다음으로 요구 사항을 살펴 보겠습니다.
1. 평행 접착제는 권장하지 않습니다. 평행 접착제와 박리막의 부화 시스템 작동 조건이 일치하지 않아 정량의 정확성에 영향을 미치기 때문에 내부 표지와 목적단백질이 같은 각인막에 있는 것이 좋습니다.
2. 상태 범위가 넓은 방법을 선택하여 신호 강도와 상량과의 선형 관계를 확인합니다. 예를 들어 필름 화학 발광은 동적 범위가 좁기 때문에 사용하지 않는 것이 좋습니다.
디지털 이미징은 필름보다 더 넓은 동적 범위와 더 정확한 수량화를 가지고 있습니다.
3. 총단백질을 사용하여 정규화하는 것이 좋습니다. 왜냐하면 가사단백질은 처리 조건의 영향을 받기 쉬우므로 양적 결과에 영향을 미치기 때문입니다. 총 단백질 정량을 사용하면 목적지 단백질 표현의 변화를 더 사실적으로 반영할 수 있다.
4.' JBC',' PLOS',' 세포' 등의 잡지와 같은 원시 데이터를 제출하려면 원시 데이터가 필요합니다.
정기 간행물의 요구 사항 중 일부를 완료했는데, 하늘색 사파이어 듀얼 모드 멀티 스펙트럼 레이저 이미징 시스템은 어떻게 정기 간행물의 단백질 각인 요구 사항을 충족하는 데이터를 얻을 수 있습니까?
사파이어는 최대 4 개의 레이저 소스와 4 개의 채널에 대한 형광 검사를 동시에 수행하는 다중 형광 감지 시스템으로, 보다 빠른 작업 흐름과 보다 안정적인 정량 데이터를 얻을 수 있습니다.
형광단백질 각인법은 형광기단 표기의 이항제를 이용하여 검출하는데, 막상 목표단백질의 농도는 보이는 형광신호의 강도와 선형적으로 관계가 있어 진실하고 믿을 만한 정량 분석을 가능하게 한다. 형광 염료는 방출 스펙트럼이 다르기 때문에 하나의 각인막에서 다양한 단백질을 감지할 수 있다. 이렇게 하면 대상 단백질과 참조 단백질이 같은 막에 있어 데이터 조작의 발생을 방지하고 저널 잡지에 더 쉽게 받아들여질 수 있다. (존 F. 케네디, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 성공명언)
그림 1: 서로 다른 형광기단으로 표시된 네 가지 이항제를 사용하여 최대 네 가지 다른 단백질을 동시에 감지할 수 있습니다. 헬라 세포 분해물을 로드하고,
항미관 단백질 (550nm, 녹색), 항근동단백질 (700nm, 빨간색), 항가프 (800nm, 회색),
항트랜스페린 (490nm, 파란색) 과 동시에 영상화, 교차 없음.
사파이어는 천청총단백질 형광 염료와 결합하여 세 가지 목표단백질을 정규화하여 믿을 수 있는 양적 Western Blotting 데이터를 생성할 수 있다.
총단백질의 표준화는 레인과 샘플 간의 차이를 교정하는 데 사용된다. 전통적인 방법은 스트라이프 그레이스케일 값과 강도의 변화가 샘플의 생물학적 변화로 인한 것인지, 샘플이나 샘플의 불일치 또는 샘플 준비의 차이로 인한 것인지 정확하게 알 수 없습니다. 총 단백질 표준화의 장점은 다음과 같습니다.
-응? 총단백질의 선형 검사 범위는 가사 유전자와 기타 내삼보다 넓다.
-응? 실험과 시스템 전반에 걸쳐 더욱 안정적이다.
-응? 그것은 실험 조건과 시스템이 결과에 미치는 영향을 효과적으로 제거할 수 있다.
-응? 표적 단백질 표현의 변화를보다 사실적으로 반영합니다.
그림 2. 총 단백질의 표준화와 정량: 마이크로소관 단백질 빨간색 채널, 근동 단백질 파란색 채널,
GAPDH 녹색 채널, 하늘색/총 단백질이 회색으로 표시됩니다.
그림 3. 총 단백질로 미관 단백질 신호를 표준화하여 적재 오차를 바로잡다.
사파이어는 세 가지 독특한 감지기 설계를 갖추고 있어 기기의 동적 범위를 극대화하여 결과의 정확성을 보장합니다.
PMT 탐지기는 블루 레이 감지 및 형광 스크린 이미징에 사용됩니다.
APD 탐지기는 근적외선, 빨간색 및 녹색 형광을 감지하는 데 사용됩니다.
CCD 검출기는 고감도의 화학 발광을 감지하는 데 사용됩니다.
(* 특허 기술)
★ Sapphire 는 journals 에 원시 데이터가 16bit 인 tiff 이미지를 제공합니다. 여기서 tiff 원시 데이터는 자르기, 픽셀 수정, 대비 조정 등을 거치지 않은 이미지로서 결과의 신뢰성과 신뢰성을 보장합니다.
사파이어는 형광각인막과 화학발광각인막을 감지할 수 있을 뿐만 아니라 동위원소 표기 샘플의 세포 내 western 구멍 영상, 젤 내 젤, 2D 및 2D DIGE, 슬라이스 스캔, 조직 영상, 동식물 영상, 인스크린 이미징도 할 수 있다.