마이크로 플레이트: 실험에 필요한 보드 수를 선택하십시오. 사용되지 않은 나머지 부품은 건조제 밀봉과 함께 원래 가방에 다시 넣는다. 1. 항억제소 bB 서브 유닛 항체 포개용 항억제소 B 포개용 마이크로판: 96 홀, 2-8 & ORDM; C 밀폐 보관.
2. 표준 A/ 샘플 희석액: 2ml× 1 병, 태우혈청, 0pg/mL 이량 체억제소 포함 B. 사용 전 2-8 & Ordm 은 C.2-8 에 저장됩니다. Ordmc 는 2 주 동안 보관할 수 있습니다. On-20 & ordm；; C 는 오랫동안 보관할 수 있습니다.
3. 표준 b-g (inhibinbstandsb-g):1밀리리터 × 6 병, 태아 소 혈청, 농도 10, 30,/klls 포함 처음 2-8&; Ordm 은 C.2-8 에 저장됩니다. Ordmc 는 2 주 동안 보관할 수 있습니다. On-20 & ordm；; C 는 오랫동안 보관할 수 있습니다.
4. 억제소 통제: 1 밀리리터 × 2 병, 농도 I 와 II, 태소 혈청, 저농도와 고농도 억제소 A 이량 체가 함유되어 있습니다. 처음 2-8&; Ordm 은 C.2-8 에 저장됩니다. Ordmc 는 2 주 동안 보관할 수 있습니다. On-20 & ordm；; C 는 오랫동안 보관할 수 있습니다.
5. 샘플 희석액 A: 10 ml× 1 병, 2-8 & ordm; C 아래에 저장합니다.
6. 샘플 희석액 B: 10 ml× 1 병, 2-8 & ordm; C 아래에 저장합니다.
7. 항체-바이오틴 결합물 (즉시 사용 가능): 10ml× 1 병, 바이오틴 마크가 포함된 항억제소 A 서브 유닛 항체. 2-8 & Ordm 은 c 아래에 저장됩니다.
8. 체인곰팡이 친화소-효소 결합물 (즉형형): 10ml× 1 병, 체인균과 매운 뿌리 과산화물 효소의 조합이 포함되어 있습니다. 2-8 & Ordm 은 c 아래에 저장됩니다.
9.TMB 기질 용액: 15ml× 1 병, 2-8&; Ordm 은 c 아래에 저장됩니다.
10. 종결액: 15ml× 1 병 (0.2M 황산 포함). 2-8 & Ordm 은 c 아래에 저장됩니다.
1 1. 세제 농축액: 100 ml× 1 병, 2-8&; Ordm 은 c 아래에 저장됩니다. 모든 시약 들은 실온으로 균형을 맞춰야 한다 (~ 25&; Ordmc) 완전 혼합. 표준품, 품질관리품, 테스트 대상 샘플은 동시에 한 양식에 두 부씩 만들어야 합니다.
1. 실험에 필요한 판자를 제거하고 각 구멍의 위치를 기록합니다.
2. 50 마이크로리터 표준품, 품질관리품, 테스트중인 샘플을 해당 구멍에 추가합니다.
3. 각 구멍에 25ul 샘플 희석제 a 를 추가합니다.
4. 각 구멍에 25ul 샘플 희석제 b 를 추가합니다.
5. 300-400rpm 의 속도로 흔들어서 실온에서 밤을 보낸다 (14- 18 시간).
6. 판자를 세 번 빨고 흡수지로 두드려 말립니다.
7. 각 구멍에 50 마이크로리터 항체-바이오틴 결합물을 넣는다.
8. 밀봉 플레이트는 500-700rpm 의 속도로 흔들리고 실온에서 65438 0.5 시간 동안 부화한다.
9. 판을 6 번 씻은 후 흡수용지에 두드려 말린다.
10. 구멍당 50 밀리리터 체인균과 매운 뿌리 과산화물 효소의 혼합물을 넣는다.
1 1. 밀봉 플레이트는 500-700rpm 으로 흔들리고 실온에서 20 분 동안 부화한다.
12. 세면대 6 번. 마지막으로 씻은 후, 세제를 구멍에 두고 15 분 후에 꺼내세요. 흡수지로 두드려 말리다.
13. 각 구멍에 100ulTMB 바닥 용액을 추가합니다.
14. 500-700 회전/분 속도로 흔들리고 어두운 실온에서 15-30 분 동안 부화한다.
15. 각 구멍에 100ul 끝단 용액을 추가합니다.
16.30 분 안에 450nm 를 읽습니다.
참고: 0 표준은 비어 있어야 합니다. 이중 파장 측정을 할 수 있다면 600 또는 620nm 에서 읽을 수 있고 450nm 에서 600(620)nm 의 흡수값을 빼면 광학 오차를 줄일 수 있다. 혈청 샘플을 이용하여 정맥천자를 통해 혈액을 수집하다. 샘플은 2-8&; 또는 ordmc 는 24 시간 동안 보관할 수 있습니다.-20&; Ordmc 이하는 30 일 동안 보관할 수 있습니다. 샘플의 반복적인 냉동과 해동을 피하다. 용혈성이나 혈지성 샘플을 사용해서는 안 된다. 실험 전에 냉동 샘플을 해동하고 완전히 혼합해야 한다.