这几种形式的FLAG肯定是有不同的，至少长度不同。为什么要构建长度不同的FLAG标签呢？是这样的，大多数情况下FLAG标签会构建到蛋白的N端或者C端，而且大多数情况下蛋白的N端或者C端是游离在蛋白表面的，那么在这种情况下FLAG和3xFLAG没有什么区别，抗体都能结合得到。但是也有时候蛋白末端会被折叠到蛋白内部，或者被其他结合蛋白所遮蔽，那么更长的FLAG更有利于抗体结合表位的暴露，从而被抗体所结合。2. 这几种形式都有相同的地方，就是它们都含有DDDDK，而这个通常是FLAG抗体的结合表位（抗体结合表位长度一般为4-7个氨基酸），所以对大家常用的FLAG抗体来说，这几种标签没有什么区别，都可以识别。3. 3xFLAG会的抗体结合信号会不会比1x的更强？我认为不会，抗体结合的表位长度一般4-7个氨基酸，加上抗体本身非常巨大，抗体产生的空间位阻容不下第二个抗体结合在同一个3xFLAG上。