WB 핵심 이론: 항원과 항체 간의 특이성 반응에서 저자는 WB 의 핵심 원리가 항원과 항체 간의 특이성 반응이라고 언급하는데, 이는 WB 에서 가장 중요한 요소인 항체, 특히 초급 항체 등을 포함한다. 적절한 일항과 이항이 WB 실험의 성공과 실험 결과의 품질 (WB 밴드와 배경) 을 결정한다. 우리는 항체 MAb (단일 복제 항체) 와 pAb (다중 복제 항체) 로 나눌 수 있다는 것을 알고 있습니다. 단일 복제 항체 는 특정 단일 항원 을 결합할 수 있는 반면, 다중 복제 항체 는 하나 이상의 항원 을 결합할 수 있다. 따라서 단일 복제 항체 특이성은 다중 복제 항체 보다 훨씬 강합니다. WB 실험에서 단일 복제 항체 검출 목적단백질은 대부분 단일 또렷한 띠로 실험효과가 좋다. 그러나 멀티 클론 항체 사용 시 멀티 스트라이프 또는 스트라이프 불분명, 실험 결과 품질이 좋지 않을 수 있습니다.

여기서 필자는 항체 생산과 제비의 역사와 기술에 대해 간단히 이야기하는데, 그것은 항체 생산의 질과 유형을 결정한다. 항체 생산 및 준비 과정은 세 단계로 나눌 수 있다. 전통적인 면역동물 취득 항체, 잡교종 기술 준비 항체 및 유전공학 준비 항체.

1. 면역동물이 항체 준비에 사용하는 전통적인 방법: 각종 방법으로 얻은 면역원 (항원) 을 동물 (쥐, 마우스, 토끼 등 초기 면역원의 제비, 순화 기술 및 비용 제한으로 인해 초기 기존 방법으로 준비한 항체 대부분이 다복제 항체. 이런 방식은 비용이 비교적 낮지만 대량의 동물을 사용해야 하기 때문에' 동물 학대' 를 초래하기 쉽다. 20 16 년, 항체 거물인 산타크루스는 동물 학대로 벌금형을 받고 다복제 항체 판매를 금지했다.

2. 교배종 기술준비 항체: 1975 년 영국 과학자 밀스탄과 프랑스 과학자 콜러는 마우스 출처의 B 림프세포와 종양세포를 융합해 교배종 세포를 형성했다. B 세포의 항체 생성 및 분비 기능뿐만 아니라 종양세포의 무한 증식 기능도 갖추고 있다. 기술적으로 먼저 피하주사, 복강 주사, 혈관 내 주사 등을 통해 면역원을 동물에게 주입하여 특정 B 세포를 생성하도록 자극한다. 그리고 동물을 처형하고 비장 B 세포를 수집한다. B 세포와 종양 세포를 체외에서 융합하여 잡교종 세포를 준비하고, 잡교종 세포를 선별하고, 체외 배양을 진행하다. 항체 은 체외 에서 교잡종 세포 를 증폭시키고 배양기 의 상청액 을 수집하고 순수화하거나 교잡종 세포 를 동물 체내 (혈관 복강 등) 에 주사하여 얻을 수 있다. ) 동물 체액 수집 및 정제 (복수, 혈청 등). ). 잡교종 기술은 1 세대 단일 복제 항체, 특이성이 강하여 대량 생산이 용이합니다.

3. 유전공학기술제제 항체: 유전자기능기술을 통해 연구원들은 체외 재편성-임의의 유전자 조각을 특정 표현 전달체 (입자) 에 삽입한 다음 편집된 입자를 특정 세포주와 세포주에 옮겨 체외 증폭과 배양을 할 수 있다. 이 유전자 조각을 체외에서 전사하고 번역하여 항체 준비. 유전공학은 항체 생산을 더 빨리 하고, 인간화 항체 편의를 높여 임상치료의 항체 약물이 된다. (윌리엄 셰익스피어, 유전공학, 유전자공학, 유전자공학, 유전자공학, 유전자공학, 유전자공학, 유전자공학) 이 기술이 생산하는 항체 () 는 특이성이 높은 균일 항체 () 로 산업화하기 쉬운 대규모 생산이다. 최근 몇 년 동안 Abcam 이 생산한 재편성 단일 복제 항체 는 이런 기술 생산 을 겨냥한 항체 로 특이성이 높고 친화력이 강하다.