누가 타코라닌 추출에 대한 지식을 소개할 수 있습니까? 그것에 대해 알려주세요.

1. 용제 추출

T-A2 는 물, 아세톤 수용액, 메탄올, 에탄올 등 유기용제의 특성에 용해되기 쉬우므로 용제 추출법으로 발효액에서 T-A2 를 추출할 수 있다. Bardone[ J] 등은 처음으로 물에 용해되지 않는 유기용제를 염화 C 1-C4 탄화수소나 C4-C6 메탄올을 사용하여 T-A2 를 추출했다. 먼저 발효액을 걸러내고 10% 염산 (염화나트륨 소량 포함) 으로 필터 pH 를 3.5 로 조절한 다음 부탄올로 추출한 다음 부탄올로 필터를 추출한다.

고속 원심 분리, 농축, 냉각, 침전은 거친 제품을 얻습니다. 균사체 워싱, 10% 염산으로 pH 를 3.5 로 조절한 다음 아세톤 수용액 (8: 2) 으로 추출하여 아세톤을 쪄서 PI-I 3.5 를 그대로 유지한다. 부탄올로 추출, 원심 분리, 농축, 냉각하여 거친 물질을 침전시키다. HPLC 와 미생물 측정을 통해 결합된 조산물의 순도는 64.8% 였다. 또 다른 특허는 약간 개선된 추출 방법을 보도했다. 아세톤, 아세토 니트릴, n-프로판올, 메틸 에틸 케톤, 디메틸 술폭 시드와 같은 수용성 유기 용제. 산성화된 발효액 (pH = 3 ~ 4) 에 직접 첨가해 T-A2 를 모아 원심이나 필터링을 통해 균사체를 제거하고 용액 부분을 농축하고 냉각시켜 굵은 T-A2 를 침전시킵니다. 수율은 64.5% ~ 88.7% 였다. 위의 2 단계 방법에 비해 이 방법은 조작이 간단하고 생산률을 높였다.

2 흡착법

T-A' 억제균의 원리는 UDP-N- 아세트포벽세라미드 -L- 아크릴 -D- 글루아미드아미드 -L- 라이아미닐 -D- 알라닌 (UDP- 5 펩타이드) 의 끝에 있는 유리카르복실기와 밀접하게 결합되는 것이다.

아크릴산 -D- 알라닌의 복합물은 세포벽의 정상적인 합성을 방해하여 세균의 성장을 억제한다. 그런 다음 T-A2 가 끝이 D-Ala-D-A 1A 인 펩타이드 세그먼트에 대해 높은 친화력을 가지고 있음을 증명합니다 (Ka = 1.5× 106) J. 이 메커니즘에 따르면, 디 펩티드 D-Ala-D-Ala 또는 폴리펩티드 X-D-Ala-D-Ala (X 는 아미노산 잔기) 를 담체에 연결하여 생물학적 선택성 친 화성 매체를 만들어 T-A2 를 효과적으로 분리하고 정제할 수 있다. 친화전달체는 진지, 글루칸, 섬유소, 폴리스티렌, 아크릴산 중합체 등 분자물질을 사용하여 가교 반응을 통해 D ~ Ala ~ D-Ala 또는 X-D-Ala-D-Ala 와 연결하여 친화매체를 형성할 수 있다. 또는 "팔" 이 있는 캐리어 (예: 6- 아미노기산, N- 히드 호박아미드 또는 지방산 체인) 는 위와 같은 플루토늄 세그먼트와 연결되어 친화매체를 형성하고 직접 만들 수 있습니다.

발효액을 이런 친화매체가 있는 색보열에 넣는다. 실험에 따르면 이 방법은 당류 항생제, 특히 T-A2 와 T- 1 유도물인 Corti 등을 효과적으로 분리할 수 있는 것으로 나타났다. Sepharos 4B-D-Ala-D-Ala 를 사용하여 발효액에서 T- 1 을 직접 정제합니다. 기둥을 올린 후 알칼리성 완충액으로 풀면 순도가 약 94% 인 T 를 얻을 수 있다.

-A, 생산율이 65% 에 달한다. 그리고 이 친화매체는 소변과 혈장의 T-A2 를 농축하고 정제하는 데도 성공했다. Folena-Wasser-Man 등은 AFI 젤 10-D-AA-D-Ala 로 T- 1 을 정제하여 좋은 결과를 얻었다.

흡착용액은 pH 9.50.4 mol/l 의 탄산수소 (아세토 니트릴 포함), pH 9.25 mol/l 의 탄산수소 나트륨 (아세토 니트릴 포함), PHLL 0.1MOL 과 같은 알칼리성 완충액일 수 있습니다 실험에 따르면 pH 가10 ~11.5+0.5 범위 내에 있는 탈착제는 97% 이상에 이를 수 있는 것으로 나타났다. 발효액 중 불순물이 많기 때문에 직접 기둥에 올라가면 시간이 길면 색보열을 오염시킬 수밖에 없다. 따라서 기둥을 오르기 전에 발효액 (예: 필터링, 추출, 침전 등) 을 초보적으로 분리할 수 있어 색상 스펙트럼 기둥의 수명을 늘릴 수 있을 뿐만 아니라 흡착 효과도 높일 수 있다. 또한 분자 흡착 원리에 기반한 폴리아미드 수지를 이용하여 T-A2 를 잘 분리할 수 있다는 것을 증명했다. 초기 정제 후 발효액을 pH 5.8 로 조절한 다음 폴리아미드 (CC-6, SC-6, cc6Ac, sc6Ac) 수지 기둥을 통해 메탄올 수용액 (9: 1) 으로 씻는다. 증발세제액 중의 메탄올을 증발시켜 아세톤을 넣고 저온 (5 C) 에서 pH 를 등전점으로 식히거나 조절하여 T-A2 를 침전시키며 순도는 85 이다. 또한 발효액의 초보적인 순화에서 pH 10.5 ~ 1 1 조건 하에서 균사체를 분리하면 최소한 90% 의 산물이 필터액에 들어간다. 그래서 이 단계는 TEC 를 만들 수 있다.

닝 정제 공정의 총 수율은 50% 증가했다.

3 이온 교환법

T- 1 의 화학구조로 볼 때, 그것은 아미노기와 카르복실기를 가지고 있으며, 일종의 양성화합물이다. 그래서 이온 교환 수지로 추출할 수 있다. 양이온 교환 수지 (IR 120 또는 Dowex50) 는 먼저 순화 전달체로 사용됩니다. 이후 폴리스티렌 디 에틸렌 벤젠 술폰산 나트륨 DOW [XFS-43278.002] 나트륨 수지로 T-A2 를 정제했다는 특허 보도가 나왔다. 발효액에 수지를 넣고 실온에서 6 시간 동안 저어주고 포화수지를 물로 씻은 다음, 수지를 필 0.5 의 수산화나트륨 용액에 넣고, pH 를 일정하게 유지하고, 2 시간 동안 저어주고, 수지를 걸러내고, 탈염농축하여 완제품 T-A2 를 얻는다. 산성 이온 교환 수지를 사용하면 T-A2 설탕 부분의 분해가 증가하고, 강한 알칼리성 이온 교환 수지는 T-A2 의 차향 이질화를 쉽게 증가시키며, 이온 교환 수지는 선택성이 좋지 않아 T-A2 를 정제하는 데 효과적으로 사용할 수 없기 때문에 이 방법의 적용 전망은 낙관적이지 않아 기자가 보는 경우는 드물다.

4 액상색보법

액체 크로마토 그래피는 화합물을 분리하고 확인하는 효과적인 방법입니다. 복잡한 혼합물을 효과적으로 분리하고 정제할 수 있습니다. Borghij 등은 역상고효율액조색보법으로 종이층층층층층과 박층층층층으로 얻은 T-A2 를 성공적으로 분리해 5 개의 단일성분인 T-A2-L ~ T-A2-5 를 얻었다. 공정은 다음과 같습니다. 용제 추출 또는 기타 방법으로 얻은 T-A2 는 0.2% 포름산 암모늄-아세토 니트릴 (9: 1) 에 용제로 용해됩니다.

1mol/L NaOH 로 pH 를 7.5 로 조정하고, 준비형 HPLC 기둥 (실리콘화 실리콘 기둥) 을 가져와 10% ~ 20% 아세토 니트릴과 0.2% 포름산 혼합 용액으로 선형으로 씻는다. HPLC 를 준비하여 농축액을 준비하고, 50% 아세톤에틸에테르 (1: 1) 를 넣어 T-A2-L 과 T- 를 침전시킵니다.

1 피트 2 인치. T ~ A2, T-A24 및 T-A2 는 반제비 HPLC(Whatman Partisil ODS M-9) 를 통해 얻을 수 있으며 0.2% 포름산 암모늄-아세토 니트릴 (76: 24) 을 사용할 수 있습니다. Cometti 등은 또한 저압으로 액상색보 (Jobin-Yron 기둥) 를 사용하여 T-A2 (유동상 Ci43cn/Nai-'I2po4 (27/23)) 를 정제했다. 장리화 등은 모의이동침대 크로마토 그래피로 타코라닌의 순화 조건을 연구하여 좋은 효과를 거두었다. 그러나 현재 이 방법은 아직 실험실 단계에 있다. 한편 한국의 자료에 따르면 현재 T-A2 의 순수화는 용제법과 HPLC 를 결합한 방법으로 수율이 65% 정도다.

참고 문헌-코알라닌 정제 기술의 연구 진척-왕증하, 오명, 강녕