항원 자극의 림프세포는 국부적으로 세포인자를 생성하는데, 세포인자는 ELISPOT 판 하단의 PVDF 막에 있는 특이성 단일 복제 항체 (사전 패키지) 에 의해 캡처된다. 세포를 제거한 후, 포획된 세포인자는 바이오틴 마크의 단일 복제 항체 (single cloning phosphatase) 와 결합한 다음 알칼리성 인산효소나 매운 뿌리 과산화물 효소로 표시된 항바이오틴 단백질과 결합한다. 기질을 첨가한 후 PVDF 막에 보라색이나 적갈색 반점이 나타나 세포가 세포인자를 생산했다는 것을 보여준다. 반점은 ELISPOT 판독값에 의해 자동으로 계산되고 분석됩니다.
독일 AID 는 수년 동안 효소 연합 면역 반점 분석기 개발에 주력해 왔다. 1990 년대 이후 AID 는 전 세계의 과학 연구, 임상 및 제약 연구소에 대량의 효소 연합 면역 반점 리더를 제공했다. 각 분야의 응용은 곳곳에서 볼 수 있으며, 이미 전 세계 연구자들이 인정한 브랜드가 되었다.
AID 효소 연합 면역 반점 분석기를 이용하여 ELISPOT 보드의 각 구멍에 대한 반점 이미지를 자동으로 수집, 통계 및 분석하면 반점 수를 자동으로 얻고 세포인자의 분비 활성 값을 제공할 수 있을 뿐만 아니라 미리 설정된 해석 규칙에 따라 음성과 양성 결과를 직접 얻을 수 있으며 결과를 JPG, EXCEL, TXT, PPT 등으로 출력할 수 있습니다. 또한 데이터 관리 및 출력을 위해 연구실의 LMS 시스템에 연결하여 신뢰할 수 있는 ELISPOT 분석 도구가 될 수 있습니다.
또한 전통적인 ELISPOT 에도 한계가 있어 T 세포에 대해 생성되는 다양한 세포인자를 동시에 검출할 수 없다. 이 문제를 극복하기 위해 형광 마크를 기반으로 형광 면역 반점 분석 (형광 반점) 이 개발되었습니다. 이 새로운 형광 면역 각인 분석 기술은 단일 세포 수준에서 IFN-γ (녹색 형광 표시) 및 IL-2 (빨간색 형광 표시) 를 모두 표현하는 T 세포와 같은 다양한 세포인자를 표현하는 림프세포를 감지하는 데 사용할 수 있습니다.
독일 AIDSPOT Reader 는 처음으로 효소 결합 면역 반점 분석기를 적용하여 전통적인 ELISPOT 과 형광 면역 반점 형광 반점을 동시에 분석했습니다. AIDSPOT Reader 는 ELISPOT 판의 각 구멍에서 녹색 형광 반점 (FITC 마크 IFN-γ) 이미지와 빨간색 형광 반점 (Cy3 마크 IL-) 을 채집했습니다.
AID 효소 연합 면역반점 분석기는 세계적으로 유명한 ELISPOT 시약 생산업체인 스웨덴 Mabtech 의 제품을 사용하여 사람, 원숭이, 쥐, 쥐 세포 등 종, 수의사 분야에서 소, 양, 말, 돼지 등의 샘플에 대한 T/B 세포 면역 반응을 감지할 수 있다. IFN-γ 및 인터루킨 계열 외에도 TNF-α, 천공소, 입자효소 B 및 MIP-1β가 있습니다.
① 사람: apoE, GM-CSF, 입자효소 b, IFN-α (Subt.2, 8, 10, 14,/kloc IL- 12/-23(p40), IL- 12(p70), 13,/kloc/
② 원숭이: IFN-γ, IL-2, il-17;
③ 마우스: GM-CSF, IFN-α, IL-4, 5, 6, IL- 12/-23(p40), il-/kloc
④ 기타: 라임 병 반점, EBV-Spot, CMV-Spot, Trans Spot 테스트 키트;
⑤ 더 많은 T 세포 /B 세포 ELISPOT 과 형광반점 테스트 키트 문의주세요.
감도가 높다: 20 만 ~ 30 만 중 1 양성세포 검출률
직관적이고 믿을 만하다: 단세포 수준 검사, 하나의 양성세포는 하나의 반점이 있는데, 반점의 수는 세포가 분비하는 사이토 카인의 수를 나타내고, 반점의 크기는 세포가 분비하는 사이토 카인의 수준을 나타낸다.
고통: ELISPOT 보드 1 개를 96 회 테스트에 사용할 수 있으며, 연구원들은 하루에 수백 개의 샘플을 감지할 수 있습니다. 45 밀리리터의 혈액과 같은 소량의 세포만 있으면 600 종의 다른 항원/텅스텐의 반응을 테스트할 수 있다.
살아있는 세포의 기능 검사: 검출된 세포인자는 존재하지 않고 검사 과정에서 자극을 더하여 분비된다.
임상 실험 적용: 냉동 회복된 세포가 면역 기능을 잃지 않는 것은 임상 실험에 매우 중요하다. 처리 전후의 샘플은 병렬로 탐지할 수 있으며 결과는 반복할 수 있습니다. 실험에 여러 임상기구가 포함되는 경우 혈액 샘플을 냉동한 후 핵심 실험실로 운반해 검사를 받을 수 있다.
ELISPOT 은 과학 연구 도구일 뿐만 아니라 임상 진단에도 쓰인다. 최근 첫 번째 진단 플랫폼 (T-Spot. TB) ELISPOT 방법에 따라 SFDA 에서 출시를 승인합니다. 결핵 감염을 검출하는 이런 실험방법은 결핵 특이성 항원 자극의 IFN-γ 분비를 측정하여 특이성 T 세포 면역반응을 검출하는 것이다. 그것은 전통적인 가죽 시험을 대체할 수 있고, 민감성과 특이성을 크게 높일 수 있으며, 카드 백신 접종의 영향을 받지 않는다. ELISPOT 은 또한 B 형 간염, C 형 간염, EB 바이러스, 거세포 바이러스, 라임병과 같은 감염 예방 접종 연구 및 기타 전염병 진단에도 사용할 수 있습니다.
ELISPOT 법은 국제적으로 공인된 백신 세포 면역 수준을 탐지하고 평가하는 표준 도구이다. 국제적으로는 IFN-γ ELISPOT 법이 HIV 백신 연구에서 면역반응을 모니터링하는 데 널리 사용되고 있으며, ELISPOT 법은 국제에이즈 백신 행동계획에서 대량의 실험에서 T 세포의 기능을 평가하여 새로운 HIV 백신 후보를 모니터링하는 데 사용된다. ELISPOT 방법은 백신이 강력한 T 세포 반응을 유도하는 능력을 측정하여 백신의 효과를 정의한다. ELISPOT 방법은 백신 개발 및 설계에서 항원의 특이성 T 세포 에피토프를 선별하고 결정하는 데 사용할 수 있다. 이 정보는 또한 적절한 면역 전략과 면역 경로를 평가하는 데도 사용될 수 있다.
중국 의약품 바이오제품 검사소는' 예방성 DNA 백신 임상전 연구 기술 가이드' 와' 바이러스를 매개로 하는 생백신 제제 예방기술 지표 원칙' 에서 ELISPOT 법이 백신 세포 면역효과를 감지하고 평가하는 효과적인 방법이라고 지적했다. ELISPOT 기술은 T/B 세포 특이성 분비를 더 민감하게 감지하는 방법으로 소량의 항원 특이성 기억 T 세포를 검출하는 데 특히 중요하며, 에이즈 백신, B 형 간염 백신, 독감 백신, 각종 종양 백신 등 예방 백신과 치료성 백신의 개발과 평가에 널리 사용되고 있다.
감지된 다른 세포인자에 따라 ELISPOT 을 사용하여 서로 다른 활성 T 세포 하위 세트를 구분할 수 있습니다. Th 1 세포가 주로 IFN-γ, IL-2, TNF-α를 분비하는 경우, IL-4, IL-5, IL- 13 과 같은 다른 세포인자는 일반적으로 TV 에서 분비된다. 변태반응 연구의 한 가지 핫스팟은 ELISPOT 을 통해 Th2 세포인자를 측정하는 것이다. Th2 반응이 변태반응의 주요 반응이기 때문이다. 하지만 보통 낮은 빈도로 발생하며, 성공적으로 검출하려면 고감도의 방법이 필요하다.
특정 알레르기 반응에 대한 면역요법에서 T 세포 면역반응을 감시합니다. ELISPOT 방법은 세포 매개 체외 검사와 접촉성 변태반응 진단 앱에서 변태반응자들의 관심을 받고 있다. IL-4(Th2 반응의 주요 세포인자) 와 같은 인자에 대해서는 스트리밍 세포술, ELISA 와 같은 다른 방법으로 검출하기가 항상 어렵기 때문에 고감도의 ELISPOT 방법을 사용하여 알레르기 이성 면역반응을 연구하는 것이 특히 중요하다.
ELISPOT 기술은 I 형 당뇨병, 다발성 경화증, 중증 근력증, 전신성 홍반성 루푸스와 같은 질병의 병인학 분석, 질병 예측, 조기 진단, 지도 치료, 예후 분석과 같은 자가 면역성 질환의 진단과 병인학 연구에도 널리 사용되고 있다.
ELISPOT 은 주로 T 와 B 세포 분석에 사용되지만 단세포 수준에서 단백질 분비를 연구하고자 하는 모든 실험에도 적용된다. 이 방법은 LPS 가 PBMC 를 자극한 후 IL-6 과 IL-1을 분비하는 단핵세포의 정량 분석과 같이 세포 수가 중요하거나 생물학적인 실험에 특히 적합합니다. 또한 혈중에서 특히 적지만 활성화 후 분비되는 IFN-α는 ELISPOT 에 의해 쉽게 감지될 수 있는 혈장 세포 같은 수지상 세포와 같이 분비되는 세포의 수를 연구하는 데 특히 적합하다. (알버트 아인슈타인, Northern Exposure (미국 TV 드라마), Northern Exposure (미국 TV 드라마), 건강명언)
예를 들면
약물 스크리닝: 화합물 스크리닝 및 약물 면역 반응;
종양 면역 연구: 종양 환자의 체내에서 종양 이성 T 세포를 유도하는 백신 실험을 분석하는 데 사용되었습니다. 치료 전후의 특이성 세포 면역 반응 수준 검사는 치료 효과를 효과적으로 평가하고 치료와 약에 중요한 참고 정보를 제공한다.
이식 면역 연구: 이식 거부 반응의 예측.
출시 이후 전 세계적으로 65,438+0,500 개 이상의 실험실이 AID 효소 연합 면역 반점 분석기를 사용하고 있습니다. AID ELISPOT 리더의 하드웨어 및 소프트웨어는 유럽 연합 ce 인증, fda21cfrpart11사양 및 GMP/GLP 표준을 완벽하게 준수합니다.
스페 클 이미지 수집 및 계산
각 구멍의 이미지를 자동으로 수집하는 완전 자동 판독판; 반점 수 및 반점 관련 정보 (예: 크기, 면적, 광밀도 등) 를 자동으로 계산합니다. 내장 된 다른 요인 매개 변수 설정, 직접 호출; CountAID 기능은 읽기 매개 변수를 최적화하는 데 도움이 되며 스마트 매개 변수 메모리 기능을 제공합니다.
결과 분석
음과 양 테스트 결과를 직접 판단하십시오. 진단 모듈 AIDiagnostic 은 임상 진단을 위해 ELISPOT 실험의 결과를 해석하고 각 환자의 스펙클 이미지와 결과 보고서를 별도로 출력하는 데 사용됩니다. 통계분석은 각 구멍의 반점 분포, 면역반응 비교, 세포인자 분비의 정량 비교 등을 분석한다.
데이터 출력 및 품질 관리
단일 구멍 이미지, 모든 구멍 이미지 및 전체 보드 이미지를 내보낼 수 있습니다. 다양한 저장 형식, Excel, Txt, PPT 등 출력 데이터는 점 번호, SFU, 광 밀도 강도, 활동, 점 분포 등을 포함하도록 사용자 정의할 수 있습니다. 품질 관리 모듈 포함, 운영 내역 자동 기록, GLP 사양 준수
형광 2 색 ELISPOT 분석-Fluoro Spot 은 특허 형광 이미지 오버레이 기술을 사용하여 다색 인자가 함께 분비되는 반점의 정확한 인식을 보장하고 효소 2 색 검사에서 서로 다른 세포인자 분비의 불균형으로 인한 오심을 방지합니다. 4-8 비트 필터 휠, 완전 자동 전환, 최소한 FITC 및 Cy3 형광 필터가 표준으로 제공되며 다른 파장을 추가할 수 있습니다.
완전 자동 번역
ISpot 는 FITC 마크의 IFN-γ 및 Cy3 마크의 IL-2 분비를 감지하는 것과 같이 플레이트 구멍에 있는 다양한 색상의 형광점을 각각 이미지화하고, 소프트웨어는 서로 다른 형광 이미지를 자체 겹쳐서 공분비 (IFN-γ&;) 를 정확하게 인식합니다. IL-2) 세포. 전체 프로세스는 완전히 자동화되어 수동 개입이 필요하지 않습니다.
성능 안정성, 호환성 및 확장성
고에너지 자극은 약한 형광 신호 감지를 보장하고, 좁은 벨트 필터는 특정 신호 감지를 보장하며, 다색 확장은 필터만 있으면 됩니다.
기술 진보
세계 최초의 효소 연합 반점 분석기, 1996 은' ELISPOT 검사 혈구 활성' 특허를 발명했습니다. 유일한 특허 PCT/EP 2008/009112 ‐ 플루오르산은 형광 필터를 기반으로 한 형광 다색 ELISPOT 감지 시스템입니다.
학술 출판 권위
2007 년 형광 제품 출시부터 현재까지 형광 ELISPOT 응용에 관한 SCI 문헌의 80% 가 AID 에 의해 발표돼 공인된 형광 검사에 좋은 선택이다.
국제적 인정도가 높다
옥스퍼드 대학 옥스퍼드 면역학 연구소와 긴밀하게 협력해 개발한 것으로 결핵 T-Spot 진단을 위한 전용 도구이다. 국제 에이즈 백신 행동기구 (IAVI) 지정 브랜드 스웨덴 Mabtech 와 같은 세계적으로 유명한 ELISPOT 테스트 키트 개발 연구소 전용 브랜드.
AID 효소 연합 면역 반점 분석기 평가판을 신청하려면 1352 1452266 으로 연락해 주세요.
--독일 원조 중국 1 급 대리인, 베이징 제평