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简述从尿液中提取尿激酶的方法有哪些

从人尿中提取尿激酶的工艺流程:

收集尿液→除杂→处理尿液→硅胶吸附→吸附物进行盐析→清洗→洗涤→洗脱→硫酸沉淀→虹吸抽干的粗品

1、收集新鲜的尿液过滤,除去杂物,转入搅拌池中,关上排水阀。

2、搅拌池中的尿液加入硅胶,匀速且向一个方向搅拌2.5至3小时。(每50公斤加硅胶1公斤,加入的硅胶为中性的,预先处理好的)

3、搅拌好后打开排水阀,池中的尿液与硅胶一同由排水阀流出,这时预先要在排水阀上安装一个网状的布袋,使废弃的尿液由下水道排出,硅胶则被收集起来。

4、收集好的硅胶放入层析柱中,先用自来水来清洗,不控制其流速,待其废液的颜色与水的一样清时即可,若清洗许久都不清时可加入少量的氨水来调节。

5、清洗完毕后,调节层析柱的流速为800ml每分钟,用洗脱水(氨水120ml,尿激酶活性提高剂120g),进行洗脱。(此时要注意加入洗脱水时要确保柱体为一半偏上即可)

6、待上述液体全部流过后,重新调节层析柱的流速为600ml每分钟,加入解脱水(氯化铵3公斤,尿激酶活性提高剂60g至80g)进行洗脱,大约5至10分钟后,加入氨水7500ml至8000ml,将其洗脱液收集到一容器内。

7、在上步收集的液体中加入净化的饱和硫酸铵,搅拌均匀后,静置8小时使其沉淀。

8、将沉淀转入抽滤瓶内,虹吸抽干后,用小铁铲铲起,收集得到其粗品。