평평한 끝 연결의 경우 대량의 과녁 조각을 사용하여 캐리어의 자체 연결을 경쟁해야 합니다. 일반적으로 당신의 단편과 당신의 전달체의 무어비가 8: 1 이상인지 확인해야 더 높은 연결효율을 얻을 수 있습니다.

10μ l 시스템에서 T4 연결 효소는 보통 0.5μ l 을 사용합니다. 그런 다음 10: 1 의 무어비에 따라 조각과 운반체를 더하면 부피를 물로 보충할 수 있습니다.

또한 평평한 끝 연결이 실패한 주된 이유는 캐리어의 자체 연결이 매우 심각하기 때문입니다. 인산효소로 전달체를 처리하여 인산화, 즉 전달체 끝의 인산기단을 제거함으로써 전달체가 스스로 연결될 확률을 크게 낮추고 연결 성공률을 높일 수 있다.