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Crispr 효율성을 향상시키는 방법
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식물 게놈 편집에 관한 대부분의 연구는 화농성 연쇄상구균에서 온 CRISPR-Cas9 시스템 (SpCas9) 을 사용한다. SpCas9 의 식별은 특정 PAM 시퀀스 NGG 에 따라 달라지므로 시스템에서 편집 사이트의 선택 범위를 크게 제한할 수 있습니다. 이 문제를 해결하기 위해 연구자들은 다른 방향에서 해결책을 찾는다.

2065438+2006 년 3 월, 중국 벼연구소 왕검검검연구팀 연구원들은 점 돌연변이를 통해 Cas9 단백질의 돌연변이를 얻어 벼 게놈의 인접 서열을 편집하는 데 성공했다. 유전자 편집 부위의 선택 범위 (후 등, 20 16) 를 크게 넓혔다. 그러나 CRISPR-Cas9-VQR 시스템에 비해 CRISPR-Cas9 시스템의 편집 효율성이 여전히 낮아 벼에서의 시스템 보급을 제한하고 있다.

6 월 20 17, 12, 왕근검팀은 중과원 유전개발생물학 연구실 이가양 팀과 합작해' 효율성 향상? 벼 CRISPR-Cas9-VQR 정밀 게놈 편집 (후 등, 20 18) 은 sgRNA 의 구조를 최적화함으로써 벼 내인성 강발자를 이용하여 Cas9 와 변이체의 표현을 구동하여 벼 CRISPR-Cas9 와 CRRC 를 크게 높였다. 실험을 통해 벼에서 최고 편집효율은 거의 80%, 최고 상승폭은 8 배에 달할 수 있다. 동시에 이 시스템은 동료 효소 연결을 통해 여러 sgRNA 를 연결하고 여러 부위를 동시에 편집할 수 있습니다 (구축 방법은 왕춘 박사, 왕검검팀 20 15 가' 유전과 게놈학 저널' 에 발표한 문장 참조). 왕 등, 20 15). 멀티 사이트 편집에서는 효율성 향상이 더욱 두드러져 15 배에 달할 수 있다. 따라서 수정된 CRISPR-Cas9-VQR 시스템은 멀티 NGA 타겟 사이트를 편집하는 강력한 도구가 될 것입니다.