2. 열순환을 변화시켜 약간의 역할을 할 수 있습니다. 제 방법은 50-60C 확대 10 배, 연장 시간은 AC 와 BD 로 설정되어 있습니다. 다음으로 어닐링 온도를 직접 72C 로 올리고 2 단계로 30 회 증폭하고 연장 시간을 AD 의 연장 시간으로 설정합니다. 아직 이상적인 결과를 얻지 못했지만 가장 많은 조각은 AC 와 BD 로 긴 조각은 매우 약하다.
3. Mybbff 판주가 말했듯이 나도 유인물 농도를 조정하려고 노력했다. 한건의 특허 기술인 TEM-PCR 을 본 적이 있는데, 그 중 관건은 프라이머 농도를 조정하여 단편부를 실현하는 것이다. 온도 변화와 결합하여 B 와 C 의 농도를 매우 낮췄고, 나는 A 와 D, B 와 C 의 차이를 50 배로 늘렸다 ... 내 생각은 BC 의 농도를 매우 낮은 수준으로 조절하여 대수증폭기 전에 소진하게 하는 것이다. TM 의 매우 높은 유인물만 다음 72C 까지 연장할 수 있도록 하는 것이다.
4. 현재 나는 아직 이상적인 결과를 얻지 못했고, 긴 조각의 양도 AC 와 BD 보다 훨씬 못하다. 제 생각은 프라이머와 겹치는 영역을 설계할 때 더 많은 주의를 기울여야 한다는 것입니다. 프라이머는 TM 값에서 큰 차이가 있어야합니다, a, d >；; B, c, a, d 프라이머가 약간 길다. 이러한 변화에 부합하고 절차를 조정하면 성공할 것이라고 믿습니다.