다.
다음 단계는 얻은 소량의 샘플에서 핵산을 추출하는 것이다. 샘플의 바이러스 크기가 너무 작아 분석을 할 수 없기 때문에 증폭과 표기가 필요하다. 필요한 것도 고교에서 배운 지식이다: 중합효소 체인형 반응 (PCR)-이 단계는 번거로워 보이지만 그 원리와 절차가 잘 배웠기 때문에 실제 운영에는 시약 추가만 하면 기계에 배달하면 된다. 전체 핵산검사 과정에서 가장 골치 아픈 것은 피실험자가 안전하게 샘플을 얻을 수 있도록 하는 것이다. (웃음)
현지 질병통제기관이나 검사센터는 적절한 핵산 추출 테스트 키트 및 핵산검사 테스트 키트 구입을 할 것이다. 테스트 키트 추출은 혼합 샘플 (세포 조각, 분비물, 먼지 및 기타 불순물) 에서 RNA 추출을 담당합니다. 흔히 볼 수 있는 방법은 자기주법, 원심주법, 방출제 방법이며, 추출 방법에 따라 후기검사의 정확성에 약간의 영향을 줄 수 있습니다. 이후 순수화된 RNA 는 검사 테스트 키트 (일부 테스트 키트) 에 넘겨 후속 처리를 한다.
검사 테스트 키트 샘플을 기계에 반입하는 과정은 이번 검사에서 가장 중요한 반응인 RT-qPCR (실시간 정량 역전사 중합 효소 사슬 반응) 이다.
다음으로, 나는 네가 고등학교 생물에 대한 지식을 주워야 한다. 일반적인 PCR 반응에는 다음과 같은 단계가 있습니다.
가열: 이중 가닥 DNA 가 비틀어져 두 개의 단일 체인으로 변형됩니다. 어닐링: 혼합된 단일 체인 DNA 를 복사할 조각에 따라 설계된 프라이머와 결합합니다. 연장: 온도를 조절하여 DNA 중합 효소가 프라이머를 따라 작동하게 하여 새 체인을 복제하여 새로운 이중 체인을 형성합니다. 바이러스를 검사할 때, 우리는 위의 단계보다 더 많은 일을 해야 하지만, 우리는 두 가지가 더 필요하다.
첫 번째 반응 전에 역전사 효소 (RNA 가 의존하는 DNA 중합 효소) 를 사용하여 바이러스 단일 사슬 RNA 의 상보성 사슬을 합성해 cDNA 로 결합했다. 어닐링 및 확장 단계에서는 프라이머와 필요한 효소 외에도 TaqMan 프로브가 필요합니다. TaqMan 프로브를 이렇게 이해할 수 있습니다. 주요 부분은 복제해야 할 소량의 유전자 조각과 짝을 지어 이중 체인을 형성하도록 설계된 올리고 뉴클레오티드 체인입니다. 그것의 한쪽 끝은 형광분자를 연결하고, 다른 쪽 끝은 스위치 (급멸기단) 를 연결한다. 양자가 프로브에 연결되면 형광은 급멸기단에 의해 억제되어 감지할 수 없다. 어닐링 중에 프로브는 프라이머와 함께 복제될 단일 체인 조각과 결합됩니다. 연장 과정에서 DNA 중합 효소는 이 탐침, 급멸기단, 형광분자를 포함한 앞의 장애물을 잘게 다져서 형광이 나타난다.
순환 수가 증가함에 따라 점점 더 많은 DNA 조각과 형광이 증폭된다. 각 사이클의 형광 밝기를 처음 몇 사이클의 참조 밝기와 비교하여 현재 DNA 조각의 양을 얻거나 주기 수와 형광 밝기로 직접 질적으로 판단할 수 있습니다.
그럼 구체적으로 어느 부분을 베껴야 하나요? 바이러스를 검출하려면 가장 대표적인 핵산 조각을 골라라. 현행 기준에서 ORF 유전자와 N 유전자는 일반적으로 사용되는 검사 부위이다.
검사 테스트 키트 는 추출 된 RNA (샘플) 를 넣고 테스트 키트 의 절차 설명에 따라 해당 PCR 온도와 기간을 설정하고, 기계 제어에 의해 증폭 과정을 완료하고, 고정 고리에서 형광 신호를 수집하고 해당 주기 수 (Ct 값) 를 기록합니다. 음성-양성/전염성 판단 기준은 형광 신호가 임계값에 도달했을 때 현재 주기 수가 얼마인지 보는 것이다. 현행' 신종 코로나 바이러스 진료방안 (시범 9 판)' 에 따르면 격리관리 해제 기준은 Ct 값 ≥ 35 입니다. 이전 ≥40 기준에 비해 퇴원 격리 시간이 크게 단축된다.
RT-PCR 을 통한 핵산검사 (RT-PCR) 는 현재 진단의 금표준으로, 방법론적으로 볼 때 100% 의 정확성을 달성할 수 있기 때문이다. 그러나 핵산검사 시간이 오래 걸리고 환경 및 운영자에 대한 요구가 높다. 환경 조건이 미준수, 재료, 장비가 미비한 상황에서 대량의 핵산검사 때문에 엄청난 인력과 재력 소비가 발생할 수 있다.
이번 전염병에서 우리가 채택한 면역검사 방법에는 빠른 항원 검사와 항체 검사, 항원 항체 반응을 바탕으로 항원 항체 빠른 중화작용을 통해 시간과 비용 검체 중 분석물이 있는지 여부가 포함됐다. 둘 다 면역층 분석의 범주에 속한다.
박스 형태로 나타나는 자체 조작할 수 있는 항원 검사는 재료가 부족해 스스로 결정할 경우 보완용으로 적합하다.
항원 검사 핵산검사 검사는 바이러스의 유전 물질, 즉 바이러스의' 내부' 를 검사한다. 그렇다면 (빠른) 항원 검사는 바이러스의' 외모' 를 검사하여 완전한 바이러스 알갱이를 직접 검사하는 것이다. 현재 비준된 항원 검사 테스트 키트 세 가지가 있다: 콜로이드 금법, 라텍스법, 형광면역층 분석법. 세 가지의 내재 원리는 일치한다. 그러나 형광 면역층 분석 테스트 키트 은 여전히 전문 탐지기 나 자외선 손전등 이 필요하여 가정 자체 테스트 에 적합하지 않다. 콜로이드 금법과 라텍스 법칙은 모두 검사 결과를 육안으로 볼 수 있는 띠로 변환하는 것인데, 차이점은 표기와 착색에 사용되는 물질이 다르다는 것이다.
물론 항원 검사에도 당연히 단점이 있다. 즉 가짜 여성률 (양성, 음성) 이 높아 검사 누락과 오검으로 이어질 수 있다. 그러나 차 한 잔으로 결과를 낼 수 있는 시간이점 앞에서 정확도의 차이는 어떤 경우에는 일시적으로 타협할 수 있다.
출처: ASM.org 신종 코로나 바이러스 EUA 항원 테스트 작동 원리
핵산검사 대비 항원 검사는' 코 면봉' 의 샘플링 경로를 증가시켜 개인 자각의 난이도를 낮췄다. 면봉의 샘플은 완충액에서 씻겨지고, 액체는 샘플구멍에 떨어지며, 액체는 모세작용으로 잠재적 항원이 미리 들어 있는 항체 영역 (결합패드) 을 통과한다.
이 지역의 항체 은 과녁 항원 (신종 코로나 바이러스) 을 겨냥한 단일 복제 항체 이다. 각 항체 분자는 샘플의 항원과 반응하여 항원 항체 복합물을 형성하고 모세관 작용을 통해 다음 시험지로 흐릅니다.
그런 다음 테스트 라인 (T 라인) 이 있으며 대상 항원에 대한 단일 복제 항체 또한 테스트 라인에 부착되어 있습니다. 너는 이곳의 물건이 납땜판에 있는 것과 같다는 것을 이해할 수 있지만, 단지 치수가 없다. 이때, 만약 피실험자가 이미 신종 코로나 바이러스 에 감염되었다면, 그가 견본에 남아 있는 항원에 의해 형성된 항원 항체 복합물은 여기서 다시 한 번 고정 온라인 항체 과 결합될 것이다. 여기서, 이 표시된 화합물들은 끊임없이 퇴적되어, 결국에는 하나 또는 깊고 얕은 띠가 나타난다. 시험지의 색원은 이전에 쿠션에 항체 분자가 부착한 꼬리표이고, 콜로이드 금법은 콜로이드 금 알갱이, 라텍스법은 유색 라텍스 방울, 형광법은 형광분자입니다. 그래서 이 시험지를 사용할 때, 샘플이 막 들어가자마자 액체가 퍼지기 시작했을 때, 퍼지는 앞부분에 약간의 밝은 색이 있는 것을 발견할 수 있습니다. 이것은 아직 고정적으로 침전되지 않은 마크의 색입니다. (데이비드 아셀, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 계절명언)
다음으로 액체는 제어선 (C 선), 또 다른 항체,' 표적 항원 단일 복제 항체' 를 통해 제어선, 즉' 2 항' 에 붙어 계속 확산된다. 이 새로운 항체 은 다른 동물 면역 체계 에서 마지막 항체 반응 을 통해 얻은 것 이다. 예를 들어, pad 와 결합된 항체, 토끼, 항체, 양, 토끼를 겨냥한 단일 복제 항체. 즉, 2 항 항원은 이전에 쿠션을 결합한 항체. 이 선의 존재는 액체가 정상적으로 확산되는지, 패드에 있는 항체 등이 무효인지 등을 감지하기 위한 것이다. 이때 쿠션 액체에 남아 있는 대량의 항체 양이 항원과 품질 관리선의 두 번째 항체 반응으로 복합물을 형성하여 뚜렷한 띠가 나타납니다.
콤비네이션 패드에 항체 이 풍부하기 때문에 이 품질 관리선은 곧 나타나 색칠할 것이다. 그러나 항원 (바이러스) 수가 반드시 필요한 것은 아니기 때문에 검사선의 발색 속도는 다를 수 있지만, 일반적으로 15 분 이내에 결과를 판단하기에 충분하다. 그래서 엑스레이를 보지 마세요. 분명히, T-레이는 막연하게 "아무것도 없다" 고 느낍니다. T 광선이 얼마나 깊든 간에, 그것이 존재하는 한, 그것은 긍정적이다.
구체적인 조작은 의정의관리국이 발표한 교육용 동영상을 참고할 수 있다. 현재, 국가는 점차적으로 미래의 의료 및 거리에 대한 압력을 어느 정도 완화 할 수있는 항원 자체 테스트 테스트 키트 을 홍보하고 있습니다.
처음 두 가지 검사 방법 외에도 똑같이 중요하지만 많이 사용되지 않는 검사 방법, 즉' 혈청 항체 검사' 는 같은 면역 검사 방법에 속한다.
항체 검사를 위한 테스트 키트 및 항 원 검사는 아주 가깝다, 그러나 견본은 더 한정 되 다-시험 대상이 항체 이기 때문에, 견본은 명확한 항체 존재 하는 혈액 (또는 플라스마, 혈 청) 이어야 한다. 그리고 인체는 처음으로 바이러스에 감염된 후, 첫 번째 시간에 항체 생성을 하지 않는다. 항체, 일반적으로 첫 번째 감염 (또는 예방 접종) 후 1 ~ 2 주 정도 테스트 수준에 도달할 수 있어야 합니다. 이러한 조건은 항체 검사를 진단 테스트로 사용할 수 없도록 제한합니다. 현재 혈청 항체 검사는 백신이 특정 상황에서 효과가 있는지, 피실험자가 최근 코로나 감염 여부를 확인하는 방법으로만 사용되고 있다.
인체에는 IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 등 다섯 가지 항체 유형이 있습니다. IgA 는 주로 점막 면역을 담당한다. IgD 는 면역 반응의 활성화와 관련이 있습니다. IgE 는 기생충으로부터 보호되며 알레르기 반응에도 관여합니다. 나머지 IgG 와 IgM 은 면역체계가 병원체 대항 과정에서 파견한 주력이다.
신종 코로나 바이러스, 병원체, 주로 인체가 자극을 받은 후 분비된다. 기존 항체 검사 테스트 키트 는 주로 인체에서 생성되는 신종 코로나 바이러스 N 단백질 (핵 껍데기 단백질) 또는 S 단백질 (가시돌단백질) 에 대한 IgG 와 IgM 을 겨냥한 것이다.
항체 테스트 키트 검출 장치는 항원 검출과 모양이 같다. 이 둘의 차이점은 위에서 언급한 용접판, 검사선, 품질관리선에 부착된 물질이다.
이번에는 샘플 구멍에 떨어지는 샘플에 신종 코로나 바이러스 항체 가 포함될 수 있습니다. 따라서 결합 패드는 표시된 항원이어야 합니다. 물론 바이러스를 방출하는 것은 불가능합니다. 일반적으로 여기에 사용되는 항원 단백질은 위에서 언급한 N 단백질이나 S 단백질, 재조합 바이러스와 같이 설계되고 테스트됩니다. 그것이 무엇이든 간에, 그것은 수용체 결합 도메인 (RBD) 을 항체 결합의 과녁으로 포함해야 한다. 검사선에 항 IgM 또는 항 IgG 항체 부착을 통해 항원과 결합된 항체 단백질을 캡처합니다. 마지막으로, 항원의 특이항체 (Agent) 를 품질 관리 라인에 연결하여 나머지 자유 항원을 포착합니다.
요약하자면, 세 가지 검출 방법은 서로 다른 수요에 대해 각기 장점이 있고 서로 보완한다. 핵산검사, 금기준으로 바이러스의 RNA 를 직접 검사하여 환자에게 바이러스가 있는지 없는지 확인하세요. 항원 검출 은 일종 의 빠른 검출 방법 으로 바이러스 의 단백질 을 검사하는 것 이지만, 정확성 은 핵산검사 보다 못하여 전염성 에 강한 감염자 에게 더 효과적 이다. 항체 검사는 백신이 이미 발효되었는지, 그리고 최근에 그 바이러스에 감염된 사람이 있는지 검사했다.
최근 코로나 전염병이 각지에서 다시 발생하였다. Omicron 변형은 이전에 유행했던 Delta 변형보다 짧은 잠복기, 빠른 바이러스 복제, 크게 향상된 전염성, 사망률 및 심각성이 크게 감소했음에도 불구하고. 여러분들이 이런 환경에서 건강을 유지하시길 바랍니다.